【保存條件】
室溫保存,有效期 2 年
【概述】
檸檬酸-檸檬酸鈉抗原修復液是一種最常用的抗原修復液,可以用于多聚甲醛、甲醛或 其它醛類試劑固定后的石蠟切片、冰凍切 片的抗原修復。
細胞或組織多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致蛋白之間的交聯(lián),遮蔽了樣 品的抗原位點,導致免疫染色時 染色信號減弱,甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果,這就需要 對組織進行抗原修復。
通常石蠟切片都需進行抗原修復處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復 會大大改善石蠟切片的免疫染色 效果,對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯 著改善,特別是當冰凍切片免疫染色效果欠佳時,可以考慮嘗試進 行抗原修復。從原理上 來看,無論冰凍切片還是細胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品, 進行抗 原修復都會有效去除蛋白之間的交聯(lián),充分暴露抗原表位,從而大大改善免疫染色 效果。
本產(chǎn)品特別適用于石蠟切片,也可以用于冰凍切片。
【使用建議】
實驗前準備:
本產(chǎn)品為干粉,使用時用蒸餾水或去離子水溶解,定容至 1L,如需必要,可使用鹽酸調(diào) pH 值至 6.0。
抗原修復:
1. 高壓蒸汽法
a. 抗原修復:壓力鍋中加入足以淹沒切片的抗原修復液,加熱至沸騰。
b. 將脫蠟至水的切片置染色架上,放入鍋中,蓋好鍋蓋,扣上壓力閥加壓,設(shè)置保壓 4 min。
c. 壓力下降后打開鍋蓋,放置室溫冷卻,待溶液冷卻至室溫后取出切片。
d. PBS 或 TBS 洗滌 3 次,每次 5 min,隨后即可進行后續(xù)的免疫染色步驟。
2. 蒸煮鍋法
a. 將置于染色架上的切片放于抗原修復液中,95~100°C 加熱 10~20 min。
b. 冷卻至室溫后取出,PBS 或 TBS 洗滌 3 次,每次 5 min,隨后即可進行后續(xù)的免疫染色 步驟。
3. 微波法
a. 向微波爐專用容器中加入抗原修復液,加熱至沸騰。
b. 將脫蠟至水的切片置染色架上,放于容器中,煮沸 10~20 min。
c. 冷卻至室溫后取出,PBS 或 TBS 洗滌 3 次,每次 5 min,隨后即可進行后續(xù)的免疫染色 步驟。
4. 對于其他切片 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片的步驟進行。
【注意事項】
1. 抗原修復的時間為建議時間,請根據(jù)不同的樣品、抗體和抗原自行摸索。
2. 抗原修復后,待溶液冷卻至室溫后再取出切片,使抗原表位在經(jīng)歷高溫后復原。
3. 抗原修復液的加入量要足以淹沒切片幾厘米,防止在煮沸過程中切片變干。
4. 抗原修復過程需使用耐熱染色架進行操作。
5. 試劑有潮解性,若有潮解請放心使用。
6. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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