Lentivirus Concentrate Solution, 4×
【保存條件及效期】
4℃保存。
【用途】
本產品適用于從細胞培養液等無細胞生物樣品中濃縮慢病毒,可濃縮 10-100 倍。
【使用方法】
1. 將10cm培養皿的上清液收集到15ml無菌離心管中,低速離心棄細胞沉淀吸取上清液(注: 避免上清液中漂浮的部分細胞影響);
2. 小心地將上清液轉移到新的 50 ml 無菌離心管中;
3. 在 3 體積的上清液中加入 1 體積的病毒濃縮液(如 30ml 細胞上清液加入 10ml 病毒濃縮 液)
4. 振動 60 秒以充分混勻(病毒濃縮液較粘稠,一定留意充分混勻),然后在 4℃環境以 60 轉/分鐘左右的恒速搖動孵育至少 4 小時 (過夜 4℃搖動孵育效果更好)
5. 將管取出,于 4℃以 1600×g 轉速離心 60 分鐘
6. 小心除去上清液,不要干擾沉淀(注:沉淀的多少并不一定代表病毒數量,沉淀更多的是 細胞培養基中的血清蛋白及部分基因組 DNA。若沉淀量不明顯,則殘留少量液體后再 重懸) 7. 將病毒沉淀完全重懸于原來體積的 1/10?1/20 或所需的培養基(無血清和抗生素)中, 輕輕上下吹打混勻 8. 分裝并儲存在-80 ℃直到使用(注:濃縮液使用前無菌 0.45μm 過濾除菌);
【注意事項】
1. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 本品為非無菌產品,因其成份較為粘稠無法較好過濾。
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