DAPI Solution,10μg/ml

【保存條件】 

-20℃避光保存，有效期 1 年。 

【進(jìn)口原料】 

ROCHE REF10236276001, LOT35273022（不同批次產(chǎn)品原料批次會有更新） 

【概述】 

DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽)是一種能夠與 DNA 中大部分 A、T 堿基相互結(jié) 合的熒光染料，常用于熒光顯微鏡觀測。因為 DAPI 可以透過完整的細(xì)胞膜，它可以用于活 細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。當(dāng) DAPI 與雙鏈 DNA 結(jié)合時，最大吸收波長為 358nm，最大發(fā)射 波長為 461nm。DAPI 的發(fā)射光為藍(lán)色，且 DAPI 和綠色熒光蛋白 GFP 或 Texas Red 染劑(紅 色熒光染劑)的發(fā)射波長僅有少部分重疊，可以利用這項特性在單一的樣品上進(jìn)行多重?zé)晒?染色。本產(chǎn)品母液為 DMF 溶解，后以 PBS 稀釋為 DAPI-PBS 溶液，濃度為 10μg/ml。經(jīng)過 濾處理，為即用型工作液，可直接用于固定細(xì)胞或組織樣品的細(xì)胞核染色。 

【使用方法（僅供參考）】 

1. 對于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色， 則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行 DAPI 染色。如果不需要進(jìn)行其它染 色，則直接進(jìn)行后續(xù)的 DAPI 染色。 

2. 對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量 DAPI 染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至 少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液，混勻。 

3. 室溫放置 5-10 分鐘。 

4. 吸除 DAPI 染色液，用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次，每次 3-5 分鐘。 

5. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細(xì) 胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。 

【注意事項】 

1. DAPI 被普遍認(rèn)為具有致癌性，操作時應(yīng)戴手套，并避免交叉污染。 

2. 本產(chǎn)品需避光，并盡量避免反復(fù)凍融。 

3. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。