2.5% Glutaraldehyde 【保存條件】 4℃長(zhǎng)期保存,短期室溫保存 【概述】 Glutaraldehyde 溶液常用于樣本固定,固定速度快,對(duì)細(xì)胞核、細(xì)胞漿的細(xì)微結(jié)構(gòu)固定效果好,經(jīng)常用 于電鏡標(biāo)本的固定。固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自 身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。固定劑通過(guò)凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā) 生改變,從而使酶失活。固定劑對(duì)細(xì)胞核細(xì)胞外成分發(fā)生物理改變。固定液主要分為醛類固定液、汞類固 定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的 乙醇。 【操作方法】 1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求操作。 2. 取新鮮標(biāo)本,立即入 Glutaraldehyde 溶液 4℃固定 1~4h,稍大標(biāo)本應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)固定時(shí)間。 3. 送檢或 4℃保存。 【注意事項(xiàng)】 1. 組織取材的厚度不同,固定時(shí)間也不同。常規(guī)活檢組織比較適合的厚度為 2~4mm,一般不超過(guò) 6mm。 對(duì)組織恰當(dāng)?shù)倪x材有利于固定液的滲透。 2. 固定液的容量應(yīng)足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應(yīng)大于 10:1。如果容積不夠大,可以在固定期 間更換 1~3 次固定液。 3. 溫度對(duì)固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但本固定液最好不要提高溫度。 4. 取出新鮮組織后,應(yīng)及時(shí)固定。無(wú)法及時(shí)固定時(shí),應(yīng)保存于生理鹽水中及時(shí)送檢。 5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
EM Fixative Solution【保存條件】4℃避光保存,有效期 6 個(gè)月。【概述】固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自身組織和 細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。電鏡固定液(2%中性戊二醛-2%多聚甲醛混合)由戊二醛、多聚甲醛、磷酸鹽等組成,pH7.4,該固定液對(duì)細(xì)胞核、細(xì)胞漿的細(xì)微結(jié)構(gòu)固定效果好,經(jīng)常用于電鏡標(biāo)本的固定。【使用說(shuō)明(僅供參考)】1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求獲取新鮮標(biāo)本。2. 加入電鏡固定液于 4℃固定 1~4h,稍大標(biāo)本應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)固定時(shí)間。3. 送檢或 4℃保存。【注意事項(xiàng)】1. 電鏡固定液有一定腐蝕性,請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)較好的環(huán)境下小心操作, 避免吸入。2. 組織取材的厚度不同,固定時(shí)間也不同。常規(guī)活檢組織比較適合的厚度為 2~4mm,一般不超過(guò) 6mm。對(duì)組織恰當(dāng)?shù)倪x材有利于固定液的滲透。3. 固定液的使用應(yīng)足量,一般固定液與組織塊的體積比率應(yīng)大于 10:1。如果固定液的使用量不夠大,可以在固定期間更換 1~3 次固定液。4. 溫度對(duì)固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但本固定液最好不要提高溫度。5. 為保證實(shí)驗(yàn)效果,取出新鮮組織后應(yīng)及時(shí)固定。6. 為了您的安全與健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
EM Fixative Solution【保存條件】 4℃避光保存,有效期 6 個(gè)月。 【概述】 固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自身組織和 細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。電鏡固定液(2%中性戊二醛-2%多聚甲醛混合)由戊二醛、多聚甲醛、磷酸鹽等組成,pH7.4,該固定液對(duì)細(xì)胞核、細(xì)胞漿的細(xì)微結(jié)構(gòu)固定效果好,經(jīng)常用于電鏡標(biāo)本的固定。 【使用說(shuō)明(僅供參考)】 1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求獲取新鮮標(biāo)本。 2. 加入電鏡固定液于 4℃固定 1~4h,稍大標(biāo)本應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)固定時(shí)間。 3. 送檢或 4℃保存。 【注意事項(xiàng)】 1. 電鏡固定液有一定腐蝕性,請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)較好的環(huán)境下小心操作, 避免吸入。 2. 組織取材的厚度不同,固定時(shí)間也不同。常規(guī)活檢組織比較適合的厚度為 2~4mm,一般不超過(guò) 6mm。對(duì)組織恰當(dāng)?shù)倪x材有利于固定液的滲透。 3. 固定液的使用應(yīng)足量,一般固定液與組織塊的體積比率應(yīng)大于 10:1。如果固定液的使用量不夠大,可以在固定期間更換 1~3 次固定液。 4. 溫度對(duì)固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但本固定液最好不要提高溫度。 5. 為保證實(shí)驗(yàn)效果,取出新鮮組織后應(yīng)及時(shí)固定。 6. 為了您的安全與健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Annealing buffer, 10×【保存條件】 -20 ℃保存,有效期 12 個(gè)月 【概述】 本品適用于小片段(5-500bp)單鏈 DNA 的雜交反應(yīng),獲得更優(yōu)質(zhì)的雜交雙鏈 DNA 片段,如 shRNA、 gRNA載體等構(gòu)建。 【操作方法】 I.體系配制(如下 20 μl 體系為例) II. 退火條件 A. 水浴鍋或 Heat Block 1.在微管中混合等體積的等摩爾寡核苷酸。 2.將微管在 95°C 下孵育 5 分鐘。 3.讓微管緩慢冷卻至室溫(注:若水浴等水溫升至最高后加入,勿中途取出)。 B. PCR(熱循環(huán))儀(可選擇簡(jiǎn)易步驟或進(jìn)階步驟的其中一種使用) 【注意事項(xiàng)】1. 如果每次的使用量很小,可以適當(dāng)分裝后再使用,以免污染。2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Annealing buffer, 10× 【保存條件】 -20 ℃保存,有效期 12 個(gè)月 【概述】 本品適用于小片段(5-500bp)單鏈 DNA 的雜交反應(yīng),獲得更優(yōu)質(zhì)的雜交雙鏈 DNA 片段,如 shRNA、 gRNA載體等構(gòu)建。 【操作方法】 I.體系配制(如下 20 μl 體系為例) II. 退火條件 A. 水浴鍋或 Heat Block 1.在微管中混合等體積的等摩爾寡核苷酸。 2.將微管在 95°C 下孵育 5 分鐘。 3.讓微管緩慢冷卻至室溫(注:若水浴等水溫升至最高后加入,勿中途取出)。 B. PCR(熱循環(huán))儀(可選擇簡(jiǎn)易步驟或進(jìn)階步驟的其中一種使用) 【注意事項(xiàng)】1. 如果每次的使用量很小,可以適當(dāng)分裝后再使用,以免污染。2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。