廣州億濤生物科技公司(ECOTOP SCIENTIFIC(Guangzhou) BIOTECHNOLOGY),由中山大學生命科學領域專業人士和業內專業營銷人才共同組建成立?!俺掷m改善動物及人類健康”是公司的愿景,自成立以來一直潛心研究、注重細節,專注于打造高品質、標準化的生物相關產品。目前,ECOTOP SCIENTIFIC產品線涵蓋了分子生物學、細胞生物學、免疫學等領域,涉及NGS伴隨診斷行業、畜牧行業、水產養殖業、高??蒲械刃袠I。
【保存條件】 室溫運輸;2-8°C保存18個月;-20°C保存36個月【概述】 Cell Store 系列細胞凍存液可穩定長期儲存細胞。憑借其獨特的配方,可在凍融程序后 實現穩定的冷凍保存和高存活率,是存儲任何細胞類型(包括敏感細胞系)的值得信賴的解 決方案。 本品可以用于常規細胞/腫瘤細胞/干細胞等細胞凍存,-80℃可長期保存(>5 年),細 胞存活率在 90-98%,無需程序降溫。【產品特點】 ? 無 DMSO 即用型細胞凍存液 ? 直接凍存于-80℃冰箱,長期保存(>5 年),無需程序性降溫 ? 無血清及其它蛋白質成份 ? 細胞存活率高于傳統 DMSO 血清方法 【使用建議(僅供參考)】細胞凍存步驟 1. 常規方法收集對數期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。 2. 根據培養細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數。3. 通過離心(3-5 分鐘,1,000~2,000rpm)收集培養細胞沉淀,徹底去除離心管中上清液。 4. 加入適量 CellStore 無血清細胞凍存液于離心管中(每 1 ml 凍存液可用于 5×10 5-1×10 7細 胞),輕柔混勻細胞制成細胞混合液。 5. 將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中,建議每管 1ml 或 1.5ml,標識細胞系 名稱、細胞濃度、傳代日期和其他重要信息。 6. 直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。 7. 若需轉移至液氮中長期保存,需先放入-80℃凍存至少 24 小時后方可移至液氮罐中保存。 重要提示:最佳方案可能會隨細胞類型而變化。凍存細胞復蘇步驟 1. 從冰箱或液氮中取出凍存的細胞,立即置于 37℃水浴中快速解凍。 2. 待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 細胞培養基于冷凍管中與細胞混合, 再將其中的混合液移至含有約 5ml 該細胞培養基的離心管中,1,000~2,000rpm 離心 3-5 分鐘 收集細胞沉淀,移棄上清液(操作時小心,切勿將細胞沉淀移去) 3. 使用適當體積的完全細胞培養基輕輕懸浮細胞,后轉入至細胞培養平板或培養瓶。 4. 使用顯微鏡觀察后,可根據各自研究所需的方案繼續進一步的培養。【注意事項】 1. 本品僅用于科研用途,不得用于臨床或診斷相關研究 2. 對于敏感型復雜細胞系,建議在使用前對所凍存的胞進行至少為期 1 周的該產品試驗性 細胞冷凍保存培養,確認性能后再進行正式凍存 3. 請注意凍存過程中的無菌操作。
Cell Store無血清細胞凍存液使用說明書【包裝規格】產品編號產品名稱包裝ES-8721Cell Store Cell Freezing Media100ml/500ml 使用說明書1份【保存條件】室溫運輸,2-8°C保存18個月,-20°C保存36個月【概述】Cell Store系列細胞凍存液可穩定長期儲存細胞。憑借其獨特的配方,可在凍融程序后實現穩定的冷凍保存和高存活率,是存儲任何細胞類型(包括敏感細胞系)的值得信賴的解決方案。本品可以用于常規細胞/腫瘤細胞/干細胞等細胞凍存,-80℃可長期保存(>5年),細胞存活率在90-98%,無程序降溫。【產品特點】l 即用型細胞凍存液l 直接凍存于-80℃冰箱,長期保存(>5年),無程序性降溫l 無血清及其它蛋白質成份l 細胞存活率高于傳統DMSO血清方法【使用建議(僅供參考)】細胞凍存步驟1. 常規方法收集對數期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。2. 根據培養細胞的密度和凍存管的大小確定所凍存細胞數。1. 通過離心(3-5分鐘,1,000~2,000rpm)收集培養細胞沉淀,徹底去除離心管中上清液。2. 加入適量CellStore無血清細胞凍存液于離心管中(每1 ml凍存液可用于5×105-1×107細胞),輕柔混細胞制成細胞混合液。3. 將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中,建議每管1ml或1.5ml,標識細胞系名稱、細胞濃度、傳代日期和其他重要信息。4. 直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。5. 若轉移至液氮中長期保存,先放入-80℃凍存至少24小時后方可移至液氮罐中保存。重要提示:佳方案可能會隨細胞類型而變化。凍存細胞復蘇步驟1. 從冰箱或液氮中取出凍存的細胞,立即置于37℃水浴中快速解凍。2. 待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml 細胞培養基于冷凍管中與細胞混合, 再將其中的混合液移至含有約5ml該細胞培養基的離心管中,1,000~2,000rpm離心3-5分鐘收集細胞沉淀,移棄上清液(操作時小心,切勿將細胞沉淀移去)3. 使用適當體積的完全細胞培養基輕輕懸浮細胞,后轉入至細胞培養平板或培養瓶。4. 使用顯微鏡觀察后,可根據各自研究所的方案繼續進步的培養?!咀⒁馐马棥?. 本品僅用于科研用途,不得用于臨床或診斷相關研究2. 對于敏感型復雜細胞系,建議在使用前對所凍存的胞進行至少為期1周的該產品試驗性細胞冷凍保存培養,確認性能后再進行正式凍存3. 請注意凍存過程中的無菌操作。
【操作方法】1. 對于貼壁細胞(以下均以6孔板為例,其它培養皿或培養板請根據相應面積換算):a.將細胞培養于培養皿或培養板內,通常在鋪板后1-2天內長到70-90%。 b. 在轉染前1-2小時,吸去細胞培養液,更換為新鮮的不含抗生素的完全培養液2ml。c. 取2-4μg待轉染的質粒DNA (質??傮w積不宜超過20μl,若有多種質粒請混勻),以質量體積比1:3加入轉染試劑6~12μl(如2μg待轉染的質粒DNA加入轉染試劑6μl)。d.混勻后,室溫孵育3-5分鐘。e. 把DNA-轉染試劑混合物中加入500μl opti-MEM(若無opti-MEM可使用無血清無雙抗的DMEM或1640,具體根據轉染細胞使用的培養基),充分混勻后靜置10-15分鐘。 f.后均勻滴加到整個6孔板內(加入前吸出原培養板中500μl培養基),并置于含5%二氧化碳的37oC細胞培養箱內培養。 g. 在轉染后4-6小時左右換液,更換為2ml新鮮的完全培養液,繼續培養。h.通常在轉染約24-48小時后就可以檢測到轉染基因的表達。2. 對于懸浮細胞: a. 離心收集懸浮細胞,用PBS洗滌一次。 b. 按照上面的步驟c)、d)、e)制備DNA-轉染試劑-optiMEM混合物。c. 每106個細胞的沉淀,用500微升DNA-轉染試劑-optiMEM混合物重新懸浮,室溫放置15-20分鐘。 d. 在一個6孔板孔內加入1.5ml完全培養液,然后加入來自上一步的細胞-500微升DNA-轉染試劑-optiMEM混合物,混勻。e. 在含5%二氧化碳的37oC細胞培養箱內培養。 f. 根據實驗要求和轉染試劑對于不同細胞的毒性不同,在4-6小時后離心收集細胞,用PBS洗一次,然后用2毫升完全培養 液重新懸浮細胞,繼續培養。 g. 通常在轉染約24-48小時后就可以檢測到轉染基因的表達。
功能與使用方法與life品牌的Trizol LS相似 【保存條件】2-8℃長期保存【操作方法】I. 樣本處理1. 組織樣本處理:用勻漿器或其他類似設備勻化組織樣本機械破壞裝置,每 500μL 最多使用 50 mg 組織NewZOL LS。 對于 DNA 含量高的組織(例如脾臟),建議使用 25 mg 組織/ 500μL 試劑。 2. 貼壁細胞樣本處理:除去細胞培養基,通過向培養皿(直徑 3.5 cm,10 cm2)中加入至少 1 mL NewZOLLS 并通過反復吸移來確保完全裂解。(根據培養皿面積而不是細胞數計算試劑量。試劑量不足將導致分離的 RNA 受到 DNA 污染。殘留的勻漿可以在-20 至-80°C 下保存至少一年,以備后用。) 3. 懸浮細胞樣本處理:沉淀細胞,并通過添加 NewZOL LS 直接裂解。 每 5×106個細胞至少加入 500μLNewZOL LS,移液器吹打數次裂解細胞。(添加 NewZOL LS 之前請勿洗滌細胞,細胞洗滌可能會導致 RNA降解。) 4. 液體樣本處理:每 200μL 液體樣品中加入 500μL NewZOL LS 進行均質化和裂解。對于小于 200μL 的樣品體積,請添加 500μLNewZOL LS 并加水至最終體積為 700μL。 5. 富含脂質樣本處理:如上所述均質化富含脂質的樣品。將樣品以 12,000×g 離心 5 分鐘。 離心后,樣品頂部會出現一層脂肪。用移液器吸頭尖端刺穿上層,然后將上清液轉移到新管中。 II. RNA 提取1. 每使用 500μLNewZOL LS 的裂解液中加入 200μL 無 RNase 的水至裂解液中。劇烈搖動樣品 15 秒鐘。在室溫下孵育 5 分鐘。(對于包含 50 mg 組織/ 500μL NewZOL LS 的樣品,建議在室溫下孵育 15 分鐘。) 2. 在室溫下以12,000×g離心樣品15分鐘。含有DNA,蛋白質和多糖的半固體沉淀物形成在試管底部。RNA仍溶解在上清液中。 3. 將 500μL 上清液轉移至新管中。 勿吸太干凈防止污染,在 DNA /蛋白質沉淀上方保留一小部分上清液。(含有 DNA,蛋白質和多糖的沉淀物占勻漿-水混合物總量的約 10%。)4. 加入等體積異丙醇,上下顛倒混勻以沉淀 RNA,在室溫下孵育樣品 10 分鐘。5. 將樣品以 12,000×g 離心 10 分鐘,除去并丟棄上清液。通常,在管的底部以白色沉淀的形式獲得 RNA。對于脾臟樣品,RNA 在試管底部形成凝膠狀膜。用乙醇洗滌后,膜變得更可見。 6. 加入 500μL 75% 乙醇(無 RNase 水配制)洗滌,輕彈管底使沉淀懸浮,上下顛倒混勻。對于較大的試管,按比例添加 75% 乙醇溶液。 7. 將沉淀以 8,000×g 的速度離心 3 分鐘。移液去除沉淀中的乙醇,重復乙醇洗滌步驟一次。靜置 5-10 分鐘待乙醇揮發,無需過份干燥成固體,干燥成固體的 RNA 沉淀不易溶解 8. 將 RNA 沉淀溶于無 RNase 的水中,在室溫下渦旋 3 分鐘,以實現有效溶解。將得到的 RNA 進行檢測或-65℃長期保存(若需更長時間保存請添加適量 RNA Chill(ES-8520))。 【注意事項】1. RNA 酶污染注意事項:a. 提取過程用品均經過去 RNA 酶處理:玻璃制品可以 150 °C 烘烤 4 小時 ,塑料制品可浸泡于 0.5M NaOH 溶液后用清水沖洗并高壓滅菌,吸頭及離心管類盡量使用一次性無酶吸頭及離心管 b. 佩戴手套及口罩及護目鏡:皮膚上常含有細菌和霉菌,可污染 RNA 制備,且同時是 RNA 酶來源,同時 New ZOL LS 對皮膚有一定毒性,建議佩戴手套及口罩及護目鏡。 c. 盡量于通風櫥內提?。罕苊馕胩崛∵^程中有毒物質。2. 安全性問題:a. 本品在與皮膚接觸及吞咽有毒性,可導致燒傷。與皮膚接觸后,應立即用洗滌劑和大量水沖洗。如感到身體不適,應立即就醫
【保存條件】常溫運輸,2-8°C保存12個月【產品特點】l快速高效:5~10 min快速完成封閉;只結合封閉轉印膜而不結合蛋白,因此不會屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點,與傳統的脫脂奶粉和BSA封閉相比信噪比更高;l性能可靠:無蛋白配方,與抗體無交叉反應;l應用范圍廣:無磷酸化蛋白,無生物素,尤其適合磷酸化特異抗體及生物素檢測系統;l增強抗體效果:使用本封閉液后,所需的最適抗體濃度低于常規使用濃度,可大大節省抗體使用量?!靖攀觥勘酒穼榭焖俑咝Х忾]Western Blot轉印膜而設計,采用無蛋白配方,避免抗體與封閉劑的非特異結合,可最大程度地降低背景。同時,本封閉劑無內源的磷酸化蛋白及生物素,對磷酸化特異抗體及生物素檢測也不會產生干擾。本封閉劑不與蛋白產生非特異性結合,因而只封閉膜而不會屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點,大大提高了抗體檢測靈敏度。實驗表明本封閉劑對許多抗體都有不同程度的信號增強作用。然而這種信號增強作用因抗體而異,對某一特定抗體,并不一定具有確定的信號增強作用?!臼褂媒ㄗh】1.完成轉膜后,將轉印膜放入到雜交孵育盒中,根據膜的大小適量體積的快速封閉液,需完全浸沒覆蓋膜,對于7.5×8cm的膜推薦使用量5-10ml;2.置于搖床輕輕搖動,室溫封閉約10min;注意:使用本品通常封閉5~15min均可;經多種抗體的測試封閉10min的效果顯著優于常規的BSA封閉1 h。對于一些背景非常高的抗體,可以嘗試將封閉時間延長為30~60 min。如有特殊需要,也可4°C封閉過夜。3.封閉后的膜即可用于一抗孵育等后續實驗?!咀⒁馐马棥?.注意: 沒有任何一種封閉劑能適合所有抗原和抗體檢測系統。如出現本試劑不適合的抗體,請替換使用其它種類的封閉劑如BSA或脫脂奶粉等;2.本品僅用于科研用途,不得用于臨床或診斷相關研究;3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
【保存條件】室溫保存,一年有效【概述】甘油又名丙三醇,是一種無色、無臭、味甘的粘稠液體。 分子式:C3H8O3,分子量:92.094,CAS號:56-81-5。本產品純度高于99%,經無菌處理,使用時應稀釋至工作濃度?!咀⒁馐马棥?. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 本品為有毒化合物,避免與皮膚和眼睛接觸,請小心操作。3. 溶液為無菌溶液,使用時應盡量避免污染。
Lysis dilution buffer(150 mM NaCl/5 mM EDTA)500ml
TripleSelect無動物源常溫胰酶 【保存條件】 室溫保存12個月, 2–8°C或–20°C保存24個月【概述】 TripleSelect與胰蛋白酶一樣,可裂解賴氨酸和精氨酸C-末端上的肽鍵。但是,TripleSelect無與倫比的純度提高了特異性,其原因在于只有一種酶發揮作用。這減少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多種酶的裂解作用造成的損害。【產品特點】 對細胞作用溫和:純度提高了特異性,其原因在于只有一種酶發揮作用。這減少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多種酶切割造成的損害。在室溫下保持穩定:在室溫或4°C下可保持穩定12-24個月,因此易于儲存和處理、方便快捷。無動物來源蛋白:與常用豬胰蛋白酶不同,本試劑不含動物來源成分。無需終止,易于使用:無需使用胰蛋白酶抑制劑(如FBS)終止消化,PBS或DMEM等稀釋后自動失活。【使用建議】 1.使用前將TripleSelect和完整的生長培養基恢復至室溫。2.將待消化細胞培養器皿中培養去除。3.使用DPBS(無鈣鎂)清洗細胞,清洗完去除DPBS液體。4.加入相應體積的TripleSelect消化液(如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液,75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液)5.37°C孵育至細胞變圓脫落(鏡下觀察),可輕拍培養瓶/皿。6.加入5ml完全培養基至培養瓶/皿(體積根據不同面積培養瓶/皿),可輕輕吹打使細胞更好分離。7.將含細胞的液體移入15ml無菌離心管中。以200-500g轉速離心5-10分鐘使細胞沉淀。8.去除上清后,加入含血清的完全培養液使細胞沉淀重新懸浮,即可用于后續實驗【注意事項】 1. 注意無菌操作,盡量避免污染。2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。