【保存條件】
4℃避光儲存,有效期 1 年
【概述】
臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存活率,是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞細胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺盼藍,細胞不會被染成藍色;而喪失活性或細胞膜不完整的 細胞可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經(jīng)死亡。
臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故可用于巨噬細胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍拒染 現(xiàn)象。臺盼藍染色后,通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù),就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。染色時間只需 3-5 分鐘,操作簡單。
【使用建議】
臺盼藍染色常用濃度為 0.04%,該產(chǎn)品使用建議以臺盼藍染色液終濃度為 0.04%為例,如需使用其他終濃度,該使用建議僅供參考。
1. 收集細胞:用胰酶或 EDTA 消化貼壁細胞,懸浮細胞可直接收集。收集細胞時用 1000-2000rpm 離心 1 分鐘,棄上清,制備單細胞懸液,并做適當稀釋。
2. 臺盼藍染色:細胞懸液與 1%臺盼藍溶液以 24:1 比例混勻(終濃度 0.04%),染色 3 分 鐘 (染色 3 分鐘時間已經(jīng)足夠,但染色時間可以更長一些,但不宜超過 10 分鐘)。
3. 細胞計數(shù):吸取少量經(jīng)過染色的細胞,用血細胞計數(shù)板計數(shù)。死細胞著藍色并膨大,無光澤;活細胞不著色并保持正常形態(tài),有光澤。通常要比較精確地進行定量,每個細胞樣品至少數(shù) 500 個細胞。
細胞存活率(%)=活細胞總數(shù) /(活細胞總數(shù)+死細胞總數(shù))×100%
【注意事項】
1. 染色時間不宜過長,否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色,使檢測結(jié)果偏低。
2. 本產(chǎn)品長時間存放可能會出現(xiàn)少量顆粒狀沉淀,可在 37℃水浴約 10 分鐘以充分溶解沉 淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。
3. 臺盼藍有潛在致癌風險,請注意適當防護。
4. 僅限于科研使用,不可用于各種食品藥品或臨床治療中。
5. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
用戶名: | (可為空) |
E-mail: | *(必填) |
評價等級: | |
評論內(nèi)容: |
*(必填)
|