RNA Holder Stabilization Solution
【保存條件】 室溫(15-30℃)保存一年
【概述】 RNA holder 是一種無毒的可直接使用的樣品儲存液,能迅速穩定組織,保護非冷凍細 胞 RNA 于原位。可以快速可靠地保存動物組織、細胞內的 RNA。組織獲取后立即浸入 RNA holder 保存液中,在室溫可以保存 7 天,4℃可以保存 4 周,-20℃、-80℃標本可以長期保存, RNA 穩定存在不降解,取出后用各類方法抽提可以獲得高質量的 RNA。
【操作方法】 1. 根據要保存的各樣本的體積,計算出所需 RNA holder 用量。RNA holder 的用量應當是組 織體積的 10 倍(如 100mg 組織約用 1ml RNA holder);離心收集 2×106 細胞 RNA holder 的用量是 1ml。 2. 將 RNA holder 按需要量分裝入自備保存管中; 3. 快速將較大的組織切成任何一邊最大厚度不大于 0.5cm 大小,然后將組織碎塊放入到 10 倍體積的 RNA holder 中保存。注:組織過厚則 RNA holder 不能有效滲入,組織中間部位的 RNA 不能受到保護。 4. 保存時先將樣本浸入 RNA holder 后置 4℃冰箱過夜(使 RNA holder 完全滲入到組織中), 然后轉移至-20℃冰箱(RNA holder 在-20℃仍為液態,有結晶析出為正常情況),或者過夜 取出后直接轉移至-80℃,可反復凍融 20 次不影響 RNA 質量。
【注意事項】 1. 組織和細胞取材要快速,防止 RNA 降解。冰凍組織不能用 RNA holder 保存,因其不能 有效滲入冰凍組織中。 2. 保存樣品的提取:組織樣本從-20℃或-80℃取出后,復蘇到室溫后,取出組織塊置于 RNA 提取液(如 Trizol)中再行提取。細胞樣本復溫后低速離心收集細胞,去除 RNA holder
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