EDTA Antigen Retrieval Solution,50×,pH8.0

【保存條件】 

4oC 保存 

【概述】 

EDTA 抗原修復(fù)液是一種常用的抗原修復(fù)液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或 其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。 

細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的 抗原位點，導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。 

本抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的 EDTA，可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石 蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。 

【操作方法】 

1. 對于石蠟切片： 

a. 脫蠟：二甲苯 3 次，每次 3-5min→ 無水乙醇 2 次，每次 3-5min→ 95％乙醇 1 次，3-5min→ 90%乙醇 1 次，3-5min→ 75％乙醇 1 次，3-5min→ 蒸餾水洗 2 次，每次 3-5min。 

b. 抗原修復(fù)： 

① 用去離子水稀釋 EDTA 抗原修復(fù)液(50×,pH8.0)至 1×，例如 1ml 本抗原修復(fù)液(50×)加入 49ml 去離子水，混合均勻，即得 50ml 1×抗原修復(fù)液；

② 將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中；95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min 內(nèi)，最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需 預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐 加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。 隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。 ③ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。 

2. 對于冰凍切片： 

① 用去離子水稀釋 EDTA 抗原修復(fù)液(50×,pH8.0)至 1×，例如 1ml 本抗原修復(fù)液(50×)加入 49ml 去離子水，混合均勻，即得 50ml 1×抗原修復(fù)液； 

② 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5min； 

③ 將切片浸泡在抗原修復(fù)液 (1×)中，95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min 內(nèi)，最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需 預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐 加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。 

④ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。 

3. 對于其它樣品的抗原修復(fù)，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。 

【注意事項】 

1. 本品含 Tween-20，可提高細胞通透性，95-100℃加熱時出現(xiàn)氣泡屬于正常現(xiàn)象。 

2. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

3. 用后請及時擰緊瓶蓋，以防揮發(fā)。