【保存條件】
-20℃保存,有效期 2 年。
【概述】
Poly-L-lysine 的中文名為多聚賴氨酸,簡稱 PLL。本 Poly-L-lysine 為 Poly-L-lysine hydrobromide,分子式為 L-Lys-(L-Lys)n-LLys· xHBr,分子量為 150,000-300,000,CAS Number 25988-63-0。
多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑,該多聚陽離子分子與組織切片上 的陰離子相互作用會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的黏合力。培養(yǎng)瓶表面的性質(zhì)對于細(xì)胞培養(yǎng)至關(guān)重要,細(xì)胞表 面的糖蛋白(陰性)易于吸附在親水性的表面上,因而細(xì)胞培養(yǎng)表面如果有相當(dāng)含量的陽性 電荷更能促進(jìn)細(xì)胞吸附,這正是運(yùn)用多聚賴氨酸優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)表面的重要所在。
多聚賴氨酸溶液適用于組織學(xué)、免疫組織化、冰凍切片、細(xì)胞涂片、原位雜交等使用的 玻片的防脫片處理,以防實(shí)驗(yàn)操作過程中組織掉片。也可用于細(xì)胞培養(yǎng),增加細(xì)胞貼壁能力。
本產(chǎn)品未經(jīng)除菌處理,如若用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁生長,請自行用 0.22μm 濾膜過濾除菌或 選擇 ECOTOP 的多聚賴氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml,無菌)(貨號:ES-8309)。
【使用建議】
用作粘片劑時(shí):通常宜把 Poly-D-lysine 配置成 0.1-1mg/ml 溶液(本產(chǎn)品推薦稀釋成 1×使用, 即 10ml 1mg/ml 多聚賴氨酸溶液加 90ml 無菌水稀釋),隨后根據(jù)需要把載玻片或蓋玻片在 多聚賴氨酸溶液中處理 1-10 分鐘。隨后室溫晾干即可使用。
用于促進(jìn)細(xì)胞的貼壁生長時(shí):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要把多聚賴氨酸配制成適當(dāng)濃度溶液后即可使用。 不同的細(xì)胞,多聚賴氨酸鋪被(Coating)的時(shí)間和濃度有所不同,請自行參考相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行適 當(dāng)?shù)匿伇弧E渲瞥扇芤汉罂?20℃保存。多聚賴氨酸用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),較為常用的鋪被(Coating) 濃度為 0.1mg/ml,鋪被至少 5 分鐘,有些實(shí)驗(yàn)需要鋪被 1-2 小時(shí),有些情況則需要鋪被過夜。 隨后吸除多聚賴氨酸溶液,干燥培養(yǎng)器皿,至肉眼觀察完全干燥。通風(fēng)櫥內(nèi)吹風(fēng)數(shù)分鐘即可完成干燥,對于有些實(shí)驗(yàn)則需要干燥 2 小時(shí)或更長時(shí)間。干燥時(shí)間較長通常會(huì)更加有利于后 續(xù)的細(xì)胞粘附。隨后即可直接進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),也可以用水、PBS 或培養(yǎng)液等適當(dāng)溶液潤洗后 再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
【注意事項(xiàng)】
1. 第一次使用本試劑時(shí)建議先取 1~2 個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
2. Poly-L-lysine 和 Poly-D-lysine 都可以用于促進(jìn)細(xì)胞的貼壁生長。Poly-L-lysine 可以被某 些細(xì)胞所消化并吸收,攝入過多的 Poly-L-lysine 會(huì)產(chǎn)生一定的細(xì)胞毒性。如果遇到 Poly-L-lysine 有細(xì)胞毒性的情況,可以考慮選購 Poly-D-lysine。
3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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