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Improved Citrate Antigen Retrieval Solution,50×【保存條件】4℃保存,一年有效【概述】1. 檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一種最常用的抗原修復(fù)液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。2. 細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link),從而遮蔽樣品的抗原位點,導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。本抗原修復(fù)液對檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0)經(jīng)過改進,可以更有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。【操作方法】1. 對于石蠟切片:2. a. 脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘,再換用新鮮的二甲苯脫蠟,共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5分鐘,兩次。90%乙醇 5 分鐘,兩次,70%乙醇 5 分鐘,一次。蒸餾水 5 分鐘,兩次。3. b. 抗原修復(fù):用重蒸水或 Milli-Q 水將本抗原修復(fù)液(50×)稀釋 50 倍,配制成抗原修復(fù)液(1×),例如1ml 本抗原修復(fù)液(50X)加入 49ml 重蒸水或 Milli-Q 水,混合均勻,即得 50ml 抗原修復(fù)液(1×)。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi),最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。4. 對于冰凍切片:5. 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi),最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。6. 對于其它樣品的抗原修復(fù):可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。【注意事項】1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。3. 本產(chǎn)品含有少量的特殊去垢劑,抗原修復(fù)過程中加熱時會產(chǎn)生非常細(xì)密的氣泡而呈現(xiàn)均勻的渾濁狀,屬于正常現(xiàn)象,請放心使用。
【保存條件】室溫保存,有效期1年。【概述】10×SuperBlot SDS-PAGE 快速蛋白電泳緩沖液是經(jīng)典Laemmli電泳緩沖液的改良版,可顯著提高分離速度,且不會產(chǎn)生過多的熱量影響凝膠品質(zhì)。10×SuperBlot SDS-PAGE 快速蛋白電泳緩沖液是Tris-甘氨酸-SDS電泳緩沖液的直接替代品。可兼容各種Tris-甘氨酸或 Laemmli系統(tǒng)的商業(yè)預(yù)制或手鑄凝膠。【使用建議】1. 取100ml 10×SuperBlot SDS-PAGE 快速蛋白電泳緩沖液加入約900ml蒸餾水或去離子水定容至1L(10倍稀釋),混勻后即可使用。2. 在正常條件下,該電泳緩沖液支持50-250V電壓下運行。在200-250V電壓下運行,可在18-35分鐘內(nèi)完成電泳,具體電泳時間請根據(jù)指示帶所在位置自行判斷。3. 與使用標(biāo)準(zhǔn)Tris-甘氨酸緩沖液運行的凝膠相比,SuperBlot SDS-PAGE 快速蛋白電泳的最佳蛋白條帶大小范圍可能略有變化,具體見下表:表1. 不同膠濃度下電泳最佳蛋白條帶大小范圍膠濃度 標(biāo)準(zhǔn)Tris-甘氨酸電泳最佳蛋白大小范圍 SuperBlot SDS-PAGE 快速電泳最佳蛋白大小范圍 7.5% 50-325 kDa 20-250 kDa 10% 30-180 kDa 15-140 kDa 12% 20-140 kDa 10-80 kDa 15% 12-100 kDa 5-70 kDa 【注意事項】1. 本產(chǎn)品為高倍濃縮液,環(huán)境溫度較低時可能會有結(jié)晶析出,可加熱助溶,待溶解完全后再進行稀釋使用;密封保存,防止污染。2. 調(diào)整電泳緩沖液濃度可更快獲取結(jié)果。3. 該溶液含有SDS,專為變性凝膠電泳設(shè)計,不可用于非變性凝膠電泳。4. 為獲得最佳實驗結(jié)果,電泳槽內(nèi)務(wù)必添加足夠多的電泳緩沖液,并留意電泳指示帶位置。5. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品中文名稱:氯化鈣溶液(2.5mol/L,無菌)產(chǎn)品英文名稱:Calcium Chloride Solution, 2.5mol/L, Sterilize運輸條件:常溫運輸
DAPI Solution,1mg/ml【保存條件】 -20℃保存,有效期至少兩年。 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽)是一種能夠與 DNA 中大部分 A、T 堿基相互結(jié) 合的熒光染料,常用于熒光顯微鏡觀測。因為 DAPI 可以透過完整的細(xì)胞膜,它可以用于活 細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。當(dāng) DAPI 與雙鏈 DNA 結(jié)合時,最大吸收波長為 358nm,最大發(fā)射 波長為 461nm。DAPI 的發(fā)射光為藍色,且 DAPI 和綠色熒光蛋白 GFP 或 Texas Red 染劑(紅 色熒光染劑)的發(fā)射波長僅有少部分重疊,可以利用這項特性在單一的樣品上進行多重?zé)晒馊旧?本產(chǎn)品為 DAPI 水溶液,純度≥90%,濃度為 1mg/ml。使用時根據(jù)實驗不同直接將本產(chǎn) 品用相應(yīng)溶液稀釋到工作濃度。 【使用方法(僅供參考)】 取適量 1mg/ml DAPI 染色液加到 PBS 中,制備成 5-15μg/ml 的 DAPI 染色液。 ? 對于培養(yǎng)細(xì)胞 1. 將 1/10 培養(yǎng)基體積的 5-15μg/ml DAPI 染色液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。 2. 在 37℃培養(yǎng)細(xì)胞 10-20 分鐘。 3. 用 PBS 或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。 4. 置于熒光顯微鏡下觀察,激發(fā)波長 360-400nm。 ? 對于組織切片 制好的玻片上滴加幾滴 5-15μg/ml DAPI 染色液,染色 10 分鐘,流水沖去染液,濾紙吸除多余水分,加一滴熒光封片液,置于熒光顯微鏡下觀察。 【注意事項】 1. DAPI 被普遍認(rèn)為具有致癌性,操作時應(yīng)戴手套,并避免交叉污染。 2. 本產(chǎn)品需避光,并盡量避免反復(fù)凍融。
100mM Tris,400mM L-arginine, 2mM EDTA, 5mM GSH, 0.5mM GSSG, 10% Glycerol,pH 8.0
2M DTT Solution【保存條件】-20℃避光保存一年【概述】DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,分子量為154.25,本產(chǎn)品原料為進口原料,不含 DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶(DNase, RNase & Protease free),純度>99%。干燥失重低于 0.5%,氧化 DTT 含量低于 0.5%。DTT 是常用還原劑,有抗氧化作用。DTT 和巰基乙醇相比,作用相似,但 DTT 的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且 DTT 比巰基乙醇的濃度低 7 倍時,兩者效果相近。本品濃度為 2mol/L。【注意事項】1. DTT 對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2M DTT Solution【保存條件】-20℃避光保存一年【概述】DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,分子量為154.25,本產(chǎn)品原料為進口原料,不含 DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶(DNase, RNase & Protease free),純度>99%。干燥失重低于 0.5%,氧化 DTT 含量低于 0.5%。DTT 是常用還原劑,有抗氧化作用。DTT 和巰基乙醇相比,作用相似,但 DTT 的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且 DTT 比巰基乙醇的濃度低 7 倍時,兩者效果相近。本品濃度為 2mol/L。【注意事項】1. DTT 對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。2. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
10×Elisa Washing Buffer【保存條件】4℃保存,一年有效【操作方法】1.用去離子水(1 份 10×ELISA Washing Buffer 與 9 份水)按 1:10 稀釋所需體積的混勻稀釋至工作液。2.孵育完抗體后用稀釋的洗滌緩沖液工作液(約 400μl)加入反應(yīng)孔中,注意不要淹沒板,因為這會交叉污染孔。緩沖液可以手動分配或通過自動系統(tǒng)分配。在每個 ELISA 洗滌步驟中使用,總共洗滌約 2-4 次。3. 在每次洗滌之后,吸出或傾倒緩沖液。最后一次洗滌后,倒置板于干凈紙巾上以吸干板中多余的液體。4. (僅供參考)按試劑盒說明加入顯色底物 100μl 并加熱水浴,并在完成后加入 ELISA 終止液終止反應(yīng)。【注意事項】1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 本品僅用于科研,不得用于臨床相關(guān)診斷。
10×Elisa Washing Buffer【保存條件】4℃保存,一年有效【操作方法】1.用去離子水(1 份 10×ELISA Washing Buffer 與 9 份水)按 1:10 稀釋所需體積的混勻稀釋至工作液。2.孵育完抗體后用稀釋的洗滌緩沖液工作液(約 400μl)加入反應(yīng)孔中,注意不要淹沒板,因為這會交叉污染孔。緩沖液可以手動分配或通過自動系統(tǒng)分配。在每個 ELISA 洗滌步驟中使用,總共洗滌約 2-4 次。3. 在每次洗滌之后,吸出或傾倒緩沖液。最后一次洗滌后,倒置板于干凈紙巾上以吸干板中多余的液體。4. (僅供參考)按試劑盒說明加入顯色底物 100μl 并加熱水浴,并在完成后加入 ELISA 終止液終止反應(yīng)。【注意事項】1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 本品僅用于科研,不得用于臨床相關(guān)診斷。