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產品細節圖:
Human IL-15(Interleukin 15) ELISA Kit
產品貨號:E-EL-H0222c
中文名:人白介素15(IL-15)酶聯免疫吸附測定試劑盒
別稱:IL15
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中IL-15濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人IL-15抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人IL-15會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-15抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗人IL-15抗體與結合在包被抗體上的人IL-15結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，IL-15濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中IL-15的濃度。
| 反應類型 | 夾心法 |
| 規格 | 96T |
| 反應時間 | 3.5h |
| 反應性 | Human |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 15.63—1000 pg/mL |
| 靈敏度 | 9.38 pg/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人IL-15，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內，板間變異系數均<10%。
典型數據
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 1000 |
2.485 2.541 |
2.513 | 2.436 |
| 500 |
1.648 1.668 |
1.658 | 1.581 |
| 250 |
0.916 0.884 |
0.9 | 0.823 |
| 125 |
0.48 0.5 |
0.49 | 0.413 |
| 62.5 |
0.291 0.271 |
0.281 | 0.204 |
| 31.25 |
0.179 0.177 |
0.178 | 0.101 |
| 15.63 |
0.124 0.134 |
0.129 | 0.052 |
| 0 |
0.070 0.084 |
0.077 | -- |
|
精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
|
Mean (pg/mL) |
47.35 | 146.58 | 348.04 | 46.47 | 145.32 | 338.28 |
|
Standard deviation |
3.02 | 8.27 | 15.04 | 3.16 | 6.47 | 18.37 |
| C V (%) | 6.38 | 5.64 | 4.32 | 6.80 | 4.45 | 5.43 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 92-106 | 98 |
| EDTA plasma (n=8) | 92-103 | 97 |
| Cell culture media (n=8) | 88-103 | 94 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 96-110 | 96-109 | 84-97 |
| Average (%) | 101 | 102 | 90 | |
| 1:4 | Range (%) | 88-101 | 83-95 | 84-96 |
| Average (%) | 95 | 88 | 91 | |
| 1:8 | Range (%) | 91-105 | 81-92 | 89-99 |
| Average (%) | 99 | 87 | 94 | |
| 1:16 | Range (%) | 93-104 | 88-100 | 88-100 |
| Average (%) | 99 | 93 | 94 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃，可存放6個月 |
| 凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個月 |
| 標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
| 產品說明書 | Product Description | 1 份 | |
| 質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。
試驗所需自備物品
- 1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
- 2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
- 4. 吸水紙
操作步驟
|
1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘 |
|
2. 棄掉板內液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘 |
|
3. 棄掉板內液體，洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次 |
|
5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 |
|
6. 每孔加入50μL終止液 |
|
7. 立即在450nm波長下讀數，處理數據 |
暫時沒有說明書
1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影響因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影響因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
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