產品貨號:E-EL-R0562c
中文名:大鼠白介素11(IL-11)酶聯免疫吸附測定試劑盒
別稱:IL11, AGIF, IL-11, interleukin 11
該試劑盒用于體外定量檢測Rat 血清,血漿或其他生物體液中IL-11濃度
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗大鼠IL-11抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的大鼠IL-11會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠IL-11抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗大鼠IL-11抗體與結合在包被抗體上的大鼠IL-11結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,IL-11濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中IL-11的濃度。
反應類型 | 夾心法 |
規格 | 96T |
反應時間 | 3.5h |
反應性 | Rat |
檢測方法 | Colormetric |
檢測范圍 | 15.63—1000 pg/mL |
靈敏度 | 9.38 pg/mL |
樣本體積 | 100μL |
樣本類型 | 血清,血漿或其他生物體液 |
可檢測樣本中的大鼠IL-11,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
板內,板間變異系數均<10%。
由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
1000 |
2.483 2.505 |
2.494 | 2.419 |
500 |
1.643 1.699 |
1.671 | 1.596 |
250 |
0.99 0.966 |
0.978 | 0.903 |
125 |
0.45 0.476 |
0.463 | 0.388 |
62.5 |
0.274 0.252 |
0.263 | 0.188 |
31.25 |
0.182 0.17 |
0.176 | 0.101 |
15.63 |
0.118 0.136 |
0.127 | 0.052 |
0 |
0.073 0.077 |
0.075 | -- |
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
47.98 | 127.48 | 499.39 | 48.54 | 135.62 | 511.36 |
Standard deviation |
3.05 | 6.97 | 20.28 | 2.99 | 7.51 | 19.12 |
C V (%) | 6.36 | 5.47 | 4.06 | 6.16 | 5.54 | 3.74 |
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 94-109 | 101 |
EDTA plasma (n=8) | 96-112 | 102 |
Cell culture media (n=8) | 90-101 | 95 |
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 93-107 | 95-109 | 96-110 |
Average (%) | 98 | 102 | 103 | |
1:4 | Range (%) | 91-109 | 79-92 | 85-97 |
Average (%) | 99 | 85 | 90 | |
1:8 | Range (%) | 89-102 | 80-93 | 87-100 |
Average (%) | 96 | 86 | 92 | |
1:16 | Range (%) | 93-106 | 79-93 | 87-99 |
Average (%) | 100 | 86 | 94 |
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 | 英文名稱 | 規格 | 保存條件 |
---|---|---|---|
ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃,可存放6個月 |
凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | |
濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6個月 |
標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
產品說明書 | Product Description | 1 份 | |
質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。
1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘 |
|
2. 棄掉板內液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘 |
|
3. 棄掉板內液體,洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內液體,洗板5次 |
|
5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 |
|
6. 每孔加入50μL終止液 |
|
7. 立即在450nm波長下讀數,處理數據 |
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