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常用生化試劑
檸檬酸—檸檬酸鈉粉劑(10mmol/L,pH6.0)
基本售價：8.00元
Sodium Citrate Buffer(0.01mol/L, pH6.0, powder),1L/pack【保存條件】 室溫保存，有效期 2 年 【概述】 檸檬酸-檸檬酸鈉抗原修復液是一種最常用的抗原修復液，可以用于多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的石蠟切片、冰凍切 片的抗原修復。 細胞或組織多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導致蛋白之間的交聯，遮蔽了樣品的抗原位點，導致免疫染色時 染色信號減弱，甚至出現一些假陽性染色結果，這就需要對組織進行抗原修復。 通常石蠟切片都需進行抗原修復處理，而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復會大大改善石蠟切片的免疫染色 效果，對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善，特別是當冰凍切片免疫染色效果欠佳時，可以考慮嘗試進 行抗原修復。從原理上來看，無論冰凍切片還是細胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進行抗 原修復都會有效去除蛋白之間的交聯，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。 本產品特別適用于石蠟切片，也可以用于冰凍切片。 【使用建議】 實驗前準備： 本產品為干粉，使用時用蒸餾水或去離子水溶解，定容至 1L，如需必要，可使用鹽酸調 pH值至 6.0。 抗原修復： 1. 高壓蒸汽法 a. 抗原修復：壓力鍋中加入足以淹沒切片的抗原修復液，加熱至沸騰。 b. 將脫蠟至水的切片置染色架上，放入鍋中，蓋好鍋蓋，扣上壓力閥加壓，設置保壓 4 min。 c. 壓力下降后打開鍋蓋，放置室溫冷卻，待溶液冷卻至室溫后取出切片。 d. PBS 或 TBS 洗滌 3 次，每次 5 min，隨后即可進行后續的免疫染色步驟。 2. 蒸煮鍋法 a. 將置于染色架上的切片放于抗原修復液中，95~100°C 加熱 10~20 min。 b. 冷卻至室溫后取出，PBS 或 TBS 洗滌 3 次，每次 5 min，隨后即可進行后續的免疫染色步驟。 3. 微波法 a. 向微波爐專用容器中加入抗原修復液，加熱至沸騰。 b. 將脫蠟至水的切片置染色架上，放于容器中，煮沸 10~20 min。 c. 冷卻至室溫后取出，PBS 或 TBS 洗滌 3 次，每次 5 min，隨后即可進行后續的免疫染色步驟。 4. 對于其他切片對于其它樣品的抗原修復，可以參考石蠟切片的步驟進行。 【注意事項】 1. 抗原修復的時間為建議時間，請根據不同的樣品、抗體和抗原自行摸索。 2. 抗原修復后，待溶液冷卻至室溫后再取出切片，使抗原表位在經歷高溫后復原。 3. 抗原修復液的加入量要足以淹沒切片幾厘米，防止在煮沸過程中切片變干。 4. 抗原修復過程需使用耐熱染色架進行操作。 5. 試劑有潮解性，若有潮解請放心使用。 6. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
EDTA抗原修復液（50×） pH8.0
基本售價：90.00元
EDTA Antigen Retrieval Solution,50×,pH8.0【保存條件】 4oC 保存 【概述】 EDTA 抗原修復液是一種常用的抗原修復液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。 細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導致蛋白之間的交聯(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現一些假陽性染色結果。 本抗原修復液采用了廣泛使用的 EDTA，可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 對于石蠟切片： a. 脫蠟：二甲苯 3 次，每次 3-5min→ 無水乙醇 2 次，每次 3-5min→ 95％乙醇 1 次，3-5min→90%乙醇 1 次，3-5min→ 75％乙醇 1 次，3-5min→ 蒸餾水洗 2 次，每次 3-5min。 b. 抗原修復： ① 用去離子水稀釋 EDTA 抗原修復液(50×,pH8.0)至 1×，例如 1ml 本抗原修復液(50×)加入49ml 去離子水，混合均勻，即得 50ml 1×抗原修復液；② 將切片浸泡在抗原修復液(1×)中；95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20min 內，最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。 隨后大約在 20-30 min 內冷卻至室溫。③ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。 2. 對于冰凍切片： ① 用去離子水稀釋 EDTA 抗原修復液(50×,pH8.0)至 1×，例如 1ml 本抗原修復液(50×)加入49ml 去離子水，混合均勻，即得 50ml 1×抗原修復液； ② 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5min； ③ 將切片浸泡在抗原修復液 (1×)中，95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20min 內，最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 min 內冷卻至室溫。 ④ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。 3. 對于其它樣品的抗原修復，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。 【注意事項】 1. 本品含 Tween-20，可提高細胞通透性，95-100℃加熱時出現氣泡屬于正常現象。 2. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 3. 用后請及時擰緊瓶蓋，以防揮發。
改良檸檬酸鈉抗原修復液(50×)
基本售價：110.00元
Improved Citrate Antigen Retrieval Solution,50× 【保存條件】 4℃保存，一年有效【概述】 1. 檸檬酸鈉抗原修復液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一種最常用的抗原修復液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。2. 細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導致蛋白之間的交聯(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現一些假陽性染色結果。本抗原修復液對檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0)經過改進，可以更有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。【操作方法】 1. 對于石蠟切片：2. a. 脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5分鐘，兩次。90%乙醇 5 分鐘，兩次，70%乙醇 5 分鐘，一次。蒸餾水 5 分鐘，兩次。3. b. 抗原修復：用重蒸水或 Milli-Q 水將本抗原修復液(50×)稀釋 50 倍，配制成抗原修復液(1×)，例如1ml 本抗原修復液(50X)加入 49ml 重蒸水或 Milli-Q 水，混合均勻，即得 50ml 抗原修復液(1×)。將切片浸泡在抗原修復液(1×)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內，最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。4. 對于冰凍切片：5. 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復液(1×)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內，最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。6. 對于其它樣品的抗原修復：可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。【注意事項】 1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。3. 本產品含有少量的特殊去垢劑，抗原修復過程中加熱時會產生非常細密的氣泡而呈現均勻的渾濁狀，屬于正常現象，請放心使用。
檸檬酸鈉-EDTA抗原修復液(40×)
基本售價：100.00元
Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution,40× 【保存條件】 4℃或-20℃保存，一年有效【概述】 1. 檸檬酸鈉-EDTA 抗原修復液(Citrate-EDTAAntigen Retrieval Solution)是一種常用的抗原修復液，結合了檸檬酸鈉和 EDTA 進行抗原修復的優點，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。2. 細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導致蛋白之間的交聯(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現一些假陽性染色結果。抗原修復液采用了常用的檸檬酸鈉緩沖液和 EDTA，結合了兩者修復抗原的優點，并經過適當優化，可以更加有效地去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。【操作方法】 1. 對于石蠟切片： a. 脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5 分鐘，兩次。90%乙醇 5 分鐘，兩次，70%乙醇 5 分鐘，一次。蒸餾水 5 分鐘，兩次。b. 抗原修復：用重蒸水或 Milli-Q 水將本抗原修復液(40×)稀釋 40 倍，配制成抗原修復液(1×)，例如 1ml本抗原修復液(40X)加入 39ml 重蒸水或 Milli-Q 水，混合均勻，即得 40ml 抗原修復液(1×)。將切片浸泡在抗原修復液(1×)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內，最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。2. 對于冰凍切片： 3. 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復液(1×)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內，最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。4. 對于其它樣品的抗原修復：可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。【注意事項】 1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 凍存的本產品需適當加熱后才能完全溶解。同時由于本產品含有少量的特殊去垢劑，加熱后會產生非常細密的氣泡而呈現非常均勻的類似渾濁狀，屬于正常現象，并非不溶解或產生了沉淀。室溫放置較長時間后，例如 1-2 天，溶液會完全澄清。對于溶解后呈現非常均勻的類似渾濁狀的本產品，此時即可取適量稀釋后使用。抗原修復過程中加熱時也會產生非常細密的氣泡而呈現均勻的渾濁狀，也屬于正常現象，請放心使用。3. 本抗原修復液使用前必須用重蒸水或 Milli-Q 水稀釋 40 倍，配制成抗原修復液(1X)。
多聚賴氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml)
基本售價：258.00元
Poly-L-lysine Solution, 1mg/ml【保存條件】 -20℃保存，有效期 2 年。 【概述】 Poly-L-lysine 的中文名為多聚賴氨酸，簡稱 PLL。本 Poly-L-lysine 為 Poly-L-lysinehydrobromide，分子式為 L-Lys-(L-Lys)n-LLys· xHBr，分子量為 150,000-300,000，CAS Number25988-63-0。 多聚賴氨酸溶液是廣泛應用的組織切片與玻片黏合劑，該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會產生較強的黏合力。培養瓶表面的性質對于細胞培養至關重要，細胞表面的糖蛋白（陰性）易于吸附在親水性的表面上，因而細胞培養表面如果有相當含量的陽性電荷更能促進細胞吸附，這正是運用多聚賴氨酸優化細胞培養表面的重要所在。 多聚賴氨酸溶液適用于組織學、免疫組織化、冰凍切片、細胞涂片、原位雜交等使用的玻片的防脫片處理，以防實驗操作過程中組織掉片。也可用于細胞培養，增加細胞貼壁能力。 本產品未經除菌處理，如若用于促進細胞貼壁生長，請自行用 0.22μm 濾膜過濾除菌或選擇 ECOTOP 的多聚賴氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml,無菌)（貨號：ES-8309）。 【使用建議】 用作粘片劑時：通常宜把 Poly-D-lysine 配置成 0.1-1mg/ml 溶液（本產品推薦稀釋成 1×使用，即 10ml 1mg/ml 多聚賴氨酸溶液加 90ml 無菌水稀釋），隨后根據需要把載玻片或蓋玻片在多聚賴氨酸溶液中處理 1-10 分鐘。隨后室溫晾干即可使用。 用于促進細胞的貼壁生長時：根據實驗需要把多聚賴氨酸配制成適當濃度溶液后即可使用。不同的細胞，多聚賴氨酸鋪被(Coating)的時間和濃度有所不同，請自行參考相關文獻進行適當的鋪被。配制成溶液后可-20℃保存。多聚賴氨酸用于細胞培養時，較為常用的鋪被(Coating)濃度為 0.1mg/ml，鋪被至少 5 分鐘，有些實驗需要鋪被 1-2 小時，有些情況則需要鋪被過夜。隨后吸除多聚賴氨酸溶液，干燥培養器皿，至肉眼觀察完全干燥。通風櫥內吹風數分鐘即可完成干燥，對于有些實驗則需要干燥 2 小時或更長時間。干燥時間較長通常會更加有利于后續的細胞粘附。隨后即可直接進行細胞培養，也可以用水、PBS 或培養液等適當溶液潤洗后再進行細胞培養。 【注意事項】 1. 第一次使用本試劑時建議先取 1～2 個樣品做預實驗。 2. Poly-L-lysine 和 Poly-D-lysine 都可以用于促進細胞的貼壁生長。Poly-L-lysine 可以被某些細胞所消化并吸收，攝入過多的 Poly-L-lysine 會產生一定的細胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine 有細胞毒性的情況，可以考慮選購 Poly-D-lysine。 3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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