產品貨號:E-EL-H0107c
中文名:人白介素23(IL-23)酶聯免疫吸附測定試劑盒
別稱:IL-23A, IL23P19, P19, SGRF
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中IL-23濃度
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人IL-23抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的人IL-23會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-23抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗人IL-23抗體與結合在包被抗體上的人IL-23結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,IL-23濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中IL-23的濃度。
反應類型 | 夾心法 |
規格 | 96T |
反應時間 | 3.5h |
反應性 | Human |
檢測方法 | Colormetric |
檢測范圍 | 39.06—2500 pg/mL |
靈敏度 | 23.44 pg/mL |
樣本體積 | 100μL |
樣本類型 | 血清,血漿或其他生物體液 |
可檢測樣本中的人IL-23,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
板內,板間變異系數均<10%。
由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
2500 |
2.147 2.189 |
2.168 | 2.115 |
1250 |
1.485 1.519 |
1.502 | 1.449 |
625 |
0.83 0.792 |
0.811 | 0.758 |
312.5 |
0.364 0.374 |
0.369 | 0.316 |
156.25 |
0.23 0.202 |
0.216 | 0.163 |
78.13 |
0.148 0.132 |
0.14 | 0.085 |
39.06 |
0.093 0.105 |
0.099 | 0.046 |
0 |
0.045 0.061 |
0.053 | -- |
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
136.57 | 343.26 | 1072.26 | 129.52 | 356.17 | 1144.30 |
Standard deviation |
7.20 | 15.55 | 35.49 | 8.48 | 20.02 | 54.47 |
C V (%) | 5.27 | 4.53 | 3.31 | 6.55 | 5.62 | 4.76 |
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 88-100 | 94 |
EDTA plasma (n=8) | 94-105 | 99 |
Cell culture media (n=8) | 87-100 | 93 |
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 92-107 | 95-109 | 85-99 |
Average (%) | 99 | 102 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 93-104 | 84-96 | 86-102 |
Average (%) | 98 | 90 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 91-106 | 83-94 | 87-99 |
Average (%) | 99 | 89 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 88-103 | 84-94 | 80-92 |
Average (%) | 95 | 89 | 87 |
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 | 英文名稱 | 規格 | 保存條件 |
---|---|---|---|
ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃,可存放6個月 |
凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | |
濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6個月 |
標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
產品說明書 | Product Description | 1 份 | |
質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。
1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘 |
|
2. 棄掉板內液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘 |
|
3. 棄掉板內液體,洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內液體,洗板5次 |
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5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 |
|
6. 每孔加入50μL終止液 |
|
7. 立即在450nm波長下讀數,處理數據 |
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