【保存條件】
-20℃避光保存,有效期 1 年。
【進口原料】
ROCHE REF10236276001, LOT35273022(不同批次產品原料批次會有更新)
【概述】
DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽)是一種能夠與 DNA 中大部分 A、T 堿基相互結 合的熒光染料,常用于熒光顯微鏡觀測。因為 DAPI 可以透過完整的細胞膜,它可以用于活 細胞和固定細胞的染色。當 DAPI 與雙鏈 DNA 結合時,最大吸收波長為 358nm,最大發射 波長為 461nm。DAPI 的發射光為藍色,且 DAPI 和綠色熒光蛋白 GFP 或 Texas Red 染劑(紅 色熒光染劑)的發射波長僅有少部分重疊,可以利用這項特性在單一的樣品上進行多重熒光 染色。本產品母液為 DMF 溶解,后以 PBS 稀釋為 DAPI-PBS 溶液,濃度為 10μg/ml。經過 濾處理,為即用型工作液,可直接用于固定細胞或組織樣品的細胞核染色。
【使用方法(僅供參考)】
1. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色, 則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行 DAPI 染色。如果不需要進行其它染 色,則直接進行后續的 DAPI 染色。
2. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量 DAPI 染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至 少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液,混勻。
3. 室溫放置 5-10 分鐘。
4. 吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次,每次 3-5 分鐘。
5. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細 胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
【注意事項】
1. DAPI 被普遍認為具有致癌性,操作時應戴手套,并避免交叉污染。
2. 本產品需避光,并盡量避免反復凍融。
3. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
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