從10-250ul血液及相關體液等樣品中直接提取總DNA
產品介紹
本試劑盒適用于哺乳動物血液核酸提取,不含苯酚等有毒化學試劑組分,采用獨特的緩沖液配方 Buffer IRB 最大限度去除血液抑制劑的影響,同時應用先進的硅膠膜吸附技術,操作簡單、快速。得到的 DNA 比傳統試劑盒純度更高,可直接用于酶切、轉化、測序及 PCR 等分子生物學實驗。
存儲條件
本產品除 Proteinase K 溶液和 RNase 溶液外,可在室溫(15~25℃)保存 12 個月。低溫下 Buffer BL 或 Buffer IRB 可能會有沉淀形成,使用時需 55℃水浴讓沉淀完全溶解。Proteinase K 溶液和 RNase A 溶液冰袋運輸,收到產品后請分裝保存于-20℃。
需要額外準備的材料
□ 無水乙醇(96%-100%) □ 無菌 1.5/2ml 離心管 開始前注意事項 請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。 ● Buffer BL 和 Buffer IRB 是如有混濁現象,可在 55℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復澄清。 ● 基因組提取所有步驟都在室溫(15-25°C)下進行。
開始前試劑準備
□ 按瓶子標簽所示,Buffer BL 及 Buffer IRB 中加入適量的無水乙醇稀釋,于室溫密封保存。
DNA 濃度及純度檢測
? 回收得到的 DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測純度與濃度。 ? DNA 應在 OD260 處有顯著吸收峰,OD260 值為 1 相當于大約 50μg/ml 雙鏈 DNA、40μg/ml 單鏈 DNA。 ? OD260/OD280 比值應為 1.7-2.0,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用 ddH2O,比值會略低,因 為 pH 值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
應用領域
該方案適合于從約 10μl-1ml 人類的抗凝血液、血清、血漿、尿液、或其它體液樣品中直接提取總 DNA。 該方案直接對樣品進行裂解消化,獲得的 DNA 包括了基因組 DNA(如淋巴細胞、線粒體 DNA、游離的 DNA(>100bp)、以及病毒 DNA(如乙肝)等;
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