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產(chǎn)品描述一步定向克隆試劑盒是一款簡單、快速、高效的多片段DNA定向克隆產(chǎn)品,可以不依賴于連接酶,不受載體和目的片段的酶切位點(diǎn)限制,直接用同源重組的方法將PCR產(chǎn)物定向克隆至任意載體的任意位點(diǎn),完成目的片段與載體相連接的基因克隆技術(shù)。該技術(shù)操作簡單,PCR產(chǎn)物一步定向克隆,目的片段與載體無縫連接,反應(yīng)時(shí)間短至10分鐘,陽性率達(dá)到95%以上,讓您輕松完成實(shí)驗(yàn)。保存條件收到后請立即低速離心保存在-20℃;此Kit可在-20℃長期保存,避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品描述一步定向克隆試劑盒是一款簡單、快速、高效的多片段DNA定向克隆產(chǎn)品,可以不依賴于連接酶,不受載體和目的片段的酶切位點(diǎn)限制,直接用同源重組的方法將PCR產(chǎn)物定向克隆至任意載體的任意位點(diǎn),完成目的片段與載體相連接的基因克隆技術(shù)。該技術(shù)操作簡單,PCR產(chǎn)物一步定向克隆,目的片段與載體無縫連接,反應(yīng)時(shí)間短至10分鐘,陽性率達(dá)到95%以上,讓您輕松完成實(shí)驗(yàn)。保存條件收到后請立即低速離心保存在-20℃;此Kit可在-20℃長期保存,避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品描述第一鏈cDNA合成預(yù)混液是以mRNA或者總RNA為模板,高效合成第一鏈cDNA。本產(chǎn)品含有反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的全部試劑(NovoScript? II Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,Oligo(dT)18,Random N6,dNTPs)。反應(yīng)時(shí)只需要加入RNA模板和水即可,操作簡單,降低操作過程中的污染。制品中含有去基因組成分gDNA Purge,以RNA為模板進(jìn)行cDNA第一鏈合成時(shí),可以同步去除基因組DNA污染,反應(yīng)結(jié)束后,75℃加熱5分鐘,就可以失活反轉(zhuǎn)錄酶,RNA酶抑制劑。合成的第一鏈cDNA能直接用于PCR或熒光定量PCR的模板,第二鏈cDNA的合成或線性RNA擴(kuò)增,也可用于需要用帶有放射性或非放射性核苷酸標(biāo)記第一鏈cDNA的實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn)1)本制品采用耐高溫逆轉(zhuǎn)錄酶,大幅提高熱穩(wěn)定性和cDNA合成效率;2)本制品中添加的NovoScript? II Reverse Transcriptase無RNase H活性,可避免第一鏈cDNA合成過程中,RNA/DNA雜交模板鏈中RNA降解,保證cDNA合成的質(zhì)量;3)本制品中Random N6和Oligo(dT)18引物比例經(jīng)過優(yōu)化,可均勻合成樣品中的cDNA;4)本制品中含有去基因組成分,逆轉(zhuǎn)錄時(shí)可同步去除基因組DNA污染。保存條件-20℃。注意事項(xiàng)1)用DEPC處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,或者購買已經(jīng)證明無核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,實(shí)驗(yàn)過程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免RNA酶的污染。2)確保所用試劑中無RNA酶污染。3)試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在逆轉(zhuǎn)錄過程中,所有管子要確保扣嚴(yán)。4)純化過的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和苯酚,以上成分會(huì)干擾第一鏈cDNA的合成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。5)為保證逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的RNA模板。6)當(dāng)模板含量較低或后續(xù)PCR擴(kuò)增片段過長時(shí)可以適當(dāng)延長逆轉(zhuǎn)錄時(shí)間。7)2×NovoScript? Plus 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix、gDNA Purge及2×NovoScript? Plus No RT Control含有甘油,使用前請充分混勻后并短暫離心收集至管底再進(jìn)行使用。僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。
產(chǎn)品描述第一鏈cDNA合成預(yù)混液是以mRNA或者總RNA為模板,高效合成第一鏈cDNA。本產(chǎn)品含有反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的全部試劑(NovoScript? II Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,Oligo(dT)18,Random N6,dNTPs)。反應(yīng)時(shí)只需要加入RNA模板和水即可,操作簡單,降低操作過程中的污染。制品中含有去基因組成分gDNA Purge,以RNA為模板進(jìn)行cDNA第一鏈合成時(shí),可以同步去除基因組DNA污染,反應(yīng)結(jié)束后,75℃加熱5分鐘,就可以失活反轉(zhuǎn)錄酶,RNA酶抑制劑。合成的第一鏈cDNA能直接用于PCR或熒光定量PCR的模板,第二鏈cDNA的合成或線性RNA擴(kuò)增,也可用于需要用帶有放射性或非放射性核苷酸標(biāo)記第一鏈cDNA的實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn)1)本制品采用耐高溫逆轉(zhuǎn)錄酶,大幅提高熱穩(wěn)定性和cDNA合成效率;2)本制品中添加的NovoScript? II Reverse Transcriptase無RNase H活性,可避免第一鏈cDNA合成過程中,RNA/DNA雜交模板鏈中RNA降解,保證cDNA合成的質(zhì)量;3)本制品中Random N6和Oligo(dT)18引物比例經(jīng)過優(yōu)化,可均勻合成樣品中的cDNA;4)本制品中含有去基因組成分,逆轉(zhuǎn)錄時(shí)可同步去除基因組DNA污染。保存條件-20℃。注意事項(xiàng)1)用DEPC處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,或者購買已經(jīng)證明無核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,實(shí)驗(yàn)過程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免RNA酶的污染。2)確保所用試劑中無RNA酶污染。3)試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在逆轉(zhuǎn)錄過程中,所有管子要確保扣嚴(yán)。4)純化過的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和苯酚,以上成分會(huì)干擾第一鏈cDNA的合成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。5)為保證逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的RNA模板。6)當(dāng)模板含量較低或后續(xù)PCR擴(kuò)增片段過長時(shí)可以適當(dāng)延長逆轉(zhuǎn)錄時(shí)間。7)2×NovoScript? Plus 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix、gDNA Purge及2×NovoScript? Plus No RT Control含有甘油,使用前請充分混勻后并短暫離心收集至管底再進(jìn)行使用。僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。
產(chǎn)品描述本制品是采用SYBR Green I嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。預(yù)混液中已經(jīng)將DNA聚合酶、精心優(yōu)化的反應(yīng)Buffer、dNTPs、SYBR Green I等試劑預(yù)混在一起,是一種2×濃度的預(yù)混型試劑,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),PCR反應(yīng)液的配制十分簡單方便。本制品使用新型抗體修飾的HotStart Taq DNA聚合酶,并結(jié)合精心優(yōu)化的反應(yīng)Buffer,具有更高的擴(kuò)增靈敏度,反應(yīng)特異性和擴(kuò)增效率,能夠在更寬廣的范圍內(nèi)進(jìn)行準(zhǔn)確定量。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度:Novoprotein精心配制的RealTime PCR專用2×SuperMix,具有更高的擴(kuò)增靈敏度和擴(kuò)增效率。高特異性:采用新型工藝制備抗體修飾的HotStart Taq DNA聚合酶,無需熱啟動(dòng)即可進(jìn)行PCR反應(yīng),大大提高PCR擴(kuò)增的特異性。快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。保存條件-20℃避光儲(chǔ)存。如需在一段時(shí)間內(nèi)經(jīng)常取用,可在2~8℃條件下儲(chǔ)存3個(gè)月。避免反復(fù)多次凍融。質(zhì)量控制純度檢測:所有組分經(jīng)檢測均無核酸內(nèi)切酶殘留、核酸外切酶殘留、核酸殘留。使用建議使用:請上下顛倒輕輕混合均勻,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。反應(yīng)液的配制、分裝請使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,避免污染。建議反應(yīng)體積為20~50μl。引物設(shè)計(jì):一般為了增加靈敏度及擴(kuò)增效率且抑制非特異性反應(yīng),擴(kuò)增目標(biāo)序列越短越好。建議設(shè)計(jì)成200bp以下。僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。
產(chǎn)品描述本制品是采用SYBR Green I嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。預(yù)混液中已經(jīng)將DNA聚合酶、精心優(yōu)化的反應(yīng)Buffer、dNTPs、SYBR Green I等試劑預(yù)混在一起,是一種2×濃度的預(yù)混型試劑,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),PCR反應(yīng)液的配制十分簡單方便。本制品使用新型抗體修飾的HotStart Taq DNA聚合酶,并結(jié)合精心優(yōu)化的反應(yīng)Buffer,具有更高的擴(kuò)增靈敏度,反應(yīng)特異性和擴(kuò)增效率,能夠在更寬廣的范圍內(nèi)進(jìn)行準(zhǔn)確定量。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度:Novoprotein精心配制的RealTime PCR專用2×SuperMix,具有更高的擴(kuò)增靈敏度和擴(kuò)增效率。高特異性:采用新型工藝制備抗體修飾的HotStart Taq DNA聚合酶,無需熱啟動(dòng)即可進(jìn)行PCR反應(yīng),大大提高PCR擴(kuò)增的特異性。快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。保存條件-20℃避光儲(chǔ)存。如需在一段時(shí)間內(nèi)經(jīng)常取用,可在2~8℃條件下儲(chǔ)存3個(gè)月。避免反復(fù)多次凍融。質(zhì)量控制純度檢測:所有組分經(jīng)檢測均無核酸內(nèi)切酶殘留、核酸外切酶殘留、核酸殘留。使用建議使用:請上下顛倒輕輕混合均勻,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。反應(yīng)液的配制、分裝請使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,避免污染。建議反應(yīng)體積為20~50μl。引物設(shè)計(jì):一般為了增加靈敏度及擴(kuò)增效率且抑制非特異性反應(yīng),擴(kuò)增目標(biāo)序列越短越好。建議設(shè)計(jì)成200bp以下。僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。
產(chǎn)品描述本制品是采用SYBR Green I嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。預(yù)混液中已經(jīng)將DNA聚合酶、精心優(yōu)化的反應(yīng)Buffer、dNTPs、SYBR Green I等試劑預(yù)混在一起,是一種2×濃度的預(yù)混型試劑,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),PCR反應(yīng)液的配制十分簡單方便。本制品使用新型抗體修飾的HotStart Taq DNA聚合酶,并結(jié)合精心優(yōu)化的反應(yīng)Buffer,從而有效抑制低溫下的非特異性擴(kuò)增,提高反應(yīng)特異性和擴(kuò)增效率,能夠在更寬廣的范圍內(nèi)進(jìn)行準(zhǔn)確定量。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性:采用新型工藝制備抗體修飾的HotStart Taq DNA聚合酶,無需熱啟動(dòng)即可進(jìn)行PCR反應(yīng),大大提高PCR擴(kuò)增的特異性。高效:Novoprotein精心配制的RealTime PCR專用2×SuperMix,具有更高的擴(kuò)增效率和擴(kuò)增靈敏度。快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。保存條件-20℃避光儲(chǔ)存。如需在一段時(shí)間內(nèi)經(jīng)常取用,可在2~8℃條件下儲(chǔ)存3個(gè)月。避免反復(fù)多次凍融。質(zhì)量控制純度檢測:所有組分經(jīng)檢測均無核酸內(nèi)切酶殘留、核酸外切酶殘留、核酸殘留。使用建議使用:請上下顛倒輕輕混合均勻,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。反應(yīng)液的配制、分裝請使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,避免污染。建議反應(yīng)體積為20~50μl。引物設(shè)計(jì):一般為了增加靈敏度及擴(kuò)增效率且抑制非特異性反應(yīng),擴(kuò)增目標(biāo)序列越短越好。建議設(shè)計(jì)成200bp以下。僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。
產(chǎn)品描述本制品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進(jìn)行快速 Real Time PCR 的 2×濃度預(yù)混型試劑,PCR 反應(yīng)液的配制十分簡單方便。本制品使用突變型 Taq DNA 聚合酶,結(jié)合精心優(yōu)化的反應(yīng) Buffer,可有效抑制低溫下的非特異性擴(kuò)增,實(shí)現(xiàn)快速 PCR 反應(yīng),并且能夠在寬廣的范圍內(nèi)對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確、快速、可重復(fù)的定量檢測。產(chǎn)品特點(diǎn)快速:實(shí)現(xiàn)快速熒光定量,相較于傳統(tǒng) qPCR,反應(yīng)時(shí)間減少 50%左右;保存條件-20℃避光儲(chǔ)存,避免反復(fù)凍融。使用建議使用:請上下顛倒輕輕混合均勻,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。反應(yīng)液的配制、分裝請使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,避免污染。建議反應(yīng)體積為20~50μl。僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。Novoprotein是蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司的注冊商標(biāo)。請?jiān)L問我們的注冊商標(biāo)頁面。其他商標(biāo)是其他所有者的財(cái)產(chǎn)。
產(chǎn)品描述本制品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進(jìn)行快速 Real Time PCR 的 2×濃度預(yù)混型試劑,PCR 反應(yīng)液的配制十分簡單方便。本制品使用突變型 Taq DNA 聚合酶,結(jié)合精心優(yōu)化的反應(yīng) Buffer,可有效抑制低溫下的非特異性擴(kuò)增,實(shí)現(xiàn)快速 PCR 反應(yīng),并且能夠在寬廣的范圍內(nèi)對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確、快速、可重復(fù)的定量檢測。產(chǎn)品特點(diǎn)快速:實(shí)現(xiàn)快速熒光定量,相較于傳統(tǒng) qPCR,反應(yīng)時(shí)間減少 50%左右;保存條件-20℃避光儲(chǔ)存,避免反復(fù)凍融。使用建議使用:請上下顛倒輕輕混合均勻,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。反應(yīng)液的配制、分裝請使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,避免污染。建議反應(yīng)體積為20~50μl。僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。Novoprotein是蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司的注冊商標(biāo)。請?jiān)L問我們的注冊商標(biāo)頁面。其他商標(biāo)是其他所有者的財(cái)產(chǎn)。
產(chǎn)品描述Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag?)是一種新興的DNA-蛋白質(zhì)互作研究方法。CUT&Tag? 以融合了protein A/G 的Tn5 轉(zhuǎn)座酶為核心,融合蛋白通過protein A/G 與抗體結(jié)合,使得Tn5 被栓系在靶位點(diǎn)周圍,從而在目的位點(diǎn)附近進(jìn)行酶切反應(yīng),并同時(shí)引入二代測序所必需的接頭序列,產(chǎn)物DNA 經(jīng)過后續(xù)提取與PCR 擴(kuò)增后,得到直接用于測序的文庫。CUT&Tag?與傳統(tǒng)的ChIP-Seq 技術(shù)相比較,實(shí)驗(yàn)不需要超聲打斷,也不需要傳統(tǒng)的連接法添加測序接頭,操作簡單、周期短、信噪比高、重復(fù)性好、細(xì)胞用量少,為極低起始細(xì)胞量和單細(xì)胞測序研究提供了可能性。自 2019 年 CUT&Tag 技術(shù)誕生以來,經(jīng)過大量的實(shí)踐,發(fā)現(xiàn)該技術(shù)在組蛋白修飾及部分轉(zhuǎn)錄因子與 DNA 互作研究中可以獲得高信噪比的結(jié)果,但是針對一些與 DNA 結(jié)合力較弱或者結(jié)合具有高度動(dòng)態(tài)性的 DNA 結(jié)合蛋白,較難得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。針對此問題,近岸蛋白開發(fā)了可對細(xì)胞進(jìn)行高濃度甲醛交聯(lián)的CUT&Tag實(shí)驗(yàn)流程。為轉(zhuǎn)錄因子 -DNA 互作研究提供一種新的思路,這種需要甲醛交聯(lián)的CUT&Tag實(shí)驗(yàn)被稱為fcCUT&Tag(formaldehyde crosslinking CUT&Tag)。NovoNGS? CUT&Tag? 4.0 High-Sensitivity Kit (for Illumina)試劑盒包含常規(guī)非交聯(lián)細(xì)胞CUT&Tag及甲醛交聯(lián)細(xì)胞fcCUT&Tag實(shí)驗(yàn)中所需的各種緩沖液、ConA磁珠、DNA純化磁珠、引物等全套建庫試劑,可以用于組蛋白修飾和轉(zhuǎn)錄因子的染色質(zhì)結(jié)合狀態(tài)研究。與傳統(tǒng)的CUT&Tag試劑盒相比,該試劑盒既可以對自然狀態(tài)的細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)-DNA互作研究,也可以對高濃度甲醛交聯(lián)的細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)-DNA互作研究,一盒兩用。試劑盒包含CUT&Tag? 實(shí)驗(yàn)中孵育抗體、轉(zhuǎn)座體、構(gòu)建文庫的相關(guān)試劑,可以用于組蛋白修飾和轉(zhuǎn)錄因子的染色質(zhì)結(jié)合狀態(tài)研究。本試劑盒包含高活性的ChiTag? pAG-Tn5, 相較于最初版本的pA-Tn5 轉(zhuǎn)座酶,pAG結(jié)構(gòu)域?qū)ν谩⑹蟮榷喾N來源抗體具有廣譜的強(qiáng)親和性,在實(shí)驗(yàn)抗體的選擇上具有更大的空間。針對CUT&Tag?打斷產(chǎn)物DNA 提取過程中小片段丟失的問題,本試劑盒提供優(yōu)化的Tagment DNA Extract Beads, 相較于常規(guī)的片段分選磁珠可以完整的回收CUT&Tag? 產(chǎn)物中的小片段DNA, 大大簡化了酚氯仿-乙醇沉淀法的繁瑣操作。此外,本試劑盒還提供了陽性抗體H3K4me3(兔抗)以及相應(yīng)的二抗(羊抗兔IgG) ,用于陽性對照實(shí)驗(yàn)(僅B 包裝提供陽性抗體)。圖1: DNA-Target Protein-Antibody-ChiTag?結(jié)合示意圖 圖2: CUT&Tag 實(shí)驗(yàn)流程簡圖 產(chǎn)品用途DNA-蛋白質(zhì)互作研究。在常見的哺乳動(dòng)物細(xì)胞上用于替代傳統(tǒng)的ChIP-Seq 技術(shù),特別適用于細(xì)胞數(shù)量較少的樣本,也可應(yīng)用于經(jīng)過處理的植物和酵母樣本上。保存條件詳見說明書僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。
產(chǎn)品描述Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag?)是一種新興的DNA-蛋白質(zhì)互作研究方法。CUT&Tag? 以融合了protein A/G 的Tn5 轉(zhuǎn)座酶為核心,融合蛋白通過protein A/G 與抗體結(jié)合,使得Tn5 被栓系在靶位點(diǎn)周圍,從而在目的位點(diǎn)附近進(jìn)行酶切反應(yīng),并同時(shí)引入二代測序所必需的接頭序列,產(chǎn)物DNA 經(jīng)過后續(xù)提取與PCR 擴(kuò)增后,得到直接用于測序的文庫。CUT&Tag?與傳統(tǒng)的ChIP-Seq 技術(shù)相比較,實(shí)驗(yàn)不需要超聲打斷,也不需要傳統(tǒng)的連接法添加測序接頭,操作簡單、周期短、信噪比高、重復(fù)性好、細(xì)胞用量少,為極低起始細(xì)胞量和單細(xì)胞測序研究提供了可能性。自 2019 年 CUT&Tag 技術(shù)誕生以來,經(jīng)過大量的實(shí)踐,發(fā)現(xiàn)該技術(shù)在組蛋白修飾及部分轉(zhuǎn)錄因子與 DNA 互作研究中可以獲得高信噪比的結(jié)果,但是針對一些與 DNA 結(jié)合力較弱或者結(jié)合具有高度動(dòng)態(tài)性的 DNA 結(jié)合蛋白,較難得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。針對此問題,近岸蛋白開發(fā)了可對細(xì)胞進(jìn)行高濃度甲醛交聯(lián)的CUT&Tag實(shí)驗(yàn)流程。為轉(zhuǎn)錄因子 -DNA 互作研究提供一種新的思路,這種需要甲醛交聯(lián)的CUT&Tag實(shí)驗(yàn)被稱為fcCUT&Tag(formaldehyde crosslinking CUT&Tag)。NovoNGS? CUT&Tag? 4.0 High-Sensitivity Kit (for Illumina)試劑盒包含常規(guī)非交聯(lián)細(xì)胞CUT&Tag及甲醛交聯(lián)細(xì)胞fcCUT&Tag實(shí)驗(yàn)中所需的各種緩沖液、ConA磁珠、DNA純化磁珠、引物等全套建庫試劑,可以用于組蛋白修飾和轉(zhuǎn)錄因子的染色質(zhì)結(jié)合狀態(tài)研究。與傳統(tǒng)的CUT&Tag試劑盒相比,該試劑盒既可以對自然狀態(tài)的細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)-DNA互作研究,也可以對高濃度甲醛交聯(lián)的細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)-DNA互作研究,一盒兩用。試劑盒包含CUT&Tag? 實(shí)驗(yàn)中孵育抗體、轉(zhuǎn)座體、構(gòu)建文庫的相關(guān)試劑,可以用于組蛋白修飾和轉(zhuǎn)錄因子的染色質(zhì)結(jié)合狀態(tài)研究。本試劑盒包含高活性的ChiTag? pAG-Tn5, 相較于最初版本的pA-Tn5 轉(zhuǎn)座酶,pAG結(jié)構(gòu)域?qū)ν谩⑹蟮榷喾N來源抗體具有廣譜的強(qiáng)親和性,在實(shí)驗(yàn)抗體的選擇上具有更大的空間。針對CUT&Tag?打斷產(chǎn)物DNA 提取過程中小片段丟失的問題,本試劑盒提供優(yōu)化的Tagment DNA Extract Beads, 相較于常規(guī)的片段分選磁珠可以完整的回收CUT&Tag? 產(chǎn)物中的小片段DNA, 大大簡化了酚氯仿-乙醇沉淀法的繁瑣操作。此外,本試劑盒還提供了陽性抗體H3K4me3(兔抗)以及相應(yīng)的二抗(羊抗兔IgG) ,用于陽性對照實(shí)驗(yàn)(僅B 包裝提供陽性抗體)。圖1: DNA-Target Protein-Antibody-ChiTag?結(jié)合示意圖圖2: CUT&Tag 實(shí)驗(yàn)流程簡圖產(chǎn)品用途DNA-蛋白質(zhì)互作研究。在常見的哺乳動(dòng)物細(xì)胞上用于替代傳統(tǒng)的ChIP-Seq 技術(shù),特別適用于細(xì)胞數(shù)量較少的樣本,也可應(yīng)用于經(jīng)過處理的植物和酵母樣本上。保存條件詳見說明書僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。Novoprotein是蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司的注冊商標(biāo)。請?jiān)L問我們的注冊商標(biāo)頁面。其他商標(biāo)是其他所有者的財(cái)產(chǎn)。
產(chǎn)品介紹 EasyFusion Assembly Master Mix 是一種快速、簡單且高效的定向同源重組克隆試劑盒,可將目的片段一個(gè)或多個(gè) (PCR 產(chǎn)物)定向克隆到任意載體的任意位置。該技術(shù)不依賴于 T4 連接酶、不受載體和目的片段的酶切位點(diǎn)限制, 僅需 15-30 分鐘實(shí)現(xiàn)高效無縫連接。 操作步驟 1.線性化載體準(zhǔn)備 可以通過以下兩種方法獲得線性化載體,最終載體的濃度需>10 ng/μl。(高濃度的載體有利于提高效率)。 (1)選擇合適的酶切位點(diǎn)線性化載體。(單酶切或雙酶切均可, 5′端突出、3′端突出或平末端均適用) (2)以載體為模板,設(shè)計(jì)引物,通過 PCR 的方式擴(kuò)增出需要的線性化載體 2.擴(kuò)增插入片段引物設(shè)計(jì) 通常通過 PCR 獲得目的片段,引物設(shè)計(jì)要保證目的片段兩端有至少 15bp-20bp 序列與線性化載體的兩端一致的 同源序列。PCR 每條引物長度至少在 35-40bp 之間,包括 5′ 端和 3′端與線性載體同源的 15bp-20bp(不包括酶 切位點(diǎn))以及目的片段特異性序列 20-25bp。 (1)單個(gè)片段的引物設(shè)計(jì): 引物包含目的基因特異性序列和重疊序列 插入片段正向擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)方式為: 5′-上游載體末端 15-20bp 同源序列+目的基因特異性正向擴(kuò)增引物序列(20-25bp)-3′ 插入片段反向擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)方式為: 5′-下游載體末端 15-20bp 同源序列+目的基因特異性正向擴(kuò)增引物序列(20-25bp)-3′ 設(shè)計(jì)引物時(shí),可以參考以下實(shí)例(以 pUC19 線性化載體為例): 3.PCR 擴(kuò)增插入片段 推薦使用高保真聚合酶進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增插入片段,以減少擴(kuò)增突變的產(chǎn)生,選擇聚合酶時(shí)無需考慮末端有無 A 加尾 發(fā)生(重組過程中將會(huì)被去除,在最終載體中不會(huì)出現(xiàn))。PCR 擴(kuò)增結(jié)束后,對目的 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行純化:若是擴(kuò)增模 板與克隆載體抗性不同,且 PCR 產(chǎn)物條帶電泳單一,產(chǎn)物可以無需純化直接用于重組反應(yīng),或者對 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行脫鹽 等簡單純化;否則,需要進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳回收特異性的目的 PCR 片段。 4.重組反應(yīng)進(jìn)行 取出 EasyFusion Assembly Master mix, 置于冰浴中,配制下圖應(yīng)體系(如果不慎將液體粘在管壁,可通過短暫離心沉降) 注意:10 ul 反應(yīng)體系中,載體和各插入片段建議量在 20-50ng 之間,載體與各插入片段的最佳摩爾比為 1:2-1:3 輕輕混勻反應(yīng)體系,50℃反應(yīng) 15-30 分鐘(對于多片段重組或大片段重組,建議反應(yīng)時(shí)間 30 分鐘,可延長反應(yīng)時(shí) 間至 1 小時(shí));待反應(yīng)結(jié)束后,將離心管置于冰上冷卻數(shù)秒,之后將重組產(chǎn)物保存于-20℃或用于轉(zhuǎn)化。 5. 反應(yīng)產(chǎn)物轉(zhuǎn)化、涂板及克隆鑒定 建議所使用的感受態(tài)細(xì)胞效率要達(dá)到> 5X 107 cfu/ug。轉(zhuǎn)化步驟按照不同菌種的要求進(jìn)行或者按標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)化操作 進(jìn)行即可。菌落長出之后,建議采用菌落 PCR 進(jìn)行陽性克隆鑒定,或者對樣品進(jìn)行測序確保正確。 保存條件及組成成分 -20℃保存及冰袋運(yùn)輸 組成成分:2X EasyFusion Assembly Master Mix , 125ul; Linearized pUC19 Vector (10ng/ul),5ul;Control Insert(0.5kb, 20ng/ul),5ul 注意事項(xiàng) 1. 線性化載體或目的片段的純化的品質(zhì)及濃度等較差會(huì)顯著降低克隆陽性率及克隆數(shù)。 2. 重組質(zhì)粒大小的增加(>12kb),克隆效率會(huì)顯著降低,選擇穩(wěn)定性更好的感受態(tài)及轉(zhuǎn)化效率更高效的感受態(tài)細(xì)胞。 3. 菌落較少時(shí),建議適當(dāng)增加重組反應(yīng)產(chǎn)物的體積量,或者提高轉(zhuǎn)化產(chǎn)物量等。 4. 隨著重組片段數(shù)目的增加,克隆效率降低,建議增加引物重疊序列長度或適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間。
產(chǎn)品介紹 本試劑盒可以快速從細(xì)胞、細(xì)菌和動(dòng)物組織中提取總RNA。本產(chǎn)品中裂解液(RLT Lysis Bufer)可以快速裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,通過DNA清除/RNA吸附通用柱吸附技術(shù),去除基因組DNA殘留,同時(shí)在乙醇輔助結(jié)合條件下,高效地結(jié)合在吸附柱的硅膠膜上,再經(jīng)過多次的洗滌離心后,去除細(xì)胞代謝物和蛋白質(zhì)等雜質(zhì),獲得純凈的總RNA。純化的RNA可用于RT-PCR,NorthernBlotPoly(A)+篩選等多種實(shí)驗(yàn)。 產(chǎn)品亮點(diǎn) 安全性高:無需使用苯酚,氯仿等試劑,無需乙醇沉淀 使用范圍廣:對細(xì)胞、細(xì)菌、動(dòng)物組織提取均適用 操作簡單快速:全程室溫操作,10-20分鐘可完成純化步驟 提取純度高:經(jīng)多次柱吸附和洗滌,基因組DNA和蛋白質(zhì)污染低 首次使用前,在漂洗液 RWB Wash Buffer 中加入標(biāo)簽指定量的無水乙醇(5 preps/50 preps分別加入 4.8 ml/48 ml 無水乙醇),充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。 *注意觀察各溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季低溫環(huán)境時(shí)),可 37℃溫浴復(fù)溶至溶液澄清,避免影響使用效果。 運(yùn)輸和保存方式 常溫運(yùn)輸,室溫避光保存,有效期 12 個(gè)月。2-4°C 可保存更長時(shí)間
產(chǎn)品介紹 TRnaZol Reagent 適用于快速、直接從多種組織和細(xì)胞中提取總 RNA 的一種廣譜型試劑。TRnaZol Reagent 內(nèi)含優(yōu)化的異硫氰酸胍、酸性酚等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞,抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶,最大 限度地裂解樣品且同時(shí)保證 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 離心后,溶液會(huì)分成三層:上 層無色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相,其中 RNA 分布在上清無色水相中。本試劑操作快速方便,顏 色分明,提取的總 RNA 完整性好,純度高,無蛋白和 DNA 的污染,可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如 RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 產(chǎn)品特色 ? 安全性高:使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿 ? 使用范圍廣:對人、動(dòng)物、植物和細(xì)菌組織提取均適用 ? 顏色分明:溶液呈粉紅色,便于分離水相和有機(jī)相 ? 提取純度高:DNA 和蛋白質(zhì)污染最低,可用于多種下游實(shí)驗(yàn) 產(chǎn)品介紹 TRnaZol Reagent 適用于快速、直接從多種組織和細(xì)胞中提取總 RNA 的一種廣譜型試劑。TRnaZol Reagent 內(nèi)含優(yōu)化的異硫氰酸胍、酸性酚等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞,抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶,最大 限度地裂解樣品且同時(shí)保證 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 離心后,溶液會(huì)分成三層:上 層無色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相,其中 RNA 分布在上清無色水相中。本試劑操作快速方便,顏 色分明,提取的總 RNA 完整性好,純度高,無蛋白和 DNA 的污染,可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如 RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 產(chǎn)品特色 ? 安全性高:使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿 ? 使用范圍廣:對人、動(dòng)物、植物和細(xì)菌組織提取均適用 ? 顏色分明:溶液呈粉紅色,便于分離水相和有機(jī)相 ? 提取純度高:DNA 和蛋白質(zhì)污染最低,可用于多種下游實(shí)驗(yàn) 組成成分及保存條件
產(chǎn)品介紹 NCM Western Blot Stripping Buffer(蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液)是新賽美生物生產(chǎn)的用于去除結(jié)合在印跡膜(PVDF膜或NC膜)上的一抗和二抗的洗滌液。該產(chǎn)品作用溫和,不含有毒有味的巰基乙醇,在不影響目的蛋白的情況下,可使同一張印跡膜進(jìn)行多次抗體檢測。省去反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜等步驟,節(jié)省樣品及時(shí)間,加快Western Blot檢測實(shí)驗(yàn)。 產(chǎn)品特色 ? 獨(dú)有的配方,去除抗體效力強(qiáng) ? 對蛋白作用溫和,不影響目的蛋白 ? 不含有巰基乙醇,無毒無味,室溫條件下使用保存 ? 適用PVDF膜和NC膜,加速抗體檢測 操作步驟 1. 將曝光結(jié)束的蛋白印跡膜充分浸入適當(dāng)體積的NCM Western BlotStripping Buffer(蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液)中,抗體剝離液要充分覆蓋膜的表面,在脫色搖床上,室溫中速震蕩孵育10分鐘,棄去剝離液。 2. (可選)重復(fù)步驟1。(對于信號正常或較弱的印跡膜也可以不必重復(fù)步驟1,如果是內(nèi)參等表達(dá)量高的蛋白,可以重復(fù)步驟1三次,以保證徹底去除了抗體。) 3. 每用鑷子取出印跡膜,加入洗滌緩沖液TBST或PBST,在脫色搖床上中速震蕩洗滌3次,每次5分鐘。 4. (可選)通過顯色曝光等方法檢測抗體是否去除,如檢測到信號,需重復(fù)步驟1,確保抗體被除盡。 5. 對印跡膜重新進(jìn)行封閉,進(jìn)入下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。 保存條件 室溫保存,運(yùn)輸,一年有效 注意事項(xiàng) 1. 建議先檢查表達(dá)量低的蛋白,再用NCM Western Blot Stripping Buffer處理印跡膜后,檢測表達(dá)量高的蛋白; 2. 本品適用于NC膜和PVDF膜,推薦使用PVDF膜,效果更佳; 3. 為了安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服,戴手套操作
產(chǎn)品介紹 NCM Western Blot Stripping Buffer(蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液)是新賽美生物生產(chǎn)的用于去除結(jié)合在印跡膜(PVDF膜或NC膜)上的一抗和二抗的洗滌液。該產(chǎn)品作用溫和,不含有毒有味的巰基乙醇,在不影響目的蛋白的情況下,可使同一張印跡膜進(jìn)行多次抗體檢測。省去反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜等步驟,節(jié)省樣品及時(shí)間,加快Western Blot檢測實(shí)驗(yàn)。 產(chǎn)品特色 ? 獨(dú)有的配方,去除抗體效力強(qiáng) ? 對蛋白作用溫和,不影響目的蛋白 ? 不含有巰基乙醇,無毒無味,室溫條件下使用保存 ? 適用PVDF膜和NC膜,加速抗體檢測 操作步驟 1. 將曝光結(jié)束的蛋白印跡膜充分浸入適當(dāng)體積的NCM Western BlotStripping Buffer(蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液)中,抗體剝離液要充分覆蓋膜的表面,在脫色搖床上,室溫中速震蕩孵育10分鐘,棄去剝離液。 2. (可選)重復(fù)步驟1。(對于信號正常或較弱的印跡膜也可以不必重復(fù)步驟1,如果是內(nèi)參等表達(dá)量高的蛋白,可以重復(fù)步驟1三次,以保證徹底去除了抗體。) 3. 每用鑷子取出印跡膜,加入洗滌緩沖液TBST或PBST,在脫色搖床上中速震蕩洗滌3次,每次5分鐘。 4. (可選)通過顯色曝光等方法檢測抗體是否去除,如檢測到信號,需重復(fù)步驟1,確保抗體被除盡。 5. 對印跡膜重新進(jìn)行封閉,進(jìn)入下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。 保存條件 室溫保存,運(yùn)輸,一年有效 注意事項(xiàng) 1. 建議先檢查表達(dá)量低的蛋白,再用NCM Western Blot Stripping Buffer處理印跡膜后,檢測表達(dá)量高的蛋白; 2. 本品適用于NC膜和PVDF膜,推薦使用PVDF膜,效果更佳; 3. 為了安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服,戴手套操作
產(chǎn)品介紹 新賽美生物的磷酸酶抑制劑混合液(ProtLytic Phosphatase Inhibitor Cocktail)是經(jīng)優(yōu)化好的多種 磷酸酶抑制劑的混合物組成的,是一種廣譜的抑制劑混合物,在抽提和純化蛋白時(shí)能夠 有效防止蛋白被內(nèi)源性的磷酸酶降解。成分主要含有 sodium fluoride,sodium orthovanadate,Sodium Pyrophosphate,β-glycerophosphate,Imidazole 等多種抑制劑, 主要抑制酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、ATP 酶等,用于蛋白純化,蛋白免疫印跡, 免疫共 沉淀,免疫熒光,免疫組織化學(xué),激酶測定等研究。 操作步驟 將磷酸酶抑制劑混合液,根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系的需求,按照 1:100 的比率將其加入到樣品 溶液中(如組織抽提物或細(xì)胞裂解物)。 保存條件 4 ℃保存,冰袋運(yùn)輸,至少 1 年有效; 注意事項(xiàng) 1. 磷酸酶抑制劑會(huì)損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進(jìn)或通過皮膚吸收后有致命危 險(xiǎn) 2. 不同樣品中含有的磷酸酶量及種類不同,可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整加入磷酸酶抑制劑混合液 的量,如加入 2 倍,3 倍等量,才能有效抑制內(nèi)源性磷酸酶的作用 3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴防護(hù)手套操作
產(chǎn)品介紹 新賽美生物的蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合液(Protease and PhosphataseInhibitor Cocktail) 是經(jīng)優(yōu)化好的多種蛋白酶和磷酸酶抑制劑的混合物組成的,僅用一種溶液即可方便地完 成在抽提和純化蛋白時(shí),能夠有效防止蛋白被內(nèi)源性的蛋白酶和磷酸酶的降解。成分含 有 Aprotinin,Bestatin,Leupetin,Pepstatin,PMSF,NaF,Sodium Orthovanadate,Sodium Pyrophosphate 等多種蛋白酶和磷酸酶家族的抑制劑,主要抑制氨基肽酶、半胱氨酸和 絲氨酸蛋白酶、絲氨酸/蘇氨酸和酪氨酸蛋白酶和磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、堿性磷 酸酶、酸性磷酸酶等,用于蛋白純化,蛋白免疫印跡, 免疫共沉淀,免疫熒光,免疫組 織化學(xué),激酶測定等研究。 操作步驟 在室溫下溶解含有蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合液,混勻之后,根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系的需求, 按照 1:100 的比率將抑制劑混合液加入到樣品溶液中(如組織抽提物或細(xì)胞裂解物)。 保存條件 -20 ℃保存,冰袋運(yùn)輸,至少 1 年有效; 注意事項(xiàng) 1. 蛋白酶和磷酸酶抑制劑嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進(jìn)或通過皮膚吸收 后有致命危險(xiǎn); 2. 不同樣品中含有的蛋白酶和磷酸酶的量及種類不同,可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整加入抑制劑混 合液的量,如加入 2 倍,3 倍等量,才能有效抑制內(nèi)源性蛋白酶和磷酸酶的作用 3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴防護(hù)手套操作
產(chǎn)品介紹 RIPA 即 Radio Immunoprecipitation Assay,是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。新賽美生物的 RIPA 裂解液裂解所得的蛋白樣品可以用于常規(guī)的 Western、IP 等。主要成分是:50mMTris(pH 7.6),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodiumdeoxycholate,0.1% SDS 等多種裂解劑和抑制劑,能有效地抑制蛋白 降解。 操作步驟 對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品: 1. 取適當(dāng)量的NCM RIPA Buffer 裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM。 注意:NCM RIPA Buffer 不含蛋白酶等抑制劑,根據(jù)需要在使用前添加蛋白酶,磷酸酶等抑制劑。 2. a.對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有 干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使 裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 b. 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。 如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。 對于組織樣品: 1. 把組織剪切成細(xì)小的碎片。 2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF,使 PMSF 的最終濃 度為 1mM。 3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加 更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量) 4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。 5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western 和免疫沉淀 等操作。 6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈渦旋使樣品裂解 充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn) 是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。 保存條件 4℃保存,室溫運(yùn)輸,1 年有效; 注意事項(xiàng): 1.RIPA 裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因 組 DNA 等的復(fù)合物。在不檢測和基因組 DNA 結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清 用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明 膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如 NFκB、p53 等時(shí),通 常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。 2.為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)效果,可適當(dāng)分裝使用,以盡量避免反復(fù)凍融。 3.PMSF 應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)加,需自備 PMSF。 4.裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或 4℃進(jìn)行。 5.蛋白酶抑制劑均有較高的毒性,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。一旦 直接接觸,請立即用流水沖洗,再向醫(yī)療保健結(jié)構(gòu)咨詢。