制備注意事項

E-64可溶于水。 可以在水中制備20mg / ml溶液（可能需要加熱）。 建議的儲備溶液是1mM水溶液。 用作蛋白酶抑制劑的有效濃度為1至10μM。 含水原液在-20℃下穩(wěn)定數(shù)月。 稀釋的溶液在中性pH下穩(wěn)定數(shù)天。 E-64在pH 2-10下穩(wěn)定，但在氨或HCl中不穩(wěn)定。 E-64也可溶于DMSO，可在干燥的DMSO中制備10mM溶液并儲存在-20℃。 隨后在培養(yǎng)基中稀釋。 通過將E-64溶解在0.9％氯化鈉或最少量的飽和碳酸氫鈉中，然后用0.9％氯化鈉稀釋（用乙酸調(diào)節(jié)pH至7.0）來制備注射用溶液。

應(yīng)用

E-64是半胱氨酸蛋白酶親和純化的有效配體。 當(dāng)與硫醇化親和基質(zhì)偶聯(lián)時，結(jié)合不再是不可逆的，而是保留了特異性。

生物化學(xué)/生理學(xué)行為

E-64是一種不可逆的，有效的，高選擇性的半胱氨酸蛋白酶抑制劑。 E-64不與非蛋白酶的功能性硫醇基團(tuán)反應(yīng)，例如L-乳酸脫氫酶或肌酸激酶。 E-64不會像其他半胱氨酸蛋白酶抑制劑，leupeptin和antipain那樣抑制絲氨酸蛋白酶（胰蛋白酶除外）。 E-64的反式環(huán)氧琥珀酰基（活性部分）不可逆地結(jié)合許多半胱氨酸蛋白酶中的活性硫醇基團(tuán)，例如木瓜蛋白酶，獼猴桃酶和組織蛋白酶B，H和L，以形成硫醚鍵。 E-64是一種非常有用的半胱氨酸蛋白酶抑制劑，用于體內(nèi)研究，因為它具有特異性抑制作用，在細(xì)胞和組織中具有滲透性和低毒性。