Hoechst33342 Stain Solution(1mg/ml)【保存條件】 -20℃避光保存,有效期 1 年。 【概述】 Hoechst 33342,也稱 bisBenzimide H 33342 或 HOE 33342。分子式為C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量為 615.99,CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst33342 染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst33342 也常用于普通的細胞核染色,或常規的 DNA 染色。Hoechst 33342 的最大激發波長為 346nm,最大發射波長為 460nm;Hoechst 33342 和雙鏈 DNA 結合后,最大激發波長為 350nm,最大發射波長為 461nm。本 Hoechst 33342 染色液濃度為 1mg/ml,可稀釋后用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可稀釋后用于活細胞或組織的細胞核染色。 【使用方法】 使用前用生理鹽水或 PBS 將 Hoechst 33342 染色液稀釋 100 倍,即為工作液。 A 對于固定的細胞或組織: 1. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行 Hoechst 33342 染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的 Hoechst 33342 染色。 2. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量 Hoechst 33342 工作液,覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品 3 倍體積的工作液,混勻。室溫放置 3-5 分鐘。 3. 吸除 Hoechst 33342 染色液,用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次,每次 3-5 分鐘。 4. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。 B 對于活細胞或組織: 1. 加入適當量 Hoechst 33342 工作液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入 1mL 工作液,對于 96 孔板一個孔需加入 100μL 工作液。 2. 在適宜于細胞培養的溫度下培養 20-30 分鐘。棄染色液,用 PBS 或培養液洗滌 2-3 次即可進行熒光檢測。 【效果圖】 本產品用于活細胞染色效果參考圖:圖 1.正常培養的 HeLa 細胞用本產品染色后的實拍效果圖。圖 A 為正常細胞 Hoehst 33342 的染色效果圖。圖 B 中除了正常細胞外,還清晰可見呈現致密濃染的凋亡細胞。【注意事項】 1. Hoechst 33342 對人體有害,請注意適當防護。 2. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。 3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 4. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
Hoechst33258 Stain Solution【保存條件】 -20℃避光保存,有效期 6 個月。 【概述】 Hoechst 33258,也稱 bisBenzimide H 33258 或 HOE 33258。分子式為 C25H24N6O·3HCl,分子量為 533.88,CASNumber 23491-45-4。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst 33258 染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色,或常規的 DNA 染色。Hoechst 33258 的最大激發波長為 346nm,最大發射波長為 460nm;Hoechst 33258 和雙鏈 DNA 結合后,最大激發波長為 352nm,最大發射波長為 461nm。本 Hoechst 33258 染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。 【使用方法】 該產品使用時應室溫解凍并充分搖勻。 1. 對于固定的細胞或組織: a. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行 Hoechst 33258 染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的 Hoechst 33258 染色。 b. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量 Hoechst 33258 染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液,混勻。室溫放置 3-5 分鐘。 c. 吸除 Hoechst 33258 染色液,用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次,每次 3-5 分鐘。 d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。 2. 對于活細胞或培養的組織: a. 加入適當量 Hoechst 33258 染色液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入 1ml 染色液,對于 96 孔板一個孔需加入 100 微升染色液。 b. 在適宜于細胞培養的溫度培養 20-30 分鐘。棄染色液,用 PBS 或培養液洗滌 2-3 次即可進行熒光檢測。細胞發生凋亡時,在熒光顯微鏡下觀察會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。 【效果圖】 本產品用于活細胞染色效果參考圖:圖 A 為正常細胞 Hoehst 33258 的染色效果圖。圖 B 中除了正常細胞外,還清晰可見呈現致密濃染的凋亡細胞?!咀⒁馐马棥? 1. Hoechst 33258 對人體有害,請注意適當防護。 2. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。 3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 4. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。