廣州億濤生物科技公司(ECOTOP SCIENTIFIC(Guangzhou) BIOTECHNOLOGY),由中山大學生命科學領(lǐng)域?qū)I(yè)人士和業(yè)內(nèi)專業(yè)營銷人才共同組建成立?!俺掷m(xù)改善動物及人類健康”是公司的愿景,自成立以來一直潛心研究、注重細節(jié),專注于打造高品質(zhì)、標準化的生物相關(guān)產(chǎn)品。目前,ECOTOP SCIENTIFIC產(chǎn)品線涵蓋了分子生物學、細胞生物學、免疫學等領(lǐng)域,涉及NGS伴隨診斷行業(yè)、畜牧行業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、高校科研等行業(yè)。
20×PBS緩沖液(非無菌)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8008N 20×PBS buffer(pH7.2-7.4) (Non-Sterile,without Ca2+,Mg2+) 500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存,有效期1年 【概述】 PBS(phosphate buffered solution)即磷酸鹽緩沖液,能夠提供相對穩(wěn)定的子環(huán)境和pH緩沖能力,是生物學中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液,pH為7.2-7.4,與人體血液等滲,主要成分為磷酸二氫鉀、氯化鉀、磷酸氫二鈉以及氯化鈉. 本產(chǎn)品為20×母液,未經(jīng)過除菌處理。 4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不用建議低溫保存。 【使用建議】 請將20×PBS溶液稀釋成1×使用,如50ml 10×PBS溶液加入950ml ddH2O稀釋。 【注意事項】 1. PBS溶液在低溫情況下可能會產(chǎn)生沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生,請置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
10×PBS緩沖液(非無菌)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8007N 10×PBS buffer(pH7.2-7.4) (Non-Sterile,without Ca2+,Mg2+) 500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存,有效期1年 【概述】 PBS(phosphate buffered solution)即磷酸鹽緩沖液,能夠提供相對穩(wěn)定的子環(huán)境和pH緩沖能力,是生物學中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液,pH為7.2-7.4,與人體血液等滲,主要成分為磷酸二氫鉀、氯化鉀、磷酸氫二鈉以及氯化鈉. 本產(chǎn)品為10×母液,未經(jīng)過除菌處理。 4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不用建議低溫保存。 【使用建議】 請將10×PBS溶液稀釋成1×使用,如100ml 10×PBS溶液加入900ml ddH2O稀釋。 【注意事項】 1. PBS溶液在低溫情況下可能會產(chǎn)生沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生,請置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
1×PBS緩沖液(非無菌)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8006N 1×PBS buffer(pH7.2-7.4) (Non-Sterile,without Ca2+,Mg2+) 500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存,有效期1年 【概述】 PBS(phosphate buffered solution)即磷酸鹽緩沖液,能夠提供相對穩(wěn)定的離子環(huán)境和pH緩沖能力,是生物學中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液,pH為7.2-7.4,與人體血液等滲,主要成分為磷酸二氫鉀、氯化鉀、磷酸氫二鈉以及氯化鈉. 本產(chǎn)品為1×工作液,未經(jīng)過除菌處理。 4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不用建議低溫保存。 【注意事項】 1. PBS溶液在低溫情況下可能會產(chǎn)生沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生,請置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
1×PBS緩沖液干粉(0.01M)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8004 1×PBS powder (without ca2+,Mg2+) 0.01M 10包 2L/包 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存,有效期2年 【概述】 PBS(phosphate buffered solution)即磷酸鹽緩沖液,能夠提供相對穩(wěn)定的離子環(huán)境和pH緩沖能力,是生物學中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液。pH為7.2-7.4,主要成分為磷酸二氫鉀、氯化鉀、磷酸氫二鈉以及氯化鈉,常用于分子克隆及免疫組化等實驗,本產(chǎn)品為PBS磷酸鹽干粉,使用時用蒸餾水或去離子水溶解,定容至2L。4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不用建議低溫保存。 【使用建議】 本產(chǎn)品為PBS磷酸鹽干粉,使用時用蒸餾水或去離子水溶解,定容至2L。 如需用于無菌操作,建議高溫高壓或過濾除菌使用。 【注意事項】 1. PBS溶液在低溫情況下可能會產(chǎn)生沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生,請置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
1×PBS緩沖液干粉(0.01M)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8004 1×PBS powder (without ca2+,Mg2+) 0.01M 1包 2L/包 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存,有效期2年 【概述】 PBS(phosphate buffered solution)即磷酸鹽緩沖液,能夠提供相對穩(wěn)定的離子環(huán)境和pH緩沖能力,是生物學中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液。pH為7.2-7.4,主要成分為磷酸二氫鉀、氯化鉀、磷酸氫二鈉以及氯化鈉,常用于分子克隆及免疫組化等實驗,本產(chǎn)品為PBS磷酸鹽干粉,使用時用蒸餾水或去離子水溶解,定容至2L。4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不用建議低溫保存。 【使用建議】 本產(chǎn)品為PBS磷酸鹽干粉,使用時用蒸餾水或去離子水溶解,定容至2L。 如需用于無菌操作,建議高溫高壓或過濾除菌使用。 【注意事項】 1. PBS溶液在低溫情況下可能會產(chǎn)生沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生,請置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
GO3000 HiTrans Reagent【保存條件】-20oC 保存 2 年【概述】1. Ecotop 品牌高效轉(zhuǎn)染試劑(GO3000 HiTrans Reagent),適用于真核哺乳動物細胞轉(zhuǎn)染,有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高等特點。2. 適用于:293T/293A/HEK293/CHO/Hela 等哺乳動物細胞,轉(zhuǎn)染效率可高達 90%以上。通常 293 細胞轉(zhuǎn)染效率可以高達 90%以上。大多數(shù)常見的細胞例如 Hela 細胞、CHO 細胞等也都適合用該試劑轉(zhuǎn)染,但效率比 293 細胞要略低一些。3. 應(yīng)用:細胞瞬時轉(zhuǎn)染、慢病毒包裝、腺病毒包裝、AAV 病毒包裝、逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝4. 本試劑經(jīng)過 0.22μm 過濾器除菌處理,可直接使用。【操作方法】1. 對于貼壁細胞(以下均以 6 孔板為例,其它培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板請根據(jù)相應(yīng)面積換算):a. 將細胞培養(yǎng)于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板內(nèi),通常在鋪板后 1-2 天內(nèi)長到 70-90%。b. 在轉(zhuǎn)染前 1-2 小時,吸去細胞培養(yǎng)液,更換為新鮮的不含抗生素的完全培養(yǎng)液 2ml。c. 取 2-4μg 待轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒 DNA (質(zhì)??傮w積不宜超過 20μl,若有多種質(zhì)粒請混勻),以質(zhì)量體積比 1:3 加入轉(zhuǎn)染試劑 6~12μl(如 2μg 待轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒 DNA 加入轉(zhuǎn)染試劑 6μl)。d. 混勻后,室溫孵育 3-5 分鐘。e. 把 DNA-轉(zhuǎn)染試劑混合物中加入 500μl opti-MEM(若無 opti-MEM 可使用無血清無雙抗的 DMEM 或 1640,具體根據(jù)轉(zhuǎn)染細胞使用的培養(yǎng)基),充分混勻后靜置 10-15 分鐘。f. 后均勻滴加到整個 6 孔板內(nèi)(加入前吸出原培養(yǎng)板中 500μl 培養(yǎng)基),并置于含 5%二氧化碳的 37oC 細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。g. 在轉(zhuǎn)染后 4-6 小時左右換液,更換為 2ml 新鮮的完全培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。h. 通常在轉(zhuǎn)染約 24-48 小時后就可以檢測到轉(zhuǎn)染基因的表達。2. 對于懸浮細胞:www.ecotopbio.coma. 離心收集懸浮細胞,用 PBS 洗滌一次。b. 按照上面的步驟 c)、d)、e)制備 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM 混合物。c. 每 106 個細胞的沉淀,用 500 微升 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM 混合物重新懸浮,室溫放置 15-20 分鐘。d. 在一個 6 孔板孔內(nèi)加入 1.5ml 完全培養(yǎng)液,然后加入來自上一步的細胞-500 微升 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM混合物,混勻。e. 在含 5%二氧化碳的 37oC 細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。f. 根據(jù)實驗要求和轉(zhuǎn)染試劑對于不同細胞的毒性不同,在 4-6 小時后離心收集細胞,用 PBS 洗一次,然后用 2 毫升完全培養(yǎng) 液重新懸浮細胞,繼續(xù)培養(yǎng)。g. 通常在轉(zhuǎn)染約 24-48 小時后就可以檢測到轉(zhuǎn)染基因的表達。
核酸清除劑使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 EX-0415 Nucleic Acid Clean Solution 500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 常溫保存9-12個月,2-8℃存儲時間更長 【概述】 Nucleic Acid Clean Solution 可以使用在實驗室的所有地方,可用于清除 DNA 及 RNA 等核酸分子,且對實驗室其他類型的儀器表面也進行了腐蝕性檢測,不會對塑料、橡膠等的表面產(chǎn)生任何損傷。 【使用說明】 1. 在工作臺、儀器、塑料、玻璃容器、PCR管、移液器等需要清潔的表面噴灑核酸清除劑,而后用吸水紙擦勻。 2. 靜置 5-10min后,用無菌水潤洗表面,然后用干凈的吸水紙擦干(可酌情多潤洗幾次)。 【注意事項】 1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 2. 本產(chǎn)品僅用于科研,不適用于臨床及其它醫(yī)學檢測
PMSF Solution(100mM)100mM苯甲基磺酰氟溶液使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8134 PMSF Solution,100mM 1ml/10ml/100ml 使用說明書 1份 【保存條件】 -20℃避光密封存儲,有效期1年 【概述】 PMSF是絲氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶抑制劑,常做為蛋白酶抑制劑使用。在純化過程中,為了防止細菌本身的蛋白酶降解待純化的目的蛋白,通常在破碎菌體,上柱的過程中會加PMSF。PMSF可抑制多種蛋白酶活性,為防止蛋白降解,提高得率,一般都要加。本產(chǎn)為保證PMSF活性,將其溶于異丙醇中保存。 【使用建議】 1. PMSF溶液工作濃度為17~174μg/ml(0.1~1mM)。 2. PMSF溶液在水溶液中不穩(wěn)定,30分鐘就會降解一半,必須在每一個分離和純化步驟中加入新鮮的PMSF,樣品處理超過1h應(yīng)補加一次。 【注意事項】 1. PMSF-20℃保存可能會有結(jié)晶析出,這是正常的,等到溫度稍高混勻就可以了。 2. PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一定要注意防護,手套和口罩。 3.一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。 4.PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。
1.5M Tris-HCl溶液 pH8.8使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8050 1.5M Tris-HCl Buffer,pH8.8 100/500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存,有效期1年 【概述】 Tris-HCl緩沖液用途廣泛,常見于各種分子生物學實驗或相關(guān)試劑配制。該產(chǎn)品在25℃時pH為8.8。 【注意事項】 1. 僅限于科研使用,不可用于各種食品藥品或臨床治療中。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 3. 溫度變化對Tris-HCl緩沖液影響較大,溫度每升高1℃,pH值降低約0.03,反之同理。
DAPI Solution,10μg/ml【保存條件】 -20℃避光保存,有效期 1 年。 【進口原料】 ROCHE REF10236276001, LOT35273022(不同批次產(chǎn)品原料批次會有更新) 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽)是一種能夠與 DNA 中大部分 A、T 堿基相互結(jié)合的熒光染料,常用于熒光顯微鏡觀測。因為 DAPI 可以透過完整的細胞膜,它可以用于活細胞和固定細胞的染色。當 DAPI 與雙鏈 DNA 結(jié)合時,最大吸收波長為 358nm,最大發(fā)射波長為 461nm。DAPI 的發(fā)射光為藍色,且 DAPI 和綠色熒光蛋白 GFP 或 Texas Red 染劑(紅色熒光染劑)的發(fā)射波長僅有少部分重疊,可以利用這項特性在單一的樣品上進行多重熒光染色。本產(chǎn)品母液為 DMF 溶解,后以 PBS 稀釋為 DAPI-PBS 溶液,濃度為 10μg/ml。經(jīng)過濾處理,為即用型工作液,可直接用于固定細胞或組織樣品的細胞核染色。 【使用方法(僅供參考)】 1. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進行 DAPI 染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續(xù)的 DAPI 染色。 2. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量 DAPI 染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液,混勻。 3. 室溫放置 5-10 分鐘。 4. 吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次,每次 3-5 分鐘。 5. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。 【注意事項】 1. DAPI 被普遍認為具有致癌性,操作時應(yīng)戴手套,并避免交叉污染。 2. 本產(chǎn)品需避光,并盡量避免反復凍融。 3. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
20×TBST緩沖液pH7.5使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8033 20×Tris Buffered Saline with Tween 20 (TBST)buffer,pH7.5 500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 4℃保存,有效期1年 【概述】 TBST緩沖液是生物學中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用于Western Blot實驗中洗去膜上非特異性結(jié)合的抗體等試劑。由Tris-HCl構(gòu)成穩(wěn)定的pH緩沖體系,NaCl提供等滲條件,Tween-20作為去污劑可增加緩沖液的洗脫能力。 本產(chǎn)品為20×濃縮液,需要稀釋成1×工作液后使用,用后請及時擰緊瓶蓋,以防揮發(fā)。4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不用建議低溫保存。 【使用建議】 請將20×TBST緩沖液稀釋成1×使用,如50ml 10×TBST緩沖液加入950ml ddH2O稀釋。 【注意事項】 1. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 2. 若低溫儲存時產(chǎn)品出現(xiàn)結(jié)晶析出,請置于37℃水浴至完全溶解。 3. 用后請及時擰緊瓶蓋,以防揮發(fā)。
1×PBS緩沖液(無菌)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8006 1×PBS buffer(pH7.2-7.4) (Sterile,without Ca2+,Mg2+) 250ml 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存,有效期1年 【概述】 PBS(phosphate buffered solution)即磷酸鹽緩沖液,能夠提供相對穩(wěn)定的離子環(huán)境和pH緩沖能力,是生物學中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液,用于分子克隆及細胞培養(yǎng)等,pH為7.2-7.4,與人體血液等滲,主要成分為磷酸二氫鉀、氯化鉀、磷酸氫二鈉以及氯化鈉. 本產(chǎn)品為1×工作液,經(jīng)過除菌處理,可直接使用。 4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不用建議低溫保存。 【注意事項】 1. PBS溶液在低溫情況下可能會產(chǎn)生沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生,請置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2. PBS溶液在使用過程中應(yīng)該避免微生物污染。 3. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4%組織細胞固定液使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8100 4% Tissue Fixer (4% PFA) 100m/500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 -20℃避光保存,有效期1年;4℃避光儲存,有效期3個月。 【概述】 固定液可使細胞或組織的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。對免疫組化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或彌散。固定液種類很多,常見的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。 多聚甲醛固定液是一種廣泛用于免疫組化(IHC)、免疫熒光( IF)、免疫細胞化學(IC)、流式分析(FACS)等檢測時組織、組織切片、細胞等生物樣品固定的溶液。 本產(chǎn)品為4% 多聚甲醛PBS溶液(4% PFA),主要由多聚甲醛、磷酸鹽、去離子水組成,該固定液適合于絕大多數(shù)組織和細胞的固定,是免疫組織化學和培養(yǎng)細胞的固定液之一,它能較好的保護組織和細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及核酸。其固定效果好、應(yīng)用廣,適用于各種常見細胞或組織的固定,對皮膚、肌肉、內(nèi)臟等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白質(zhì),無法固定尿酸和糖類等。 若需使用低濃度多聚甲醛,可使用PBS按比例稀釋。 【使用建議】 對于細胞樣品,去除培養(yǎng)液后,按照每六孔板一個孔加入1毫升固定液的比例,加入4%多聚甲醛固定液。對于細胞涂片等其它細胞樣品,加入固定液的量以充分蓋住樣品為準。通常室溫固定10-20分鐘即可,但固定較長時間,例如1-2小時也是可以的。后續(xù)需使用適當?shù)南礈煲撼浞窒礈煲匀コ龤埩舻亩嗑奂兹?對于組織切片,加入4% 多聚甲醛固定液量以充分覆蓋切片為準,或使用染色架進行固定。通常室溫固定10-20分鐘即可完成固定,但切片較厚時可以固定較長時間,例如1-2小時。后續(xù)需使用適當?shù)南礈煲撼浞窒礈煲匀コ龤埩舻亩嗑奂兹?對于組織塊樣品,浸泡入4% 多聚甲醛固定液中,室溫或4℃浸泡固定2到24小時。建議不超過8小時,除非組織塊特別大,難以滲透。固定完成后,放入裝有蒸餾水的離心管中清洗,每15-30分鐘換一次水,共6-8次,建議在搖床進行,或用流水沖洗1-2小時。隨后梯度脫水,進行包埋。如果暫時不包埋可放入70-75%的酒精中保存。 如將組織樣品置于4% 多聚甲醛固定液中浸泡儲存,請避光放置。 【注意事項】 1. 僅限于科研使用,不可用于各種食品藥品或臨床治療中。 2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 3. 本產(chǎn)品放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。 4. 不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。 5. 多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。 6. 多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,固定完成后用適當?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留,因此后續(xù)實驗結(jié)果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。 7. 多聚甲醛固定液固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。 8. 醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
RNA extraction auxiliary reagent (chloroform substitute)RNA提取輔助試劑100ml(氯仿替代物),可有效避免氯防購買不到的煩惱可以代替氯仿使用,并且毒性較小。在單步 TRI 試劑方法中使用可以減少 DNA 污染 RNA 的可能性,本品 不會對分離的 RNA 的質(zhì)量或數(shù)量產(chǎn)生不利影響。 【操作方法】 1. 請按每使用 1ml TRI 試劑(Trizol 試劑或 RNAEx ZOL 總 RNA 提取試劑)加入 200μl 比例來使用(等同 RNA 提取中氯仿的使用)。 【注意事項】 1. 如果每次的使用量很小,可以適當分裝后再使用,以免污染。 2. RNAEx ZOL 總 RNA 提取試劑(貨號:EK-5301)可在 ECOTOP 各平臺咨詢購買。 3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
RIPA裂解液(高強度)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8148 RIPA裂解液(高強度) 100ml 使用說明書 1份 【保存條件】 -20℃保存,有效期1年,頻繁使用可放置4℃保存。 【概述】 RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP和ELISA等。 RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種,根據(jù)其裂解液的強度大致可以分為高強度、中強度、低強度三類。請根據(jù)不同需求選擇不同強度RIPA裂解液。 【使用建議】 如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。根據(jù)使用量,取每1ml RIPA加入10ul PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM?;靹騻溆茫≒MSF現(xiàn)用現(xiàn)加)。 1. 樣品前處理: a) 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。 b) 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。 c) 對于組織樣品:把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。 2. 后處理:將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。 【注意事項】 1. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 2. 本產(chǎn)品長時間低溫存放可能會出現(xiàn)沉淀,可在37oC水浴約10分鐘以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 為保證最佳的使用效果,請盡量避免過多的反復凍融,可分裝后使用。 4. 裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。 5. RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗;如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如NF-kappaB、p53等時,通常不必進行超聲處理,就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。 6. 該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。