genefist品牌包括:1.5X半干轉(zhuǎn)快速轉(zhuǎn)膜液2.PAGE預(yù)混膠試劑盒,3.三色預(yù)染蛋白marker.4.10X 濕轉(zhuǎn)快速轉(zhuǎn)膜液.5.通用型抗體稀釋液.6.高效western快速封閉液(10分鐘).7.5X SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液.8.瓊脂糖.9.10X SDS Tris-Gly 電泳緩沖液。
儲存條件該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存18個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。產(chǎn)品簡介及特性本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液體系和離心吸附柱,既能從TAE或TBE瓊脂糖凝膠中回收100 bp-20 kb大小的DNA片段,又能用于直接純化PCR產(chǎn)物,滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。整個(gè)純化過程可在15分鐘完成、不需進(jìn)行苯酚萃取及酒精沉淀、純化的DNA無鹽類或大分子的污染。如果回收前DNA量為1-5ug,建議選用超薄DNA產(chǎn)物純化試劑盒GF203或超薄瓊脂糖凝膠回收試劑盒DF208,推薦洗脫液體積20-50ul。a.使用相同的溶液,可進(jìn)行三種不同的應(yīng)用(PCR 產(chǎn)物純化、DNA 產(chǎn)物純化、膠體回收)。b.每一離心管柱可處理達(dá) 150ul 的 DNA 溶液或 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物,DNA 回收率可達(dá) 80%~95%。c.可用于以 TAE 或 TBE 緩沖液配制的瓊脂糖凝膠的 DNA 回收,DNA 回收率可達(dá) 60~90%。注意事項(xiàng)1.電泳時(shí)應(yīng)使用新的電泳緩沖液,以免影響電泳和回收效果。2.如下一步實(shí)驗(yàn)要求較高,則應(yīng)盡量使用 TAE 電泳緩沖液。3.切膠時(shí),紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,以免對 DNA 造成損傷。4.洗脫緩沖液加量應(yīng)根據(jù)回收前DNA量來決定:如回收前DNA只有1-5μg左右(推薦選用GF203或GF208超薄型試劑盒),加20-50μl洗脫液;如回收前有5-15μg左右DNA,加30-100μl洗脫緩沖液;如回收前有15-30μg左右DNA,加50-300μl洗脫緩沖液。5.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越少,回收率越低。6.對于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r(shí)間。操作步驟使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。一、從 PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收 DNA 1.完成 PCR 擴(kuò)增或其他酶切反應(yīng)操作后,移取反應(yīng)混合液(含有預(yù)純化的 DNA)至干凈的離心管。 2.加入 3 倍體積的溶液 PC 至反應(yīng)混合液中(如 50ul 反應(yīng)混合液加入 150ul 的結(jié)合液),震蕩混合均勻。 3.將吸附柱放入收集管中,移取上一步混合液至吸附柱,室溫放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的懸液,將吸附柱 CB1 放回收集管中。 注意:若樣本體積超過 700ul,可分次加入并重復(fù)此步驟。 4.加入 700ul 的漂洗液至吸附柱中,靜置 1 分鐘以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄懸液,將吸附柱 CB1 放回收集管中。 5.重復(fù)操作步驟 4。 6.將吸附柱 CB1 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘,將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘,以去除、晾干殘余的漂洗液。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶切、PCR 等實(shí)驗(yàn) 7.將吸附柱 CB1 置于一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量的洗脫緩沖液 TB,室溫放置 2 min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。 注意:洗脫體積不應(yīng)小于 30 μl,體積過少影響回收效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響,若后續(xù)做測序,需使用 ddH2O 做洗脫液,并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20°C,以防 DNA 降解。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,室溫放置 2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,將 DNA 溶液收集到離心管。 二、從瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段 1.完成電泳后,將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下(盡量切除多余部分)放入干凈的離心管中,稱取重量(如果凝膠重為 0.1 g,其體積可視為 100 μl)。 2.向膠塊中加入 2 倍體積(如果瓊脂糖凝膠濃度>2%,則加入 3 倍體積)的溶液 PC,60℃水浴孵育 5-15 min或更久,其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管,直至膠塊充分溶解(若膠塊的體積過大,可事先將膠塊切成碎塊)。 注意:膠塊完全溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)槲街谑覝貢r(shí)結(jié)合 DNA 的能力較強(qiáng)。 3.將吸附柱放入收集管中,移取上一步溶膠液至吸附柱,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的濾液,將吸附柱 CB1 放回收集管中。 注意:若樣本體積超過 700ul,可分次加入并重復(fù)此步驟。 4.可選步驟:向吸附柱 CB1 加入 400ul 的溶液 PC,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的濾液,將吸附柱 CB1 放回收集管中(此步驟可去除殘余的瓊脂糖凝膠,以避免純化的 DNA 進(jìn)行酶切反應(yīng)時(shí)出現(xiàn)抑制現(xiàn)象)。 5.向吸附柱加入 700ul 的漂洗液,靜置 1 分鐘以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄濾液,將吸附柱 CB1 放回收集管中。 6.重復(fù)操作步驟 5。 7.將吸附柱 CB1 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘,將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘,以去除、晾干殘余的漂洗液。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶切、PCR 等實(shí)驗(yàn)。 8.將吸附柱 CB1 置于一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫液 TB,靜置 2 分鐘,室溫放置 2 min,12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。 注意:洗脫體積不應(yīng)小于 30 μl,體積過少影響回收效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響,若后續(xù)做測序,需使用 ddH2O 做洗脫液,并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防 DNA 降解。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,室溫放置 2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,將 DNA 溶液收集到離心管。
儲存條件該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存18個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。產(chǎn)品簡介本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。可回收100 bp-30kb大小的片段,回收率可達(dá)80%以上。每個(gè)離心吸附柱每次可吸附的DNA量為10 μg。使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。如果回收前 DNA 量為 1-5ug,建議選用 DF208 超薄瓊脂糖凝膠回收 kit,推薦洗脫液體積 20-50ul。產(chǎn)品特點(diǎn)快速:整個(gè)操作過程快速方便,幾十分鐘即可完成回收工作。多樣:可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。高效:獨(dú)特的離心柱和精心配制的緩沖液,可大量回收到高純度的目的DNA。注意事項(xiàng)1.電泳時(shí)應(yīng)使用新的電泳緩沖液,以免影響電泳和回收效果。2.如下一步實(shí)驗(yàn)要求較高,則應(yīng)盡量使用 TAE 電泳緩沖液。3.切膠時(shí),紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,以免對 DNA 造成損傷。4.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越少,回收率越低。5.對于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r(shí)間。操作步驟使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。1.完成電泳后,將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下(盡量切除多余部分)放入干凈的離心管中,稱取重量(如果凝膠重為 0.1 g,其體積可視為 100 μl)。2.向膠塊中加入 2 倍體積(如果瓊脂糖凝膠濃度>2%,則加入 3 倍體積)的溶液 PN,60℃水浴孵育 5-15 min或更久,其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管,直至膠塊充分溶解(若膠塊的體積過大,可事先將膠塊切成碎 塊)。 注意:膠塊完全溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)槲街谑覝貢r(shí)結(jié)合 DNA 的能力較強(qiáng)。 3.將吸附柱 CB2 放入收集管中,移取上一步溶膠液至吸附柱,室溫放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的濾液,將吸附柱 CB2 放回收集管中。 注意:若樣本體積超過 700ul,可分次加入并重復(fù)此步驟。 4.可選步驟:向吸附柱 CB2 加入 400ul 的溶液 PN,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的濾液,將吸附柱 CB2 放回收集管中(此步驟可去除殘余的瓊脂糖凝膠,以避免純化的 DNA 進(jìn)行酶切反應(yīng)時(shí)出現(xiàn)抑制現(xiàn)象)。 5.向吸附柱 CB2 加入 700ul 的漂洗液,靜置 1 分鐘以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄濾液,將吸附柱 CB2 放回收集管中。 6.重復(fù)操作步驟 5。 7.將吸附柱 CB2 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘,將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘,以去除、晾干殘余的漂洗液。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR 等)實(shí)驗(yàn)。 8.將吸附柱 CB2 置于一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加 30-100ul 洗脫緩沖液 TB,室溫放置 2min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。 注意:洗脫體積不應(yīng)小于 30 μl,體積過少影響回收效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響,若后續(xù)做測序,需使用 ddH2O 做洗脫液,并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20°C,以防 DNA 降解。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,室溫放置 2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,將 DNA 溶液收集到離心管。
儲存條件該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存18個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。產(chǎn)品簡介本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。可回收100 bp-30kb大小的片段,回收率可達(dá)80%以上。每個(gè)離心吸附柱每次可吸附的DNA量為10 μg。使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。如果回收前 DNA 量為 1-5ug,建議選用 DF208 超薄瓊脂糖凝膠回收 kit,推薦洗脫液體積 20-50ul。產(chǎn)品特點(diǎn)快速:整個(gè)操作過程快速方便,幾十分鐘即可完成回收工作。多樣:可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。高效:獨(dú)特的離心柱和精心配制的緩沖液,可大量回收到高純度的目的DNA。注意事項(xiàng)1.電泳時(shí)應(yīng)使用新的電泳緩沖液,以免影響電泳和回收效果。2.如下一步實(shí)驗(yàn)要求較高,則應(yīng)盡量使用 TAE 電泳緩沖液。3.切膠時(shí),紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,以免對 DNA 造成損傷。4.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越少,回收率越低。5.對于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r(shí)間。操作步驟使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。1.完成電泳后,將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下(盡量切除多余部分)放入干凈的離心管中,稱取重量(如果凝膠重為 0.1 g,其體積可視為 100 μl)。2.向膠塊中加入 2 倍體積(如果瓊脂糖凝膠濃度>2%,則加入 3 倍體積)的溶液 PN,60℃水浴孵育 5-15 min或更久,其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管,直至膠塊充分溶解(若膠塊的體積過大,可事先將膠塊切成碎 塊)。 注意:膠塊完全溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)槲街谑覝貢r(shí)結(jié)合 DNA 的能力較強(qiáng)。 3.將吸附柱 CB2 放入收集管中,移取上一步溶膠液至吸附柱,室溫放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的濾液,將吸附柱 CB2 放回收集管中。 注意:若樣本體積超過 700ul,可分次加入并重復(fù)此步驟。 4.可選步驟:向吸附柱 CB2 加入 400ul 的溶液 PN,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的濾液,將吸附柱 CB2 放回收集管中(此步驟可去除殘余的瓊脂糖凝膠,以避免純化的 DNA 進(jìn)行酶切反應(yīng)時(shí)出現(xiàn)抑制現(xiàn)象)。 5.向吸附柱 CB2 加入 700ul 的漂洗液,靜置 1 分鐘以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄濾液,將吸附柱 CB2 放回收集管中。 6.重復(fù)操作步驟 5。 7.將吸附柱 CB2 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘,將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘,以去除、晾干殘余的漂洗液。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR 等)實(shí)驗(yàn)。 8.將吸附柱 CB2 置于一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加 30-100ul 洗脫緩沖液 TB,室溫放置 2min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。 注意:洗脫體積不應(yīng)小于 30 μl,體積過少影響回收效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響,若后續(xù)做測序,需使用 ddH2O 做洗脫液,并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20°C,以防 DNA 降解。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,室溫放置 2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,將 DNA 溶液收集到離心管。
儲存條件 該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存18個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。 產(chǎn)品簡介 本試劑盒采用獨(dú)特的離心吸附柱純化酶切、PCR等反應(yīng)溶液中的DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì),回收100 bp-20 kb DNA片段,回收率可達(dá)80%以上。每個(gè)離心吸附柱每次可吸附的DNA量為20μg。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。 產(chǎn)品特點(diǎn) 快速:整個(gè)操作過程只需十幾分鐘,節(jié)省時(shí)間。 多樣:可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。 高效:獨(dú)特的離心柱和精心配制的緩沖液,可大量回收到高純度目的DNA。 注意事項(xiàng) 1.本試劑盒適用于無選擇性的回收溶液中所有 DNA 片段,如需選擇性回收特定片段,同時(shí)去除其他不同大小片段,請選擇膠回收試劑盒。 2.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越少,回收率越低。 3.對于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r(shí)間。 操作步驟 使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽;所有離心步驟均為使用臺式離 心機(jī)在室溫下離心。 1.完成 PCR 擴(kuò)增或其他酶切反應(yīng)操作后,移取反應(yīng)混合液(含有預(yù)純化的 DNA)至干凈的離心管。 2.加入 3 倍體積的溶液 PB 至反應(yīng)混合液中(如 50ul 反應(yīng)混合液加入 150ul 的結(jié)合液),震蕩混合均勻。 3.將吸附柱 CB1 放入收集管中,移取上一步混合液至吸附柱,室溫放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g ) 離心 1 分鐘,丟棄收集管中的懸液,將吸附柱 CB1 放回收集管中。 注意:若樣本體積超過 700ul,可分次加入并重復(fù)此步驟。 4.向吸附柱 CB1 中加入 700ul 的漂洗液,靜置 1 分鐘以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄懸液,將吸附柱 CB1 放回收集管中。 5.重復(fù)操作步驟 4。 6.將吸附柱 CB1 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘,將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘,以去除、晾干殘余的漂洗液。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR 等)實(shí)驗(yàn)。 7.將吸附柱 CB1 置于一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量 50-300ul 洗脫緩沖液 TB,室溫放置 2 min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。 注意:洗脫體積不應(yīng)小于 50 μl,體積過少影響回收效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響,若后續(xù)做測序,需使用 ddH2O 做洗脫液,并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防 DNA 降解。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,室溫放置 2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,將 DNA 溶液收集到離心管。
儲存條件 該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存18個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。 產(chǎn)品簡介 本試劑盒采用獨(dú)特的離心吸附柱純化酶切、PCR等反應(yīng)溶液中的DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì),回收100 bp-20 kb DNA片段,回收率可達(dá)80%以上。每個(gè)離心吸附柱每次可吸附的DNA量為10 μg。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。 如果回收前DNA量為1-5ug,建議選用GF203超薄DNA產(chǎn)物純化kit,推薦洗脫液體積20-50ul。 產(chǎn)品特點(diǎn) 快速:整個(gè)操作過程只需十幾分鐘,節(jié)省時(shí)間。 多樣:可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。 高效:獨(dú)特的離心柱和精心配制的緩沖液,可大量回收到高純度目的DNA。 注意事項(xiàng) 1.本試劑盒適用于無選擇性的回收溶液中所有 DNA 片段,如需選擇性回收特定片段,同時(shí)去除其他不同大小片段,請選擇膠回收試劑盒。 2.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越少,回收率越低。 3.對于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r(shí)間。 操作步驟 使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽;所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。 1.完成 PCR 擴(kuò)增或其他酶切反應(yīng)操作后,移取反應(yīng)混合液(含有預(yù)純化的 DNA)至干凈的離心管。 2.加入 3 倍體積的溶液 PB 至反應(yīng)混合液中(如 50ul 反應(yīng)混合液加入 150ul 的結(jié)合液),震蕩混合均勻。 3.將吸附柱放入收集管中,移取上一步混合液至吸附柱,室溫放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的懸液,將吸附柱 CB2 放回收集管中。 注意:若樣本體積超過 700ul,可分次加入并重復(fù)此步驟。 4.向吸附柱 CB2 加入 700ul 的漂洗液,靜置 1 分鐘以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄懸液,將吸附柱 CB2 放回收集管中。 5.重復(fù)操作步驟 4。 6.將吸附柱 CB2 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘,將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘,以去除、晾干殘余的漂洗液。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR 等)實(shí)驗(yàn)。 7.將吸附柱CB2置于一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加30-100洗脫緩沖液TB,室溫放置2 min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。 注意:洗脫體積不應(yīng)小于 30 μl。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響,若后續(xù)做測序,需使用 ddH2O做洗脫液,并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,室溫放置 2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min,將 DNA溶液收集到離心管。
儲存條件該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存18個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。產(chǎn)品簡介本試劑盒采用獨(dú)特的離心吸附柱純化酶切、PCR等反應(yīng)溶液中的DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì),回收100 bp-10 kb DNA片段,回收率可達(dá)80%以上,可用最少20ul的洗脫液進(jìn)行洗脫,每個(gè)離心吸附柱每次可吸附的DNA量為5 μg,特別適用于較少樣品量的回收。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn)快速:整個(gè)操作過程只需十幾分鐘,節(jié)省時(shí)間。多樣:可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。高效:獨(dú)特的離心柱和精心配制的緩沖液,可大量回收到高純度目的DNA。注意事項(xiàng)1.本試劑盒適用于無選擇性的回收溶液中所有 DNA 片段,如需選擇性回收特定片段,同時(shí)去除其他不同大小片段,請選擇膠回收試劑盒。2.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),初始量越少、洗脫體積越少,回收率越低。3.對于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r(shí)間。操作步驟使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽;所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。1.完成 PCR 擴(kuò)增或其他酶切反應(yīng)操作后,移取反應(yīng)混合液(含有預(yù)純化的 DNA)至干凈的離心管。2.加入 3 倍體積的溶液 PB 至反應(yīng)混合液中(如 50ul 反應(yīng)混合液加入 150ul 的結(jié)合液),震蕩混合均勻。3.將吸附柱放入收集管中,移取上一步混合液至吸附柱,室溫放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘,丟棄收集管中的懸液,將吸附柱 CB3 放回收集管中。注意:若樣本體積超過 700ul,可分次加入并重復(fù)此步驟。 4.向吸附柱 CB3 加入 700ul 的漂洗液 PW,靜置 1 分鐘以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1分鐘,丟棄懸液,將吸附柱 CB3 放回收集管中。 5.重復(fù)操作步驟 4。 6.將吸附柱 CB3 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘,將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘,以去除、晾干殘余的漂洗液。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR 等)實(shí)驗(yàn)。 7.將吸附柱 CB3 置于一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加 20-50ul 洗脫緩沖液 TB,室溫放置 2min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。 注意:洗脫體積最低不應(yīng)小于 20 μl,體積過少會影響回收的效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響,若后續(xù)做測序,需使用 ddH2O 做洗脫液,并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防止 DNA 降解。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,再次離心管。
儲存條件 本試劑盒在室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月;更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。(注意:當(dāng)?shù)蜏刭A存時(shí),使用前應(yīng)先將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫中放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以平衡溶液溫度)。單獨(dú)包裝的RNase A在室溫可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。加入RNase A后的溶液P1應(yīng)置于2-8℃保存,可穩(wěn)定保存6個(gè)月。產(chǎn)品簡介 本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),高效專一地結(jié)合質(zhì)粒DNA。同時(shí)采用特殊的去內(nèi)毒素溶液ER和過濾柱CS1,可有效的去除內(nèi)毒素、蛋白等雜質(zhì);整個(gè)提取過程僅需1個(gè)小時(shí),方便快捷。以下操作步驟適用于提取5-15 ml過夜培養(yǎng)的大腸桿菌,質(zhì)粒提取得率和質(zhì)量與宿主菌的種類和培養(yǎng)條件,細(xì)胞的裂解,質(zhì)粒拷貝數(shù),質(zhì)粒的穩(wěn)定性,抗生素等因素有關(guān)。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞及各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、連接等實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng) 請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。 1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(將試劑盒中提供的 RNase A 全部加入),混勻,置于 2-8℃保存。2.使用前先檢查溶液 P2 和 P3 是否出現(xiàn)渾濁,如有混濁現(xiàn)象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。3.所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心,速度為 12,000 rpm (~13,400×g )。4.去內(nèi)毒素溶液 ER 在多次開蓋使用后,可能會有細(xì)微的顏色變化,不影響最終質(zhì)粒提取效率和純度。5.提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于 10 kb 的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,同時(shí)按比例增加 P1、P2、P3 的用量,洗脫緩沖液應(yīng)在 65-70℃預(yù)熱。可以適當(dāng)?shù)难娱L吸附和洗脫的時(shí)間,以增加提取效率。操作步驟 使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。 本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其它用途1.取5-15 ml過夜培養(yǎng)的菌液加入離心管中,12,000 rpm (~13,400×g ) 離心1 min,盡量吸除上清。注意:菌液較多時(shí)可以通過幾次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中, 菌體量以能夠充分裂解為佳,過多的菌體裂解不充分會降低質(zhì)粒的提取效率。 2.向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl溶液P1 (請先檢查是否已加入RNaseA),使用移液器吸吐或渦旋振蕩器徹底懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀。注意:請務(wù)必徹底懸浮細(xì)菌沉淀,如果有未徹底混勻的菌塊,會影響裂解,導(dǎo)致提取量和純度偏低。 3.向離心管中加入500 μl溶液P2,溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。注意:溫和地混合,不要劇烈震蕩,以免污染基因組DNA。此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠,所用時(shí)間不應(yīng)超過5 min,以免質(zhì)粒受到破壞。如果未變得清亮,可能由于菌體過多,裂解不徹底,應(yīng)減少菌體量。 4.向離心管中加入500 μl溶液P3,立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次,充分混勻,此時(shí)會出現(xiàn)白色絮狀沉淀,然后室溫放置10 min左右,12,000 rpm (~13,400×g ) 離心10 min,此時(shí)在離心管底部形成沉淀。注意:P3加入后應(yīng)立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀,可再次離心后取上清。 5.將上一步收集的上清液分次加入過濾柱CS1(過濾柱放入收集管中),12,000 rpm(~13,400×g ) 離心2min,小心地將過濾離心后收集管中得到的溶液分次加入吸附柱CP2中(吸附柱放入收集管中),(如果過濾柱中有殘余的液體,說明步驟4的上清中雜質(zhì)過多,可以延長離心的時(shí)間;如果離心后收集管底部有少量的沉淀,盡量地吸取上清)。6.12,000 rpm (~13,400×g ) 離心1 min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP2放入收集管中。7.向吸附柱CP2加入750 ml 去內(nèi)毒素溶液ER(已經(jīng)加入異丙醇),靜置2分鐘使管柱膜平衡,室溫12,000rpm (~13,400×g)離心1 min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。8.向吸附柱CP2中加入700 μl漂洗液PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g ) 離心1 min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP2放入收集管中。注意:加入漂洗液PW后,如果室溫靜置2-5 min,有助于更好地去除雜質(zhì)。 9.重復(fù)操作步驟8.10.將吸附柱CP2重新放回收集管中,12,000 rpm (~13,400×g ) 離心2 min,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。為確保下游實(shí)驗(yàn)不受殘留乙醇的影響,建議將吸附柱CP2開蓋,置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。 11.將吸附柱CP2置于一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加100-300 μl洗脫緩沖液TB,室溫放置2 min,12,000 rpm (~13,400×g ) 離心1 min將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。注意:洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于100μl,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響,若后續(xù)做測序,需使用ddH2O做洗脫液,并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率。且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。為了增加質(zhì)粒的回收率,可將得到的溶液重新加入吸附柱中,室溫放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 離心2 min,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。
儲存條件該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。第一次使用前將RNase A加入溶液P1中,混勻后置于2-8℃保存,可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。單獨(dú)包裝的RNase A 在室溫可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。產(chǎn)品簡介本試劑盒采用堿裂解法裂解細(xì)胞,通過離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司新型材料,高效、專一吸附DNA,可去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。以下操作步驟適用于提取5-15 ml過夜培養(yǎng)的大腸桿菌,質(zhì)粒提取得率和質(zhì)量與宿主菌的種類和培養(yǎng)條件,細(xì)胞的裂解,質(zhì)粒拷貝數(shù),質(zhì)粒的穩(wěn)定性,抗生素等因素有關(guān)。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、連接、轉(zhuǎn)化、文庫篩選、體外翻譯、轉(zhuǎn)染一些常規(guī)的傳代細(xì)胞等。注意事項(xiàng) 請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(將試劑盒中提供的 RNase A 全部加入),混勻,置于 2-8℃保存。2.使用前先檢查溶液 P2 和 P3 是否出現(xiàn)渾濁,如有混濁現(xiàn)象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。3.注意不要直接接觸溶液 P2 和 P3,使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。4.所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心,速度為 12,000 rpm (~13,400×g )。5.提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于 10 kb 的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,同時(shí)按比例增加 P1、P2、P3 的用量,洗脫緩沖液應(yīng)在 65-70℃預(yù)熱。可以適當(dāng)?shù)难娱L吸附和洗脫的時(shí)間,以增加提取效率。操作步驟使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。1.取5-15 ml過夜培養(yǎng)的菌液加入離心管中,12,000 rpm (~13,400×g )離心1 min,盡量吸除上清。注意:菌液較多時(shí)可以通過幾次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中。收集的菌體量以能夠充分裂解為佳,菌體過多裂解不充分會降低質(zhì)粒的提取效率。 2.向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl溶液P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或渦旋振蕩器徹底懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀。 注意:如果有未徹底混勻的菌塊,會影響裂解,導(dǎo)致提取量和純度偏低。 3.向離心管中加入500 μl溶液P2,溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。 注意:溫和地混合,不要劇烈震蕩,以免污染基因組DNA。此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠,所用時(shí)間不應(yīng)超過5min,以免質(zhì)粒受到破壞。如果菌液沒有變清亮,可能是由于菌體過多,裂解不徹底,應(yīng)減少菌體量。 4.向離心管中加入500 μl溶液P3,立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次,充分混勻,此時(shí)會出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12,000 rpm (~13,400×g ) 離心10 min,此時(shí)在離心管底部形成沉淀。 注意:P3加入后應(yīng)立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀,可再次離心后取上清。 5.將上一步收集的上清液分次加入吸附柱CP2中(吸附柱放入收集管中,其容量為750-800ul),注意盡量不要吸出沉淀。12,000 rpm (~13,400×g )離心1 min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP2放入收集管中。 6.向吸附柱CP2中加入700 μl漂洗液PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g )離心1 min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP2放入收集管中。 7.重復(fù)操作步驟6。 8.吸附柱CP2放入收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )離心2 min,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。為確保下游實(shí)驗(yàn)不受殘留乙醇的影響,建議將吸附柱CP2開蓋,置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。 9.將吸附柱CP2置于一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加100-300 μl洗脫緩沖液TB,室溫放置2-5 min,12,000 rpm(~13,400×g )離心2 min,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。 注意:洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于100μl,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響,若后續(xù)做測序,需使用ddH2O做洗脫液,并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率。且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。為了增加質(zhì)粒的回收率,可將得到的溶液重新加入吸附柱中,室溫放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 離心2min,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。
儲存條件 該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。第一次使用前將RNase A加入溶液P1中,混勻后置于2-8℃保存,可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。單獨(dú)包裝的RNase A 在室溫可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。 產(chǎn)品簡介 本試劑盒采用堿裂解法裂解細(xì)胞,再通過離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司新型材料,高效、專一吸附DNA。由于增加了過濾柱,與普通的提取方法相比,本試劑盒可去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物,適用于提取1-5 ml過夜培養(yǎng)的大腸桿菌,質(zhì)粒提取得率和質(zhì)量與宿主菌的種類和培養(yǎng)條件,細(xì)胞的裂解,質(zhì)粒拷貝數(shù),質(zhì)粒的穩(wěn)定性,抗生素等因素有關(guān)。 使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞及各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、連接等實(shí)驗(yàn)。 注意事項(xiàng) 請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。 1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(將試劑盒中提供的 RNase A 全部加入),混勻,置于 2-8℃保存。 2.使用前先檢查溶液 P2 和 P3 是否出現(xiàn)渾濁,如有混濁現(xiàn)象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。 3.注意不要直接接觸溶液 P2 和 P3,使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。 4.所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心,速度為 12,000 rpm (~13,400×g)。 5.提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。 操作步驟 使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。 1.取1-5 ml過夜培養(yǎng)的菌液加入離心管中,12,000 rpm (~13,400×g )離心1 min,盡量吸除上清(菌液較多時(shí)可以通過幾次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中)。 2.向留有菌體沉淀的離心管中加入250 μl溶液P1 (請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或渦旋振蕩器徹底懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀。 注意:如果有未徹底混勻的菌塊,會影響裂解,導(dǎo)致提取量和純度偏低。 3.向離心管中加入250 μl溶液P2,溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。 注意:溫和地混合,不要劇烈震蕩,以免打斷基因組DNA,造成提取的質(zhì)粒中混有基因組DNA片斷。此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠,所用時(shí)間不應(yīng)超過5 min,以免質(zhì)粒受到破壞。如果未變得清亮,可能由于菌體過多,裂解不徹底,應(yīng)減少菌體量。 4.向離心管中加入250 μl溶液P3,立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次,充分混勻,此時(shí)會出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12,000 rpm (~13,400×g ) 離心10 min,用移液器小心地將上清轉(zhuǎn)移到過濾柱CS1(過濾柱放入收集管中),注意盡量不要吸出沉淀。 注意:P3加入后應(yīng)立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀,可再次離心后取上清。 5.12,000 rpm (~13,400×g )離心2 min,小心地將離心后收集管中得到的溶液轉(zhuǎn)移到吸附柱CP1中(吸附柱放入收集管中),(如果過濾柱中有殘余的液體說明步驟4吸取的上清中雜質(zhì)過多,可以延長離心的時(shí)間; 如果離心后收集管底部有少量的沉淀,盡量的吸取上清)。 6.12,000 rpm (~13,400×g ) 離心30-60 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP1放入收集管中。 7.向吸附柱CP1中加入700 μl漂洗液PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g ) 離心30-60 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP1放入收集管中。 8.重復(fù)操作步驟7。 9.將吸附柱CP1放入收集管中,12,000 rpm (~13,400×g ) 離心2 min,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。為確保下游實(shí)驗(yàn)不受殘留乙醇的影響,建議將吸附柱CP1開蓋,置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。 10.將吸附柱CP1置于一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位滴加50-100 μl洗脫緩沖液TB,室溫放置2 min,12,000 rpm (~13,400×g) 離心2 min將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。 注意:洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50μl,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響,若后續(xù)做測序,需使用ddH2O做洗脫液,并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率。且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。為了增加質(zhì)粒的回收率,可將得到的溶液重新加入吸附柱中,室溫放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 離心2 min,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。 低拷貝或大質(zhì)粒( >10kb)提取 如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10 kb的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,使用5-10 ml過夜培養(yǎng)物,同時(shí)按照比例增加P1、P2、P3的用量,洗脫緩沖液TB應(yīng)在65-70℃水浴預(yù)熱,在吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)难娱L時(shí)間,以增加提取效率。其它步驟相同。
儲存條件 該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀。第一次使用前將RNase A加入溶液P1中,混勻后置于2-8℃保存,可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。單獨(dú)包裝的RNase A 在室溫可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。 產(chǎn)品簡介 本試劑盒采用堿裂解法裂解細(xì)胞,再通過離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司新型材料,高效、專一吸附DNA。以下操作步驟適用于提取1-5ml過夜培養(yǎng)的大腸桿菌,質(zhì)粒提取得率和質(zhì)量與宿主菌的種類和培養(yǎng)條件,細(xì)胞的裂解,質(zhì)粒拷貝數(shù),質(zhì)粒的穩(wěn)定性,抗生素等因素有關(guān)。 使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、連接、轉(zhuǎn)化、文庫篩選、體外翻譯、轉(zhuǎn)染一些常規(guī)的傳代細(xì)胞等。 注意事項(xiàng) 請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。 1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(將試劑盒中提供的 RNase A 全部加入),混勻,置于 2-8℃保存。 2.使用前請先檢查溶液 P2 和 P3 是否出現(xiàn)渾濁,如有混濁現(xiàn)象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄 清。 3.注意不要直接接觸溶液 P2 和 P3,使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。 4.所有離心步驟均為使用常規(guī)臺式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心,速度為 12,000 rpm(~13,400×g )。 5.提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。 操作步驟 使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。 1.取1-5 ml過夜培養(yǎng)的菌液加入離心管中,12,000 rpm(~13,400×g ) 離心1 min,盡量吸除上清(菌液較多時(shí)可以通過多次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中)。 2.向留有菌體沉淀的離心管中加入250 μl溶液P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或渦旋振蕩器徹底懸浮細(xì)菌沉淀。 注意:如果有未徹底混勻的菌塊,會影響裂解,導(dǎo)致提取量和純度偏低。 3.向離心管中加入250 μl溶液P2,溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。 注意:溫和地混合,不要劇烈震蕩,以免打斷基因組DNA,造成提取的質(zhì)粒中混有基因組DNA片斷。此時(shí) 菌液應(yīng)變得清亮粘稠,所用時(shí)間不應(yīng)超過5 min,以免質(zhì)粒受到破壞。如果未變得清亮,可能由于菌體 過多,裂解不徹底,應(yīng)減少菌體量。 4.向離心管中加入250 μl溶液P3,立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次,充分混勻,此時(shí)將出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12,000 rpm (~13,400×g )離心10 min。 注意:P3加入后應(yīng)立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀,可再次離心后取上 清。 5.將上一步收集的上清液用移液器轉(zhuǎn)移到吸附柱CP1中 (吸附柱放入收集管中),注意盡量不要吸出沉淀。12,000 rpm (~13,400×g)離心30-60 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP1放入收集管中。 6.向吸附柱CP1中加入700 μl漂洗液PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g )離心30-60 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CP1放入收集管中。 7.重復(fù)操作步驟6。 8.將吸附柱CP1放入收集管中,12,000 rpm (~13,400×g) 離心2 min,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去 除。 注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。為確保下游實(shí)驗(yàn)不受殘留乙醇的影響,建議將吸附柱CP1開蓋,置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。 9.將吸附柱CP1置于一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位滴加50-100 μl洗脫緩沖液TB,室溫放置2min,12,000 rpm (~13,400×g) 離心2 min將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。 注意:洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50μl,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響,若后續(xù)做測序,需使用ddH2O做洗脫液,并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率。且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。為了增加質(zhì)粒的回收率,可將得到的溶液重新加入吸附柱中,室溫放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 離心2 min,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。 低拷貝或大質(zhì)粒( >10kb)提取 如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10 kb的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,使用5-10 ml過夜培養(yǎng)物,同時(shí)按照比例增加P1、P2、P3的用量,洗脫緩沖液TB應(yīng)在65-70℃水浴預(yù)熱,在吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)难娱L時(shí)間,以增加提取效率。其它步驟相同
產(chǎn)品簡介:SDS-PAGE 上樣緩沖液(SDS-PAGE Loading Buffer, 5X),是一種經(jīng)過改良的以溴酚藍(lán)為染料,5 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液,用于 SDS-PAGE 時(shí)蛋白樣品的上樣操作。不含傳統(tǒng)的 β-巰基乙醇或 DTT,Genefist 上樣緩沖液采用 TCEP 作為還原劑,穩(wěn)定性更好、還原效果更優(yōu),并且無難聞氣味!保存條件:-20℃保存,至少一年有效。使用說明:1、在室溫或不超過 37℃的水浴中溶解蛋白上樣緩沖液。水浴溶解后立即室溫存放,盡量避免長時(shí)間置于水浴中。使用完畢后置于-20℃保存。2、按照每 4ul 蛋白樣品加入 1ul 上樣緩沖液的比例,混合蛋白樣品和上樣緩沖液。3、100℃或沸水浴加熱 5-10 分鐘,以充分變性蛋白。4、冷卻到室溫后,上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內(nèi),開始電泳。注意事項(xiàng):? 由于含有變性劑,本品不適用于非變性膠的電泳? SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(5X)必須完全溶解后再使用。? 如果起始時(shí)細(xì)胞或組織的用量較大,基因組 DNA 含量較高,“混合液”可適當(dāng)延長加熱時(shí)間。? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品簡介通用型抗體稀釋液是一種即用型的,適合于稀釋所有免疫抗體測定(Immunofluorescence, IHC, ELISA, WB)實(shí)驗(yàn)中的抗體。該試劑可用于一抗或二抗的稀釋和配制,在 4℃保存和使用不少于六個(gè)月。稀釋液中加入了多種抗體結(jié)合反應(yīng)增強(qiáng)劑及穩(wěn)定劑,能夠增加抗體的溶解度和穩(wěn)定性,增強(qiáng)免疫反應(yīng),降低非特異的背景顏色,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度,可反復(fù)使用,節(jié)約寶貴的抗體。試劑中不含有動物源的蛋白,適合于所有類型抗體稀釋,包括 HRP,AP 標(biāo)記的抗體。不含磷酸鹽、疊氮鈉或硫柳汞類防腐劑,安全性更高,。產(chǎn)品特色? 即用型稀釋液,無需配制? 稀釋后的抗體可以使用長達(dá) 6 個(gè)月? 適用所有實(shí)驗(yàn)的抗體稀釋(IF、IHC、ELISA、WB)? 含抗體結(jié)合反應(yīng)增強(qiáng)劑、穩(wěn)定劑,效果更佳? 不含 BSA、脫脂奶粉等動物源蛋白? 不含磷酸鹽、疊氮鈉或硫柳汞類防腐劑運(yùn)輸和保存條件常溫運(yùn)輸,4℃存儲,有效期兩年。操作步驟 :? 根據(jù)抗體使用說明書,直接用本品對一抗或二抗進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)的稀釋。? 保存在抗體稀釋液中的抗體可回收于 4℃保存,可反復(fù)使用多次,長達(dá) 6 個(gè)月以上,直至不能達(dá)到理想結(jié)果后丟棄。注意事項(xiàng)1、使用后請旋緊瓶蓋,防止溶液揮發(fā)或與空氣的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),并放回 4℃保存。2、在進(jìn)行抗體免疫反應(yīng)前可以使用 Genefist 的高效 Western 封閉液(貨號GF1815)進(jìn)行封閉,能進(jìn)一步提高條帶的清晰度,減少顯色后的高背景和雜帶的產(chǎn)生 。3、本品不含疊氮鈉或硫柳汞類防腐劑,但還需小心操作避免皮膚直接接觸。4、本試劑只能用于科研實(shí)驗(yàn),請勿用于臨床診斷和其它用途。
產(chǎn)品簡介通用型抗體稀釋液是一種即用型的,適合于稀釋所有免疫抗體測定(Immunofluorescence, IHC, ELISA, WB)實(shí)驗(yàn)中的抗體。該試劑可用于一抗或二抗的稀釋和配制,在 4℃保存和使用不少于六個(gè)月。稀釋液中加入了多種抗體結(jié)合反應(yīng)增強(qiáng)劑及穩(wěn)定劑,能夠增加抗體的溶解度和穩(wěn)定性,增強(qiáng)免疫反應(yīng),降低非特異的背景顏色,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度,可反復(fù)使用,節(jié)約寶貴的抗體。試劑中不含有動物源的蛋白,適合于所有類型抗體稀釋,包括 HRP,AP 標(biāo)記的抗體。不含磷酸鹽、疊氮鈉或硫柳汞類防腐劑,安全性更高,。產(chǎn)品特色? 即用型稀釋液,無需配制? 稀釋后的抗體可以使用長達(dá) 6 個(gè)月? 適用所有實(shí)驗(yàn)的抗體稀釋(IF、IHC、ELISA、WB)? 含抗體結(jié)合反應(yīng)增強(qiáng)劑、穩(wěn)定劑,效果更佳? 不含 BSA、脫脂奶粉等動物源蛋白? 不含磷酸鹽、疊氮鈉或硫柳汞類防腐劑運(yùn)輸和保存條件常溫運(yùn)輸,4℃存儲,有效期兩年。操作步驟 :? 根據(jù)抗體使用說明書,直接用本品對一抗或二抗進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)的稀釋。? 保存在抗體稀釋液中的抗體可回收于 4℃保存,可反復(fù)使用多次,長達(dá) 6 個(gè)月以上,直至不能達(dá)到理想結(jié)果后丟棄。注意事項(xiàng)1、使用后請旋緊瓶蓋,防止溶液揮發(fā)或與空氣的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),并放回 4℃保存。2、在進(jìn)行抗體免疫反應(yīng)前可以使用 Genefist 的高效 Western 封閉液(貨號GF1815)進(jìn)行封閉,能進(jìn)一步提高條帶的清晰度,減少顯色后的高背景和雜帶的產(chǎn)生 。3、本品不含疊氮鈉或硫柳汞類防腐劑,但還需小心操作避免皮膚直接接觸。4、本試劑只能用于科研實(shí)驗(yàn),請勿用于臨床診斷和其它用途。
半干轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)快速轉(zhuǎn)膜液(5X)Cat #. GF1816 / Size. 500 ml產(chǎn)品簡介半干轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)快速轉(zhuǎn)膜液 Western blot Rapid Transfer Buffer for semi-dry(5X)是 Genefist推出的一種 5 倍濃度的高效轉(zhuǎn)膜液,能高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(PVDF 或硝酸纖維素膜)上。本轉(zhuǎn)膜液使用過程中,無需再使用甲醇或乙醇等任何醇類試劑,且能在 5-15 分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過程,快速、高效、安全!產(chǎn)品特色:? 高效安全:不使用甲醇或乙醇等任何醇類試劑,減少有毒試劑使用; ?? 快速穩(wěn)定:能在 5-15 分鐘完成轉(zhuǎn)膜過程,產(chǎn)熱量小,減少蛋白損失;? 兼容性好:兼容 Laemmli 膠,預(yù)制膠,F(xiàn)astPAGE,Bis-Tris 膠等多種凝膠。運(yùn)輸和保存條件:常溫運(yùn)輸,室溫存儲,有效期一年。操作步驟 :1、1X 快速轉(zhuǎn)膜液的配制(100ml):取 20ml 快速轉(zhuǎn)膜液(5×)+ 80ml 去離子水;2、做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu),然后轉(zhuǎn)移至電泳槽中,設(shè)定恒壓 20V,一般時(shí)間 5-15 分鐘完成蛋白轉(zhuǎn)膜。備注:? PVDF 膜使用前要用無水甲醇潤濕 30 秒以上。? 轉(zhuǎn)印電流建議設(shè)定恒壓 20V,1mm 厚度的凝膠,一般 5 分鐘可以將 150kD 以下蛋白完全轉(zhuǎn)印;大于 150kD 蛋白 10-15 分鐘即可完全轉(zhuǎn)印。? 凝膠的濃度影響轉(zhuǎn)印的效率,對于膠濃度 7.5%,5-10 分鐘即可完成轉(zhuǎn)印;對于膠濃度 10%,,5-15 分鐘即可完成轉(zhuǎn)印;對于膠濃度大于 10%,建議延長至 8-20 分鐘。注意事項(xiàng)1、使用本試劑前請仔細(xì)閱讀說明書。2、本產(chǎn)品只能用于科研實(shí)驗(yàn),請勿用于臨床診斷及其它用途。
Product Information GeneFist ?series3-color High Range Protein Marker(9-245 kDa)GF6619Size:250 μl × 15 μl per well for 100 applicationsStorage4°C for 3 months-20°C for 24 monthsLoading Volume? 3 μl or 5 μl per loading for clear visualizationduring electrophoresis on a 15-well or 10-wellmini-gel.? 1.5~2.5 μl per well for general Western blottingtransfer.? Apply more for a thicker (> 1.5 mm) or larger gel.DescriptionThe GF6619 GeneFist? 3-color High Range ProteinMarker is a ready to use three-color protein standardwith 12 pre-stained proteins covering a wide range ofmolecular weights from 10 to 245 kDa in Tris-Glycinebuffer (9 to 235 kDa in Bis-Tris (MOPS) buffer and 10-235 kDa in Bis-Tris (MES) buffer). Proteins arecovalently coupled with different chromophores foreasy identification of bands, with two referenceproteins carrying enhanced intensity correspondingto a green at 25 kDa and red at 75 kDa, respectively,as separated on SDS-PAGE (Tris-Glycine buffer).The GF6619 GeneFist? 3-color High Range ProteinMarker is designed for monitoring protein separationduring SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,verification of Western transfer efficiency onmembranes (PVDF, nylon, or nitrocellulose) and forapproximating the size of proteins.The marker is supplied in gel loading buffer and isready to use. Do NOT heat, dilute, or add reducingagents before loading.ContentsApproximately 0.1~0.4 mg/ml of each protein in thebuffer (20 mM Tris-phosphate (pH 7.5 at 25°C), 2 %SDS, 0.2 mM Dithiothreitol, 3.6 M Urea, and 15 % (v/v)Glycerol).Guide for Molecular Weight EstimationMigration patterns and approximate MWs (kDa) ofGF6619 GeneFist? 3-color High Range ProteinMarker in different electrophoresis conditions arelisted below:BandColorTRISGLYCINEBIS-TRIS(MOPS)BIS-TRIS(MES)1Blue2452352352Blue1801701703Blue1401301304Blue10093935Red7570726Blue6053537Blue4541428Blue3530309Green25222310Blue20181811Blue15141412Blue109103-color High Range Protein MarkerNote. The apparent molecular weight (kDa) of each protein has beendetermined by calibration against an unstained protein standard;supplemental data should be considered for more accurateadjustments in different electrophoresis conditions.Quality ControlUnder suggested conditions, GF6619 GeneFist? 3-color High Range Protein Marker resolves 12 majorbands in SDS-PAGE (Tris-Glycine, MOPS, and MESbuffer) and after Western blotting transfer to anitrocellulose membrane.Other informationGENEFIST Technology, Inc. claims all warranties withrespect to this document, expressed or implied,including but not limited to those of merchantabilityor fitness for a particular purpose. In no event shallGENEFIST Technology, Inc. be liable, whether incontract, tort, warranty, or under any statute or anyother basis for special, incidental, indirect, punitive,multiple or consequential damages in connection withor arising from this document, including but notlimited to the use thereof.Caution: Not intended for human or animal diagnostic or therapeuticuses.Related ProductsGF6150 GeneFist All Blue Regular Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6160 GeneFist All Blue Regular Range PlusProtein Marker, 250 μl × 2GF6170 GeneFist All Blue Broad Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6240 GeneFist Pink Blue Protein Marker, 250 μl × 2GF6616 GeneFist 3-color Regular Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6619 GeneFist 3-color High Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6261 GeneFist Enhanced 3-color High RangeProtein Marker, 250 μl × 2GF6270 GeneFist 3-color Broad Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6280 GeneFist 3-color Extra Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6500 GeneFist 3-color Pre-stained Protein Ladder,Regular Range, 250 μl × 2GF6510 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, High Range, 250 μl × 2GF6520 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, Broad Range, 250 μl × 2GF2100 GeneFist Protein Fluorescent Staining Dye(Red, 1,000X), 1 mlGF5110 GeneFist 50 bp DNA Ladder, 500 μlGF5220 GeneFist 100 bp DNA Ladder II, 500 μlGF5310 GeneFist 1 KB (0.25-10 kb) DNA Ladder,500 μlGF5510 GeneFist Super Range DNA Ladder, (50 bp-25 kb), 500 μlGF3010 GeneFist Blue Light LED epi-illuminator,AC 100-240V, 50/60HzGF1100 GeneFist Western Marker I, 250 μlGeneFist Western Marker IFor research use only
Product Information GeneFist ?series3-color High Range Protein Marker(9-245 kDa)GF6619Size:250 μl × 15 μl per well for 100 applicationsStorage4°C for 3 months-20°C for 24 monthsLoading Volume? 3 μl or 5 μl per loading for clear visualizationduring electrophoresis on a 15-well or 10-wellmini-gel.? 1.5~2.5 μl per well for general Western blottingtransfer.? Apply more for a thicker (> 1.5 mm) or larger gel.DescriptionThe GF6619 GeneFist? 3-color High Range ProteinMarker is a ready to use three-color protein standardwith 12 pre-stained proteins covering a wide range ofmolecular weights from 10 to 245 kDa in Tris-Glycinebuffer (9 to 235 kDa in Bis-Tris (MOPS) buffer and 10-235 kDa in Bis-Tris (MES) buffer). Proteins arecovalently coupled with different chromophores foreasy identification of bands, with two referenceproteins carrying enhanced intensity correspondingto a green at 25 kDa and red at 75 kDa, respectively,as separated on SDS-PAGE (Tris-Glycine buffer).The GF6619 GeneFist? 3-color High Range ProteinMarker is designed for monitoring protein separationduring SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,verification of Western transfer efficiency onmembranes (PVDF, nylon, or nitrocellulose) and forapproximating the size of proteins.The marker is supplied in gel loading buffer and isready to use. Do NOT heat, dilute, or add reducingagents before loading.ContentsApproximately 0.1~0.4 mg/ml of each protein in thebuffer (20 mM Tris-phosphate (pH 7.5 at 25°C), 2 %SDS, 0.2 mM Dithiothreitol, 3.6 M Urea, and 15 % (v/v)Glycerol).Guide for Molecular Weight EstimationMigration patterns and approximate MWs (kDa) ofGF6619 GeneFist? 3-color High Range ProteinMarker in different electrophoresis conditions arelisted below:BandColorTRISGLYCINEBIS-TRIS(MOPS)BIS-TRIS(MES)1Blue2452352352Blue1801701703Blue1401301304Blue10093935Red7570726Blue6053537Blue4541428Blue3530309Green25222310Blue20181811Blue15141412Blue109103-color High Range Protein MarkerNote. The apparent molecular weight (kDa) of each protein has beendetermined by calibration against an unstained protein standard;supplemental data should be considered for more accurateadjustments in different electrophoresis conditions.Quality ControlUnder suggested conditions, GF6619 GeneFist? 3-color High Range Protein Marker resolves 12 majorbands in SDS-PAGE (Tris-Glycine, MOPS, and MESbuffer) and after Western blotting transfer to anitrocellulose membrane.Other informationGENEFIST Technology, Inc. claims all warranties withrespect to this document, expressed or implied,including but not limited to those of merchantabilityor fitness for a particular purpose. In no event shallGENEFIST Technology, Inc. be liable, whether incontract, tort, warranty, or under any statute or anyother basis for special, incidental, indirect, punitive,multiple or consequential damages in connection withor arising from this document, including but notlimited to the use thereof.Caution: Not intended for human or animal diagnostic or therapeuticuses.Related ProductsGF6150 GeneFist All Blue Regular Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6160 GeneFist All Blue Regular Range PlusProtein Marker, 250 μl × 2GF6170 GeneFist All Blue Broad Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6240 GeneFist Pink Blue Protein Marker, 250 μl × 2GF6616 GeneFist 3-color Regular Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6619 GeneFist 3-color High Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6261 GeneFist Enhanced 3-color High RangeProtein Marker, 250 μl × 2GF6270 GeneFist 3-color Broad Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6280 GeneFist 3-color Extra Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6500 GeneFist 3-color Pre-stained Protein Ladder,Regular Range, 250 μl × 2GF6510 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, High Range, 250 μl × 2GF6520 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, Broad Range, 250 μl × 2GF2100 GeneFist Protein Fluorescent Staining Dye(Red, 1,000X), 1 mlGF5110 GeneFist 50 bp DNA Ladder, 500 μlGF5220 GeneFist 100 bp DNA Ladder II, 500 μlGF5310 GeneFist 1 KB (0.25-10 kb) DNA Ladder,500 μlGF5510 GeneFist Super Range DNA Ladder, (50 bp-25 kb), 500 μlGF3010 GeneFist Blue Light LED epi-illuminator,AC 100-240V, 50/60HzGF1100 GeneFist Western Marker I, 250 μlGeneFist Western Marker IFor research use only
Product Information GeneFist ? series3-color Regular Range Protein Marker(9-180 kDa)GF6616Size:250 μl x 15 μl per well for 100 applicationsStorage4°C for 3 months-20°C for 24 monthsLoading Volume? 3 μl or 5 μl per loading for clear visualizationduring electrophoresis on a 15-well or 10-wellmini-gel.? 1.5~2.5 μl per well for general Western blottingtransfer.? Apply more for a thicker (> 1.5 mm) or larger gel.DescriptionThe GF6616 GeneFist? 3-color Regular RangeProtein Marker is a ready to use three-color proteinstandard with 10 pre-stained proteins covering a widerange of molecular weights from 10 to 180 kDa (9 to170 kDa in Bis-Tris (MOPS) buffer and 10 to 170 kDain Bis-Tris (MES) buffer). Proteins are covalentlycoupled with a blue chromophore except for tworeference bands (one green and one red band at 25kDa and 75 kDa respectively) when separated on SDSPAGE (Tris-Glycine buffer).The GF6616 GeneFist? 3-color Regular RangeProtein Marker is designed for monitoring proteinseparation during SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, verification of Western transfer efficiencyon membranes, (PVDF, nylon, or nitrocellulose) andfor approximating the size of proteins.The marker is supplied in gel loading buffer and isready to use. Do NOT heat, dilute, or add reducingagents before loading.ContentsApproximately 0.1~0.4 mg/ml of each protein in thebuffer (20 mM Tris-phosphate (pH 7.5 at 25°C), 2 %SDS, 0.2 mM Dithiothreitol, 3.6 M Urea, and 15 % (v/v)Glycerol).Guide for Molecular Weight EstimationMigration patterns and approximate MWs (kDa) ofGF6616 GeneFist? 3-color Regular Range ProteinMarker in different electrophoresis conditions arelisted below:BandColorTRISGLYCINEBIS-TRIS(MOPS)BIS-TRIS(MES)1Blue1801701702Blue1401301303Blue10093934Red7570725Blue6053536Blue4541427Blue3530308Green2522239Blue15141410Blue109103-color Regular Range Protein MarkerNote. The apparent molecular weight (kDa) of each protein has beendetermined by calibration against an unstained protein standard;supplemental data should be considered for more accurateadjustments in different electrophoresis conditions.Quality ControlUnder suggested conditions, GF6616 GeneFist?3-color Regular Range Protein Marker resolves 10major bands in SDS-PAGE (Tris-Glycine, MOPS, andMES buffer) and after Western blotting transfer to anitrocellulose membrane.Other informationGENEFIST Technology, Inc. claims all warranties withrespect to this document, expressed or implied,including but not limited to those of merchantabilityor fitness for a particular purpose. In no event shallGENEFIST Technology, Inc. be liable, whether incontract, tort, warranty, or under any statute or anyother basis for special, incidental, indirect, punitive,multiple or consequential damages in connection withor arising from this document, including but notlimited to the use thereof.Caution: Not intended for human or animal diagnostic or therapeuticuses.Related ProductsGF6150 GeneFist All Blue Regular Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6160 GeneFist All Blue Regular Range PlusProtein Marker, 250 μl × 2GF6170 GeneFist All Blue Broad Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6240 GeneFist Pink Blue Protein Marker, 250 μl × 2GF6616 GeneFist Enhanced 3-color Regular RangeProtein Marker, 250 μl × 2GF6619 GeneFist 3-color High Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6261 GeneFist Enhanced 3-color High RangeProtein Marker, 250 μl × 2GF6270 GeneFist 3-color Broad Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6280 GeneFist 3-color Extra Range ProteinMarker, 250 μl × 2GF6500 GeneFist 3-color Pre-stained Protein Ladder,Regular Range, 250 μl × 2GF6510 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, High Range, 250 μl × 2GF6520 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, Broad Range, 250 μl × 2GF2100 GeneFist Protein Fluorescent Staining Dye(Red, 1,000X), 1 mlGF5110 GeneFist 50 bp DNA Ladder, 500 μlGF5220 GeneFist 100 bp DNA Ladder II, 500 μlGF5310 GeneFist 1 KB (0.25-10 kb) DNA Ladder,500 μlGF5510 GeneFist Super Range DNA Ladder, (50 bp-25 kb), 500 μlGF3010 GeneFist Blue Light LED epi-illuminator,AC 100-240V, 50/60HzGF1100 GeneFist Western Marker I, 250 μlGeneFist Western Marker IFor research use only