產品信息
PAGE預混膠試劑盒
CAT.# GF1800
分離膠A (200ml) 分離膠B (200ml) 濃縮膠A (75ml) 濃縮膠B (75ml)
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產品描述
? 此試劑盒用于制備PAGE凝膠,快速、便捷;
? 所制備的凝膠可用于變性和非變形蛋白質電泳分析;
? 有6%、8%、10%、12%、15%五個不同濃度可供選擇;
? 預混配方,無需計算所需溶液量,無需稀釋,只需兩種液體等比例混合,簡化傳統制膠流程,縮短制膠時間;
? 可耐受最高260V分離電壓,將傳統的凝膠電泳實驗從1-2小時縮短至30分鐘,且條帶清晰、銳利;
? 高效的蛋白轉移能力,保證Western blot 數據的高度可靠性;
? 每盒最多可制膠100塊,超高性價比;
? 不用冷藏或冷凍存貯,室溫下保質期1年。
使用說明:
1、 將分離膠I和分離膠II等比例混合(參照附表1),然后將所需的TEMED和10% APS加到混合溶液中(參照附表1),并混合均勻,灌入制膠板內。
2、 在制膠板加入適量的醇或水壓平分離膠,待分離膠凝固后,倒去上層的水或醇。
3、 將濃縮膠I和濃縮膠II等比例混合(參照附表1),然后將所需的TEMED和10% APS加到混合溶液中(參照附表1),并混合均勻。
4、 將配置好的濃縮膠預混液加入制作好分離膠的膠板內,緩慢插入干凈的梳齒。
5、 待濃縮膠凝固后,拔去梳齒即可用于電泳。
備注:
1、 此試劑盒常溫存放即可;
2、 TEMED和10%APS已包含在試劑盒中,請盡量使用新鮮配制的APS溶液;
3、 在制備分離膠和濃縮膠溶液時,注意避免氣泡的產生;
4、 制備好的凝膠可以用一張用去離子水浸濕的紙巾蓋住,并將其儲存在一個密封的塑料袋中,4 ℃可保存四個星期;
5、 每個試劑盒可制備的凝膠數量:
玻璃板大(9*7cm) |
0.75 mm 玻璃板 |
1.0 mm 玻璃板 |
1.5 mm 玻璃板 |
制膠數 |
100塊膠 |
65塊膠 |
45塊膠 |
關于凝膠速度說明:
? 實驗證明,凝膠速度與溫度有顯著的正相關性。同等條件下,溫度越高,凝膠速度越快。比如25℃時凝膠顯著快于15℃。同理,在37℃時,凝膠會進一步加快。如果要加速凝膠,可考慮提高凝膠溫度(把膠放進37°培養箱)。
? APS容易分解失效,APS的效力直接影響凝膠快慢,請盡量使用新配制的APS溶液;另外,如果制作的板子漏膠,也會影響分離膠的凝膠。
? APS和TEMED在整個凝膠過程起催化加速作用,但添加過多,膠的柔性會降低。“附表1”APS和TEMED的添加量,正常情況會使凝膠在半小時內完成,并確保膠的柔韌性。
關于電泳電壓的說明:
? 本試劑盒最適電壓為160-200V,可承受的最高分離電壓為260V,建議客戶根據自己的實驗條件和實驗目選擇電泳電壓。
附表1:制備膠所需體積列表
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0.75mm 玻璃板 (n=制備膠個數) |
1.0mm 玻璃板 (n=制備膠個數) |
1.5mm 玻璃板 (n=制備膠個數) |
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濃縮膠 |
分離膠 |
濃縮膠 |
分離膠 |
濃縮膠 |
分離膠 |
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分離膠I |
/ |
2 ml x n |
/ |
3 ml x n |
/ |
4 ml x n |
分離膠II |
/ |
2 ml x n |
/ |
3 ml x n |
/ |
4 ml x n |
濃縮膠I |
1 ml x n |
/ |
1 ml x n |
/ |
1.5 ml x n |
/ |
濃縮膠II |
1 ml x n |
/ |
1 ml x n |
/ |
1.5ml x n |
/ |
TEMED |
2 μl x n |
2 μl x n |
2 μl x n |
3 μl x n |
3 μl x n |
4 μl x n |
10% APS |
20 μl x n |
40 μl x n |
20 μl x n |
60 μl x n |
30 μl x n |
80 μl x n |
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