外源活性位點 | Chymotrypsin <=0.1 BTEE units/mg protein |
儲存溫度 | -20°C |
摩爾質量 | mol wt 23.8 kDa |
形態 | essentially salt-free, lyophilized powder |
特色行業 | Diagnostic Assay Manufacturing |
胰蛋白酶由223個氨基酸殘基的單鏈多肽組成,通過從胰蛋白酶原中去除N-末端六肽而產生,胰蛋白酶原在Lys-lle肽鍵處被裂解。
氨基酸序列通過6個二硫鍵交聯。這是胰蛋白酶,β-胰蛋白酶的天然形式。BETA-胰蛋白酶可以自溶,在 Lys-Ser殘基上裂解,產生α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。
對于胰蛋白酶消化肽,胰蛋白酶:肽 使用約為 1:100 至 1:20 的比例。從培養表面除去粘附細胞是本產品的一個典型應用。 從其底物中去除細胞所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養物的年齡。
胰蛋白酶也被用于細胞培養期間細胞的再懸浮、蛋白質組學研究中的蛋白質消化和各種凝膠內消化。
其他應用包括:通過基于膜的技術評估結晶,用在確定動力學陷阱的存在會限制蛋白質的折疊速率和產量的一項研究中。
胰蛋白酶在賴氨酸和精氨酸殘基的C末端切割肽。 如果酸性殘基位于切割位點的任一側,則該反應的水解速率減慢,如果脯氨酸殘基位于切割位點的羧基側,則水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH為7-9。
EDTA被添加到胰蛋白酶溶液中作為螯合劑,該螯合劑中和鈣離子和鎂離子,這些離子模糊了胰蛋白酶作用的肽鍵。 去除這些離子會增加酶活性。
絲氨酸蛋白酶抑制劑,包括DFP,TLCK,APMSF,AEBSEF和抑肽酶等,都會抑制胰蛋白酶。
一個BAEE酶活單位:使用BAEE作為底物,將在25℃, pH 7.6的條件下,A253吸光值每分鐘產生0.001的變化。 一個BTEE單位= 320個ATEE單位
它也經過TPCK處理和透析。 用L-1-甲苯磺酰胺-2-苯乙基氯甲基酮(TPCK)處理降低了胰蛋白酶通常存在的胰凝乳蛋白酶活性。
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