中文名:人二胺氧化酶(DAO)酶聯免疫吸附測定試劑盒
別稱:AOC1, ABP1, Amiloride Binding Protein 1, Amine Oxidase(Copper-Containing)
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中DAO濃度
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人DAO抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的人DAO會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人DAO抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗人DAO抗體與結合在包被抗體上的人DAO結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,DAO濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中DAO的濃度。
反應類型 | 夾心法 |
規格 | 96T |
反應時間 | 3.5h |
反應性 | Human |
檢測方法 | Colormetric |
檢測范圍 | 3.13—200 ng/mL |
靈敏度 | 1.88 ng/mL |
樣本體積 | 100μL |
樣本類型 | 血清,血漿或其他生物體液 |
可檢測樣本中的人DAO,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
板內,板間變異系數均<10%。
由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
(ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
200 |
2.407 2.441 |
2.424 | 2.335 |
100 |
1.547 1.605 |
1.576 | 1.487 |
50 |
0.918 0.896 |
0.907 | 0.817 |
25 |
0.466 0.484 |
0.475 | 0.386 |
12.5 |
0.28 0.278 |
0.279 | 0.19 |
6.25 |
0.198 0.168 |
0.183 | 0.094 |
3.13 |
0.129 0.147 |
0.138 | 0.049 |
0 |
0.087 0.09 |
0.089 | -- |
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (ng/mL) |
10.74 | 28.26 | 90.38 | 10.95 | 27.59 | 89.37 |
Standard deviation |
0.68 | 1.29 | 3.07 | 0.64 | 1.43 | 3.93 |
C V (%) | 6.33 | 4.56 | 3.40 | 5.84 | 5.18 | 4.40 |
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 92-106 | 98 |
EDTA plasma (n=8) | 85-100 | 92 |
Cell culture media (n=8) | 89-102 | 95 |
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 94-107 | 89-101 | 95-109 |
Average (%) | 99 | 94 | 101 | |
1:4 | Range (%) | 87-103 | 85-100 | 88-103 |
Average (%) | 94 | 91 | 95 | |
1:8 | Range (%) | 88-105 | 86-100 | 88-104 |
Average (%) | 96 | 92 | 95 | |
1:16 | Range (%) | 89-101 | 82-96 | 82-96 |
Average (%) | 94 | 88 | 88 |
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 | 英文名稱 | 規格 | 保存條件 |
---|---|---|---|
ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃,可存放6個月 |
凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | |
濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6個月 |
標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
產品說明書 | Product Description | 1 份 | |
質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。
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