廣州億濤生物科技公司(ECOTOP SCIENTIFIC(Guangzhou) BIOTECHNOLOGY),由中山大學生命科學領域專業人士和業內專業營銷人才共同組建成立。“持續改善動物及人類健康”是公司的愿景,自成立以來一直潛心研究、注重細節,專注于打造高品質、標準化的生物相關產品。目前,ECOTOP SCIENTIFIC產品線涵蓋了分子生物學、細胞生物學、免疫學等領域,涉及NGS伴隨診斷行業、畜牧行業、水產養殖業、高校科研等行業。
Annealing buffer, 10×【保存條件】 -20 ℃保存,有效期 12 個月 【概述】 本品適用于小片段(5-500bp)單鏈 DNA 的雜交反應,獲得更優質的雜交雙鏈 DNA 片段,如 shRNA、 gRNA載體等構建。 【操作方法】 I.體系配制(如下 20 μl 體系為例) II. 退火條件 A. 水浴鍋或 Heat Block 1.在微管中混合等體積的等摩爾寡核苷酸。 2.將微管在 95°C 下孵育 5 分鐘。 3.讓微管緩慢冷卻至室溫(注:若水浴等水溫升至最高后加入,勿中途取出)。 B. PCR(熱循環)儀(可選擇簡易步驟或進階步驟的其中一種使用) 【注意事項】1. 如果每次的使用量很小,可以適當分裝后再使用,以免污染。2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Annealing buffer, 10× 【保存條件】 -20 ℃保存,有效期 12 個月 【概述】 本品適用于小片段(5-500bp)單鏈 DNA 的雜交反應,獲得更優質的雜交雙鏈 DNA 片段,如 shRNA、 gRNA載體等構建。 【操作方法】 I.體系配制(如下 20 μl 體系為例) II. 退火條件 A. 水浴鍋或 Heat Block 1.在微管中混合等體積的等摩爾寡核苷酸。 2.將微管在 95°C 下孵育 5 分鐘。 3.讓微管緩慢冷卻至室溫(注:若水浴等水溫升至最高后加入,勿中途取出)。 B. PCR(熱循環)儀(可選擇簡易步驟或進階步驟的其中一種使用) 【注意事項】1. 如果每次的使用量很小,可以適當分裝后再使用,以免污染。2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Hygromycin B solution 50mg/ml 5ml 【保存條件】 4℃保存,一年有效 【概述】 潮霉素 B 是一種氨基糖苷類抗生素,可通過抑制蛋白質合成來對抗細菌,真菌和高級真核生物。潮霉素 B 最初是作為抗蠕蟲藥開發的,在研究實驗室中主要用于選擇和維持帶有潮霉素抗性基因的細胞。 【操作方法】 1. 常用篩選濃度 注意:潮霉素 B 用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化, 推薦使用濃度為 50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線( kill curve),即劑量 反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。 一般而言,哺乳動物細胞 50-500μg/mL;細菌/植物細胞 20-200μg/mL;真菌 300-1000μg/mL。 2. 殺滅曲線的建立 注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素最低濃度, 可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇 5 個濃度。 1)第一天:未轉化的細胞按照 20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2 培養過夜;注:對于 需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。 2)根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定 50,100,250,500,750, 1000μg/mL。先用去離子水或者 PBS buffer 按照 1:10 的比例將母液稀釋到 5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相 應濃度的工作液。 3)第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。 4)接下來每 3-4 天更換新的含藥物培養基。 5)按照固定的周期(如每 2 天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天 數(通常是 7-10 天)內能夠殺死絕大多數細胞的最低濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。3. 穩定轉染細胞的篩選 1)轉染 48h 后,用含有適當濃度的潮霉素 B 篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。 注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷效果最好。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較 好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過 25%。 2)每隔 3-4 天更換含有藥物的篩選培養液。 3)篩選 7 天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這 取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。 4)挑取并轉移 5-10 個抗性克隆于 35mm 細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養 7 天。 5)之后更換正常培養基培養即可。 【注意事項】 1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 2. 本品為有毒化合物,避免與皮膚和眼睛接觸,請小心操作。
Electrode protection Solution 【保存條件】 室溫保存,有效期 1 年 【概述】 本產品為 pH 電極的浸泡液,用于電極保護,大大降低電極損耗,提高電極使用壽命。 【注意事項】 1. 該產品僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。