【保存條件】

4℃或-20℃保存，一年有效

【概述】

1. 檸檬酸鈉-EDTA 抗原修復(fù)液(Citrate-EDTAAntigen Retrieval Solution)是一種常用的抗原修復(fù)液，結(jié)合了檸檬酸鈉和 EDTA 進(jìn)行抗原修復(fù)的優(yōu)點(diǎn)，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。

2. 細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點(diǎn)，導(dǎo)致免疫染色時(shí)染色信號減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。抗原修復(fù)液采用了常用的檸檬酸鈉緩沖液和 EDTA，結(jié)合了兩者修復(fù)抗原的優(yōu)點(diǎn)，并經(jīng)過適當(dāng)優(yōu)化，可以更加有效地去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

【操作方法】

1. 對于石蠟切片：

a. 脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5 分鐘，兩次。90%乙醇 5 分鐘，兩次，70%乙醇 5 分鐘，一次。蒸餾水 5 分鐘，兩次。

b. 抗原修復(fù)：用重蒸水或 Milli-Q 水將本抗原修復(fù)液(40×)稀釋 40 倍，配制成抗原修復(fù)液(1×)，例如 1ml本抗原修復(fù)液(40X)加入 39ml 重蒸水或 Milli-Q 水，混合均勻，即得 40ml 抗原修復(fù)液(1×)。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時(shí)間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi)，最佳的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

2. 對于冰凍切片：

3. 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時(shí)間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi)，最佳的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

【注意事項(xiàng)】

1. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2. 凍存的本產(chǎn)品需適當(dāng)加熱后才能完全溶解。同時(shí)由于本產(chǎn)品含有少量的特殊去垢劑，加熱后會產(chǎn)生非常細(xì)密的氣泡而呈現(xiàn)非常均勻的類似渾濁狀，屬于正常現(xiàn)象，并非不溶解或產(chǎn)生了沉淀。室溫放置較長時(shí)間后，例如 1-2 天，溶液會完全澄清。對于溶解后呈現(xiàn)非常均勻的類似渾濁狀的本產(chǎn)品，此時(shí)即可取適量稀釋后使用。抗原修復(fù)過程中加熱時(shí)也會產(chǎn)生非常細(xì)密的氣泡而呈現(xiàn)均勻的渾濁狀，也屬于正常現(xiàn)象，請放心使用。

3. 本抗原修復(fù)液使用前必須用重蒸水或 Milli-Q 水稀釋 40 倍，配制成抗原修復(fù)液(1X)。