廣州億濤生物科技公司(ECOTOP SCIENTIFIC(Guangzhou) BIOTECHNOLOGY),由中山大學生命科學領域專業人士和業內專業營銷人才共同組建成立。“持續改善動物及人類健康”是公司的愿景,自成立以來一直潛心研究、注重細節,專注于打造高品質、標準化的生物相關產品。目前,ECOTOP SCIENTIFIC產品線涵蓋了分子生物學、細胞生物學、免疫學等領域,涉及NGS伴隨診斷行業、畜牧行業、水產養殖業、高校科研等行業。
產品中文名稱:氯化鈉溶液(5mol/L,無菌)產品英文名稱:Sodium Chloride Solution, 5mol/L,Sterilize運輸條件:常溫運輸
產品中文名稱:氯化鉀溶液(3mol/L)產品英文名稱:Potassium Chloride Solution, 3mol/L運輸條件:常溫運輸
Sodium Citrate Buffer(0.01mol/L, pH6.0, powder),1L/pack【保存條件】 室溫保存,有效期 2 年 【概述】 檸檬酸-檸檬酸鈉抗原修復液是一種最常用的抗原修復液,可以用于多聚甲醛、甲醛或 其它醛類試劑固定后的石蠟切片、冰凍切 片的抗原修復。 細胞或組織多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致蛋白之間的交聯,遮蔽了樣 品的抗原位點,導致免疫染色時 染色信號減弱,甚至出現一些假陽性染色結果,這就需要 對組織進行抗原修復。 通常石蠟切片都需進行抗原修復處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復 會大大改善石蠟切片的免疫染色 效果,對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯 著改善,特別是當冰凍切片免疫染色效果欠佳時,可以考慮嘗試進 行抗原修復。從原理上 來看,無論冰凍切片還是細胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品, 進行抗 原修復都會有效去除蛋白之間的交聯,充分暴露抗原表位,從而大大改善免疫染色 效果。 本產品特別適用于石蠟切片,也可以用于冰凍切片。 【使用建議】 實驗前準備: 本產品為干粉,使用時用蒸餾水或去離子水溶解,定容至 1L,如需必要,可使用鹽酸調 pH 值至 6.0。 抗原修復: 1. 高壓蒸汽法 a. 抗原修復:壓力鍋中加入足以淹沒切片的抗原修復液,加熱至沸騰。 b. 將脫蠟至水的切片置染色架上,放入鍋中,蓋好鍋蓋,扣上壓力閥加壓,設置保壓 4 min。 c. 壓力下降后打開鍋蓋,放置室溫冷卻,待溶液冷卻至室溫后取出切片。 d. PBS 或 TBS 洗滌 3 次,每次 5 min,隨后即可進行后續的免疫染色步驟。 2. 蒸煮鍋法 a. 將置于染色架上的切片放于抗原修復液中,95~100°C 加熱 10~20 min。 b. 冷卻至室溫后取出,PBS 或 TBS 洗滌 3 次,每次 5 min,隨后即可進行后續的免疫染色 步驟。 3. 微波法 a. 向微波爐專用容器中加入抗原修復液,加熱至沸騰。 b. 將脫蠟至水的切片置染色架上,放于容器中,煮沸 10~20 min。 c. 冷卻至室溫后取出,PBS 或 TBS 洗滌 3 次,每次 5 min,隨后即可進行后續的免疫染色 步驟。 4. 對于其他切片 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片的步驟進行。 【注意事項】 1. 抗原修復的時間為建議時間,請根據不同的樣品、抗體和抗原自行摸索。 2. 抗原修復后,待溶液冷卻至室溫后再取出切片,使抗原表位在經歷高溫后復原。 3. 抗原修復液的加入量要足以淹沒切片幾厘米,防止在煮沸過程中切片變干。 4. 抗原修復過程需使用耐熱染色架進行操作。 5. 試劑有潮解性,若有潮解請放心使用。 6. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
EDTA Antigen Retrieval Solution,50×,pH8.0【保存條件】 4oC 保存 【概述】 EDTA 抗原修復液是一種常用的抗原修復液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或 其它醛類試劑固定后的抗原修復。 細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致蛋白之間的交聯(cross-link),從而遮蔽樣品的 抗原位點,導致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現一些假陽性染色結果。 本抗原修復液采用了廣泛使用的 EDTA,可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯,充分暴露石 蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 對于石蠟切片: a. 脫蠟:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 無水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→ 90%乙醇 1 次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸餾水洗 2 次,每次 3-5min。 b. 抗原修復: ① 用去離子水稀釋 EDTA 抗原修復液(50×,pH8.0)至 1×,例如 1ml 本抗原修復液(50×)加入 49ml 去離子水,混合均勻,即得 50ml 1×抗原修復液;② 將切片浸泡在抗原修復液(1×)中;95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min 內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需 預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐 加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。 隨后大約在 20-30 min 內冷卻至室溫。 ③ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。 2. 對于冰凍切片: ① 用去離子水稀釋 EDTA 抗原修復液(50×,pH8.0)至 1×,例如 1ml 本抗原修復液(50×)加入 49ml 去離子水,混合均勻,即得 50ml 1×抗原修復液; ② 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5min; ③ 將切片浸泡在抗原修復液 (1×)中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min 內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需 預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐 加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 min 內冷卻至室溫。 ④ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。 3. 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。 【注意事項】 1. 本品含 Tween-20,可提高細胞通透性,95-100℃加熱時出現氣泡屬于正常現象。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 3. 用后請及時擰緊瓶蓋,以防揮發。
Citrate Antigen Retrieval Solution,50× 【保存條件】 4℃保存,一年有效【概述】 1. 檸檬酸鈉抗原修復液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一種最常用的抗原修復液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。2. 細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致蛋白之間的交聯(cross-link),從而遮蔽樣品的抗原位點,導致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現一些假陽性染色結果。本抗原修復液采用了廣泛使用的檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0),可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯,充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。【操作方法】 1. 對于石蠟切片:2. a. 脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘,再換用新鮮的二甲苯脫蠟,共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5分鐘,兩次。90%乙醇 5 分鐘,兩次,70%乙醇 5 分鐘,一次。蒸餾水 5 分鐘,兩次。3. b. 抗原修復:用重蒸水或 Milli-Q 水將本抗原修復液(50×)稀釋 50 倍,配制成抗原修復液(1×),例如 1ml 本抗原修復液(50X)加入 49ml 重蒸水或 Milli-Q 水,混合均勻,即得 50ml 抗原修復液(1×)。將切片浸泡在抗原修復液(1×)中,95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。4. 對于冰凍切片:5. 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復液(1×)中,95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。6. 對于其它樣品的抗原修復:可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。【注意事項】 1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
DAPI Solution,1mg/ml【保存條件】 -20℃保存,有效期至少兩年。 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽)是一種能夠與 DNA 中大部分 A、T 堿基相互結合的熒光染料,常用于熒光顯微鏡觀測。因為 DAPI 可以透過完整的細胞膜,它可以用于活細胞和固定細胞的染色。當 DAPI 與雙鏈 DNA 結合時,最大吸收波長為 358nm,最大發射波長為 461nm。DAPI 的發射光為藍色,且 DAPI 和綠色熒光蛋白 GFP 或 Texas Red 染劑(紅色熒光染劑)的發射波長僅有少部分重疊,可以利用這項特性在單一的樣品上進行多重熒光染色。 本產品為 DAPI 水溶液,純度≥90%,濃度為 1mg/ml。使用時根據實驗不同直接將本產品用相應溶液稀釋到工作濃度。 【使用方法(僅供參考)】 取適量 1mg/ml DAPI 染色液加到 PBS 中,制備成 5-15μg/ml 的 DAPI 染色液。 ? 對于培養細胞 1. 將 1/10 培養基體積的 5-15μg/ml DAPI 染色液加入到細胞培養基中。 2. 在 37℃培養細胞 10-20 分鐘。 3. 用 PBS 或合適的緩沖液洗細胞兩次。 4. 置于熒光顯微鏡下觀察,激發波長 360-400nm。 ? 對于組織切片 制好的玻片上滴加幾滴 5-15μg/ml DAPI 染色液,染色 10 分鐘,流水沖去染液,濾紙吸除多余水分,加一滴熒光封片液,置于熒光顯微鏡下觀察。 【注意事項】 1. DAPI 被普遍認為具有致癌性,操作時應戴手套,并避免交叉污染。 2. 本產品需避光,并盡量避免反復凍融。