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試劑盒
生化試劑盒，elisa試劑盒，質粒提取類試劑盒
Caspase-1活性檢測試劑盒 BC3810-20T
基本售價：850.00元
Caspase-1活性檢測試劑盒產品簡介有效期-20℃儲存條件6個月中文名稱Caspase-1活性檢測試劑盒英文名稱Caspase-1 Activity Assay Kit別名Caspase1活性測定試劑盒檢測方法比色法 Colorimetric規格20T 50T 100TCaspase-1是唯一可剪切IL-1b和IL-18前體產生活性細胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前體蛋白產生20kD和10kD片斷，這兩個片斷可以形成異源二聚體，并進一步形成四聚體。描述：細胞凋亡屬于程序化細胞死亡，可見于各種器官和細胞，在正常發育、生理、病理過程中對細胞和器官的穩態具有十分重要的調節作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細胞凋亡過程的蛋白酶家族，包含10多個成員。其中Caspase-1是唯一可剪切IL-1b和IL-18前體產生活性細胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前體蛋白產生20kD和10kD片斷，這兩個片斷可以形成異源二聚體，并進一步形成四聚體。此四聚體具有蛋白酶活性。Caspase-1通過剪切Bcl-XL調節細胞凋亡，并通過對細胞因子前體的剪切來調控相關細胞因子介導的免疫炎性反應。試劑盒測定原理基于Caspase-1特異水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA (Ac-YVAD-pNA)，釋放出游離的硝基苯胺pNA，后者呈黃色在405 nm具有最大吸收峰，用可見光分光光度比色方法測定。其吸光度值對應于Caspase-1的水解活性。反應體系100微升，試劑盒提供的試劑，除標準曲線外可進行50或100次樣品測定。適用：測定哺乳動物組織、細胞caspase-1活性。組成與儲存：1. 裂解緩沖液： 20 ml ，4 oC2. 反應緩沖液： 10 ml ，4 oC3. 2 mM Ac-YVAD-pNA底物： 0.5 ml，－20 oC避光4. 10 mM pNA標準品： 0.5 ml，－20 oC避光以上標出的量為100次檢測，50次檢測的試劑量減半。試劑常溫運輸。到達后按要求儲存，1年內穩定。所需儀器：酶標儀與96孔酶標板；或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。工作波長：最大吸收波長405 nm，如不具備也可在400~450 nm范圍內測定。備注：以上數據均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
細胞質與細胞核RNA小量提取試劑盒250T
基本售價：4800.00元
FastPure Cytoplasmic & Nuclear RNA purification Kit HandBookFastPure 細胞質和細胞核 RNA 小量提取試劑盒說明書產品組成產品介紹本試劑盒可以快速地從哺乳動物細胞或組織中提取細胞質或細胞核 RNA，不含酚氯仿等有毒試劑。其提取的總 RNA 純度高，無蛋白質及其它雜質污染，可用于 RT-PCR、Real Time RT-PCR、mRNA 差異顯示、分子克隆等多種下游實驗。本產品僅供科研使用，請勿用于醫藥、臨床治療、食品級化妝品等用途。存儲條件Buffer RN 置于 2-8℃保存；Buffer RT 可室溫（15℃-25℃）干燥放置至少一年，加入 β-巰基乙醇（或DTT）的 Buffer RT 可室溫放置一個月；其他試劑室溫干燥保存可至少穩定 12 個月。需要額外準備的材料? 14.3 M β-巰基乙醇(β-ME) (常規購買商業化商品即為 14.3 M)或 2M DTT? 70%乙醇：RNase-Free 水配制? 無水乙醇（96%-100%）? 無酶 1.5ml 離心管? 無酶吸頭? 干凈的手套? 高速離心機? 物理研磨設備開始前注意事項 請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。? 操作前在 Buffer RT 中加入 β-巰基乙醇（β-ME）至終濃度為 1%（建議現配現用），如 1 ml Buffer RT中加入 10μl β-巰基乙醇(或加入 20 μl 的 2 M DTT)。配好的 Buffer RT 可在 4℃維持穩定一個月。? Buffer RT 在儲存時可能會形成沉淀，如果有沉淀出現，請 37℃加熱溶解后室溫使用。? Buffer RW1 作為濃縮液提供，在第一次使用前加入 0.25 倍體積的乙醇（96-100％）以獲得工作溶液。? Buffer RPE 作為濃縮液提供，在第一次使用前加入 4 倍體積的乙醇（96-100％）以獲得工作溶液。? 如果執行可選的柱上 DNA 酶消化步驟，請制備 DNase I 儲備液：將 DNase I 干粉（1500 U）溶解在550μl RNase-Free ddH2O 中，輕柔混勻（禁止渦旋），分裝后-20℃貯存（可保存 9 個月）。? RNase-free 水中不含任何抑菌因子，室溫放置或操作時可能會引入細菌或真菌污染，使用時盡量注意，推薦開瓶后分裝保存以減少污染風險保證實驗穩定性。? RNA 在 Buffer RT 中時不會被 RNase 降解。但提取后繼續處理過程中應使用不含 RNase 的離心管或玻璃器皿。? RNA 提取操作及離心過程常溫進行即可。操作步驟：1.請根據樣品種類進行以下步驟（1a 為動物細胞，1b 為動物組織）1a. 收集動物細胞： 懸浮細胞可直接 300×g 離心 5min 并仔細吸除上清留沉淀待使用；單層貼壁細胞可通過直接裂解法（吸盡培養基留下貼壁細胞，待步驟 2 用 Buffer RT裂解）或胰酶處理法（吸盡培養基留下貼壁細胞，用 PBS 清洗細胞，吸除 PBS 后使用含 0.10%-0.25%胰酶的 PBS 使細胞脫落，加入含有血清的培養基使胰酶失活后轉入無酶 1.5ml 離心管中 300×g 離心 5min，吸除上清留沉淀待使用）注意：收集細胞數量不要超過 1×107，收集細胞時一定要將細胞培養基去除干凈，否則會導致步驟 2 時細胞裂解不完全，影響 RNA 與吸附柱的結合，RNA 的產量降低。1b. 動物組織勻漿處理： 將 10mg-30mg 動物組織轉移入無酶 1.5ml 離心管中并加入600μl Buffer RT（動物組織量不要超過 30mg）使用前請檢查 Buffer RT 是否加入 β-巰基乙醇，使用研磨杵或電動研磨機將動物組織徹底研磨勻漿。直接進行步驟 3.2.加入 4℃預冷的 180μl Buffer RN 至細胞沉淀中，并于冰上孵育 5min。對于未消化收集的培養在 3.5cm 培養皿中的細胞，可吸凈培養基用 PBS 清洗一次后，直接加入 4℃預冷的 180μl Buffer RN 至細胞培養皿中，然后用細胞刮刀輕輕刮動并轉移至無酶 1.5ml 離心管中，并于冰上孵育 5min。對于提前離心沉淀在離心管中的細胞，通過輕彈離心管以使細胞沉淀徹底分散開。懸浮液應迅速澄清，表明質膜立即溶解。注意：細胞沉淀的不完全分散可能導致裂解效率低下和 RNA 產量降低。3.將上述裂解物在 4oC 下以 300×g 離心 2min。將上清液轉移到新的無酶 1.5ml 離心管中用于細胞質 RNA 提取，沉淀用于細胞核 RNA 提取。如果在此過程的后續步驟中使用相同的離心機，則保持離心室溫狀態。上清液含有細胞質提取物。根據細胞類型的不同，它通常略帶混濁和黃白色。沉淀含有細胞核，上清中為細胞質裂解物。4.于步驟 3 種所得細胞質裂解物及細胞沉淀管中分別加入 600 μl Buffer RT（使用前請檢查 Buffer RT 是否加入 β-巰基乙醇或 DTT），充分渦旋混勻。若沉淀物較多，可室溫裂解 3-5min，期間搖勻 2-3 次5.將 430μl 無水乙醇（96–100％）分別加入兩管裂解物中，并用移液器將其充分混合。 不要離心。注意：從某些細胞系純化 RNA 時，加入乙醇后可能會出現沉淀。 這不會影響后續提取過程。6.將步驟 5 混勻后的兩管溶液轉移入無酶吸附柱中并套上 2ml 收集管，≥8000×g（≥10,000rpm）離心 1min，棄廢液，直至將溶液全部轉移完成吸附。吸附柱最大上柱量為 700μl，若溶液過多可分多次上柱。后續操作若無特殊說明吸附柱均置于 2ml 收集管中。7.（可選步驟） 向吸附柱中央加入 80μl DNase Ⅰ 工作液，室溫（15℃-25℃）靜置15min。配制 DNase Ⅰ 工作液： 取 10μl DNase Ⅰ儲備液入新的 RNase-Free 離心管中，并加入 70μl Buffer RDD，輕柔混勻。注意：DNase Ⅰ 對物理變性特別敏感，所以混勻時請上下倒置輕柔混勻，切勿渦旋。請確認 DNase Ⅰ 工作液加入到正中央的柱膜上，否則 DNase 消化效果會不理想。8.向兩個吸附柱中分別加入 700μl Buffer RW1，≥8000×g(≥10,000 rpm) 離心 30s，棄廢液。9.將兩個吸附柱重收套回收集管中，向吸附柱中加入 500μl Buffer RPE（使用前請確認 Buffer RPE 按要求加入 4 倍體積無水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm) 離心30s，棄廢液。注意區分細胞質與細胞核 RNA 的吸附柱10. 重復步驟 9 一次。11. 倒棄濾液，將吸附柱放入收集管中, 以最大轉速(~13,400×g)離心 3min 干燥柱子。12. 將兩個吸附柱分別套入新的 RNase-Free 的 1.5ml 離心管中，并置于無 RNA 酶的環境中開蓋靜置 5-10min 至乙醇晾干。若吸附柱中殘留乙醇將會對純化后的 RNA 的下游實驗造成影響。13. 向兩個吸附柱膜正中央分別加入 30-50μl RNase-Free Water，蓋上蓋子室溫靜置3-5 min。后置于離心機中 ≥12,000×g(≥13,000 rpm) 離心 3min 得到 RNA 溶液。RNA 洗脫體積不應少于 30μl，否則影響洗脫效率。洗脫后的 RNA 溶液應置于-80℃儲存。
細胞質與細胞核RNA小量提取試劑盒100T
基本售價：2400.00元
FastPure Cytoplasmic & Nuclear RNA purification Kit HandBookFastPure 細胞質和細胞核 RNA 小量提取試劑盒說明書產品組成產品介紹本試劑盒可以快速地從哺乳動物細胞或組織中提取細胞質或細胞核 RNA，不含酚氯仿等有毒試劑。其提取的總 RNA 純度高，無蛋白質及其它雜質污染，可用于 RT-PCR、Real Time RT-PCR、mRNA 差異顯示、分子克隆等多種下游實驗。本產品僅供科研使用，請勿用于醫藥、臨床治療、食品級化妝品等用途。存儲條件Buffer RN 置于 2-8℃保存；Buffer RT 可室溫（15℃-25℃）干燥放置至少一年，加入 β-巰基乙醇（或DTT）的 Buffer RT 可室溫放置一個月；其他試劑室溫干燥保存可至少穩定 12 個月。需要額外準備的材料? 14.3 M β-巰基乙醇(β-ME) (常規購買商業化商品即為 14.3 M)或 2M DTT? 70%乙醇：RNase-Free 水配制? 無水乙醇（96%-100%）? 無酶 1.5ml 離心管? 無酶吸頭? 干凈的手套? 高速離心機? 物理研磨設備開始前注意事項 請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。? 操作前在 Buffer RT 中加入 β-巰基乙醇（β-ME）至終濃度為 1%（建議現配現用），如 1 ml Buffer RT中加入 10μl β-巰基乙醇(或加入 20 μl 的 2 M DTT)。配好的 Buffer RT 可在 4℃維持穩定一個月。? Buffer RT 在儲存時可能會形成沉淀，如果有沉淀出現，請 37℃加熱溶解后室溫使用。? Buffer RW1 作為濃縮液提供，在第一次使用前加入 0.25 倍體積的乙醇（96-100％）以獲得工作溶液。? Buffer RPE 作為濃縮液提供，在第一次使用前加入 4 倍體積的乙醇（96-100％）以獲得工作溶液。? 如果執行可選的柱上 DNA 酶消化步驟，請制備 DNase I 儲備液：將 DNase I 干粉（1500 U）溶解在550μl RNase-Free ddH2O 中，輕柔混勻（禁止渦旋），分裝后-20℃貯存（可保存 9 個月）。? RNase-free 水中不含任何抑菌因子，室溫放置或操作時可能會引入細菌或真菌污染，使用時盡量注意，推薦開瓶后分裝保存以減少污染風險保證實驗穩定性。? RNA 在 Buffer RT 中時不會被 RNase 降解。但提取后繼續處理過程中應使用不含 RNase 的離心管或玻璃器皿。? RNA 提取操作及離心過程常溫進行即可。操作步驟：1.請根據樣品種類進行以下步驟（1a 為動物細胞，1b 為動物組織）1a. 收集動物細胞： 懸浮細胞可直接 300×g 離心 5min 并仔細吸除上清留沉淀待使用；單層貼壁細胞可通過直接裂解法（吸盡培養基留下貼壁細胞，待步驟 2 用 Buffer RT裂解）或胰酶處理法（吸盡培養基留下貼壁細胞，用 PBS 清洗細胞，吸除 PBS 后使用含 0.10%-0.25%胰酶的 PBS 使細胞脫落，加入含有血清的培養基使胰酶失活后轉入無酶 1.5ml 離心管中 300×g 離心 5min，吸除上清留沉淀待使用）注意：收集細胞數量不要超過 1×107，收集細胞時一定要將細胞培養基去除干凈，否則會導致步驟 2 時細胞裂解不完全，影響 RNA 與吸附柱的結合，RNA 的產量降低。1b. 動物組織勻漿處理： 將 10mg-30mg 動物組織轉移入無酶 1.5ml 離心管中并加入600μl Buffer RT（動物組織量不要超過 30mg）使用前請檢查 Buffer RT 是否加入 β-巰基乙醇，使用研磨杵或電動研磨機將動物組織徹底研磨勻漿。直接進行步驟 3.2.加入 4℃預冷的 180μl Buffer RN 至細胞沉淀中，并于冰上孵育 5min。對于未消化收集的培養在 3.5cm 培養皿中的細胞，可吸凈培養基用 PBS 清洗一次后，直接加入 4℃預冷的 180μl Buffer RN 至細胞培養皿中，然后用細胞刮刀輕輕刮動并轉移至無酶 1.5ml 離心管中，并于冰上孵育 5min。對于提前離心沉淀在離心管中的細胞，通過輕彈離心管以使細胞沉淀徹底分散開。懸浮液應迅速澄清，表明質膜立即溶解。注意：細胞沉淀的不完全分散可能導致裂解效率低下和 RNA 產量降低。3.將上述裂解物在 4oC 下以 300×g 離心 2min。將上清液轉移到新的無酶 1.5ml 離心管中用于細胞質 RNA 提取，沉淀用于細胞核 RNA 提取。如果在此過程的后續步驟中使用相同的離心機，則保持離心室溫狀態。上清液含有細胞質提取物。根據細胞類型的不同，它通常略帶混濁和黃白色。沉淀含有細胞核，上清中為細胞質裂解物。4.于步驟 3 種所得細胞質裂解物及細胞沉淀管中分別加入 600 μl Buffer RT（使用前請檢查 Buffer RT 是否加入 β-巰基乙醇或 DTT），充分渦旋混勻。若沉淀物較多，可室溫裂解 3-5min，期間搖勻 2-3 次5.將 430μl 無水乙醇（96–100％）分別加入兩管裂解物中，并用移液器將其充分混合。 不要離心。注意：從某些細胞系純化 RNA 時，加入乙醇后可能會出現沉淀。 這不會影響后續提取過程。6.將步驟 5 混勻后的兩管溶液轉移入無酶吸附柱中并套上 2ml 收集管，≥8000×g（≥10,000rpm）離心 1min，棄廢液，直至將溶液全部轉移完成吸附。吸附柱最大上柱量為 700μl，若溶液過多可分多次上柱。后續操作若無特殊說明吸附柱均置于 2ml 收集管中。7.（可選步驟） 向吸附柱中央加入 80μl DNase Ⅰ 工作液，室溫（15℃-25℃）靜置15min。配制 DNase Ⅰ 工作液： 取 10μl DNase Ⅰ儲備液入新的 RNase-Free 離心管中，并加入 70μl Buffer RDD，輕柔混勻。注意：DNase Ⅰ 對物理變性特別敏感，所以混勻時請上下倒置輕柔混勻，切勿渦旋。請確認 DNase Ⅰ 工作液加入到正中央的柱膜上，否則 DNase 消化效果會不理想。8.向兩個吸附柱中分別加入 700μl Buffer RW1，≥8000×g(≥10,000 rpm) 離心 30s，棄廢液。9.將兩個吸附柱重收套回收集管中，向吸附柱中加入 500μl Buffer RPE（使用前請確認 Buffer RPE 按要求加入 4 倍體積無水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm) 離心30s，棄廢液。注意區分細胞質與細胞核 RNA 的吸附柱10. 重復步驟 9 一次。11. 倒棄濾液，將吸附柱放入收集管中, 以最大轉速(~13,400×g)離心 3min 干燥柱子。12. 將兩個吸附柱分別套入新的 RNase-Free 的 1.5ml 離心管中，并置于無 RNA 酶的環境中開蓋靜置 5-10min 至乙醇晾干。若吸附柱中殘留乙醇將會對純化后的 RNA 的下游實驗造成影響。13. 向兩個吸附柱膜正中央分別加入 30-50μl RNase-Free Water，蓋上蓋子室溫靜置3-5 min。后置于離心機中 ≥12,000×g(≥13,000 rpm) 離心 3min 得到 RNA 溶液。RNA 洗脫體積不應少于 30μl，否則影響洗脫效率。洗脫后的 RNA 溶液應置于-80℃儲存。
細胞質與細胞核RNA小量提取試劑盒50T
基本售價：1700.00元
FastPure Cytoplasmic & Nuclear RNA purification Kit HandBookFastPure 細胞質和細胞核 RNA 小量提取試劑盒說明書產品組成產品介紹本試劑盒可以快速地從哺乳動物細胞或組織中提取細胞質或細胞核 RNA，不含酚氯仿等有毒試劑。其提取的總 RNA 純度高，無蛋白質及其它雜質污染，可用于 RT-PCR、Real Time RT-PCR、mRNA 差異顯示、分子克隆等多種下游實驗。本產品僅供科研使用，請勿用于醫藥、臨床治療、食品級化妝品等用途。存儲條件Buffer RN 置于 2-8℃保存；Buffer RT 可室溫（15℃-25℃）干燥放置至少一年，加入 β-巰基乙醇（或DTT）的 Buffer RT 可室溫放置一個月；其他試劑室溫干燥保存可至少穩定 12 個月。需要額外準備的材料? 14.3 M β-巰基乙醇(β-ME) (常規購買商業化商品即為 14.3 M)或 2M DTT? 70%乙醇：RNase-Free 水配制? 無水乙醇（96%-100%）? 無酶 1.5ml 離心管? 無酶吸頭? 干凈的手套? 高速離心機? 物理研磨設備開始前注意事項 請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。? 操作前在 Buffer RT 中加入 β-巰基乙醇（β-ME）至終濃度為 1%（建議現配現用），如 1 ml Buffer RT中加入 10μl β-巰基乙醇(或加入 20 μl 的 2 M DTT)。配好的 Buffer RT 可在 4℃維持穩定一個月。? Buffer RT 在儲存時可能會形成沉淀，如果有沉淀出現，請 37℃加熱溶解后室溫使用。? Buffer RW1 作為濃縮液提供，在第一次使用前加入 0.25 倍體積的乙醇（96-100％）以獲得工作溶液。? Buffer RPE 作為濃縮液提供，在第一次使用前加入 4 倍體積的乙醇（96-100％）以獲得工作溶液。? 如果執行可選的柱上 DNA 酶消化步驟，請制備 DNase I 儲備液：將 DNase I 干粉（1500 U）溶解在550μl RNase-Free ddH2O 中，輕柔混勻（禁止渦旋），分裝后-20℃貯存（可保存 9 個月）。? RNase-free 水中不含任何抑菌因子，室溫放置或操作時可能會引入細菌或真菌污染，使用時盡量注意，推薦開瓶后分裝保存以減少污染風險保證實驗穩定性。? RNA 在 Buffer RT 中時不會被 RNase 降解。但提取后繼續處理過程中應使用不含 RNase 的離心管或玻璃器皿。? RNA 提取操作及離心過程常溫進行即可。操作步驟：1.請根據樣品種類進行以下步驟（1a 為動物細胞，1b 為動物組織）1a. 收集動物細胞： 懸浮細胞可直接 300×g 離心 5min 并仔細吸除上清留沉淀待使用；單層貼壁細胞可通過直接裂解法（吸盡培養基留下貼壁細胞，待步驟 2 用 Buffer RT裂解）或胰酶處理法（吸盡培養基留下貼壁細胞，用 PBS 清洗細胞，吸除 PBS 后使用含 0.10%-0.25%胰酶的 PBS 使細胞脫落，加入含有血清的培養基使胰酶失活后轉入無酶 1.5ml 離心管中 300×g 離心 5min，吸除上清留沉淀待使用）注意：收集細胞數量不要超過 1×107，收集細胞時一定要將細胞培養基去除干凈，否則會導致步驟 2 時細胞裂解不完全，影響 RNA 與吸附柱的結合，RNA 的產量降低。1b. 動物組織勻漿處理： 將 10mg-30mg 動物組織轉移入無酶 1.5ml 離心管中并加入600μl Buffer RT（動物組織量不要超過 30mg）使用前請檢查 Buffer RT 是否加入 β-巰基乙醇，使用研磨杵或電動研磨機將動物組織徹底研磨勻漿。直接進行步驟 3.2.加入 4℃預冷的 180μl Buffer RN 至細胞沉淀中，并于冰上孵育 5min。對于未消化收集的培養在 3.5cm 培養皿中的細胞，可吸凈培養基用 PBS 清洗一次后，直接加入 4℃預冷的 180μl Buffer RN 至細胞培養皿中，然后用細胞刮刀輕輕刮動并轉移至無酶 1.5ml 離心管中，并于冰上孵育 5min。對于提前離心沉淀在離心管中的細胞，通過輕彈離心管以使細胞沉淀徹底分散開。懸浮液應迅速澄清，表明質膜立即溶解。注意：細胞沉淀的不完全分散可能導致裂解效率低下和 RNA 產量降低。3.將上述裂解物在 4oC 下以 300×g 離心 2min。將上清液轉移到新的無酶 1.5ml 離心管中用于細胞質 RNA 提取，沉淀用于細胞核 RNA 提取。如果在此過程的后續步驟中使用相同的離心機，則保持離心室溫狀態。上清液含有細胞質提取物。根據細胞類型的不同，它通常略帶混濁和黃白色。沉淀含有細胞核，上清中為細胞質裂解物。4.于步驟 3 種所得細胞質裂解物及細胞沉淀管中分別加入 600 μl Buffer RT（使用前請檢查 Buffer RT 是否加入 β-巰基乙醇或 DTT），充分渦旋混勻。若沉淀物較多，可室溫裂解 3-5min，期間搖勻 2-3 次5.將 430μl 無水乙醇（96–100％）分別加入兩管裂解物中，并用移液器將其充分混合。 不要離心。注意：從某些細胞系純化 RNA 時，加入乙醇后可能會出現沉淀。 這不會影響后續提取過程。6.將步驟 5 混勻后的兩管溶液轉移入無酶吸附柱中并套上 2ml 收集管，≥8000×g（≥10,000rpm）離心 1min，棄廢液，直至將溶液全部轉移完成吸附。吸附柱最大上柱量為 700μl，若溶液過多可分多次上柱。后續操作若無特殊說明吸附柱均置于 2ml 收集管中。7.（可選步驟） 向吸附柱中央加入 80μl DNase Ⅰ 工作液，室溫（15℃-25℃）靜置15min。配制 DNase Ⅰ 工作液： 取 10μl DNase Ⅰ儲備液入新的 RNase-Free 離心管中，并加入 70μl Buffer RDD，輕柔混勻。注意：DNase Ⅰ 對物理變性特別敏感，所以混勻時請上下倒置輕柔混勻，切勿渦旋。請確認 DNase Ⅰ 工作液加入到正中央的柱膜上，否則 DNase 消化效果會不理想。8.向兩個吸附柱中分別加入 700μl Buffer RW1，≥8000×g(≥10,000 rpm) 離心 30s，棄廢液。9.將兩個吸附柱重收套回收集管中，向吸附柱中加入 500μl Buffer RPE（使用前請確認 Buffer RPE 按要求加入 4 倍體積無水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm) 離心30s，棄廢液。注意區分細胞質與細胞核 RNA 的吸附柱10. 重復步驟 9 一次。11. 倒棄濾液，將吸附柱放入收集管中, 以最大轉速(~13,400×g)離心 3min 干燥柱子。12. 將兩個吸附柱分別套入新的 RNase-Free 的 1.5ml 離心管中，并置于無 RNA 酶的環境中開蓋靜置 5-10min 至乙醇晾干。若吸附柱中殘留乙醇將會對純化后的 RNA 的下游實驗造成影響。13. 向兩個吸附柱膜正中央分別加入 30-50μl RNase-Free Water，蓋上蓋子室溫靜置3-5 min。后置于離心機中 ≥12,000×g(≥13,000 rpm) 離心 3min 得到 RNA 溶液。RNA 洗脫體積不應少于 30μl，否則影響洗脫效率。洗脫后的 RNA 溶液應置于-80℃儲存。
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