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產品細節圖:
Total Exosome Isolation Reagent(from cell culture media)
【保存條件】
4oC 保存，有效期一年
【概述】
外泌體是含有復雜 RNA 和蛋白質的小囊泡（30-120 nm），所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。外泌體被認為是細胞間的信使，在特定細胞之間傳遞其效應物或向大分子發出信號，然而它們的形成、組成以及涉及它們的生物學途徑仍未完全了解。
外泌體功能和運輸的生物學研究要求完整的外泌體的分離，但是目前使用的方法繁瑣，非特異性且困難。ECOTOP 細胞培養基上清外泌體提取試劑為從細胞培養基樣品中濃縮完整外泌體提供了一種簡單而可靠的方法。通過束縛水分子，從細胞培養基中分離總外泌體試劑可將溶解度較低的組分（即外泌體）從溶液中擠出，從而允許它們在短暫，低速離心后收集。
ECOTOP 細胞培養基上清外泌體提取試劑可以從細胞培養基樣品中快速高效地富集完整的外泌體。
?為任何類型的下游應用最大限度地大大提高完整外泌體的回收率
? 使用簡單可靠的實驗方案輕松分離外泌體
? 避免耗時的超速離心
? 靈活性極佳—可以根據樣品量按比例增加或減少
【操作方法】
樣品處理：
1. 收集細胞培養基。
2. 以 2000×g 離心細胞培養基 30 分鐘使細胞和碎屑沉淀。
3. 將不含細胞的上清液轉移至新管中，注意不要吸到管底的細胞及碎屑。
外泌體分離：
1. 從上一步分離的不含細胞的上清液中取所需體積至新管中，并加入 0.5 倍體積的ECOTOP 細胞培養基上清外泌體提取試劑。如 1ml 上清液加入 0.5ml 提取試劑，或10ml 上清液加入 5ml 提取試劑。
2. 將上清液與提取試劑吹打混勻或渦旋混勻。
3. 將混勻好的樣品 2-8℃過夜孵育。
4. 孵育完成后，在 2-8℃條件下 10000×g 離心 1 小時。
5. 完成離心后，吸走并丟棄上清液，外泌體即包含在試管底部的沉淀中（大多數情況
下是不可見的）。
6. 加入合適體積的 1×PBS 或其他類似緩沖液重懸沉淀。具體見下表：
7. 當沉淀重新懸浮之后，所得的外泌體即可進行下游分析或通過親和層析進一步純化。提純后的外泌體可在 2-8℃中保存 1 周或在小于-20℃中長期保存。
【注意事項】
1. 本試劑可室溫保存，4℃保存也可。
2. 取上清注意避免吸入細胞或細胞碎片（重要！），合并相同的細胞培養液上清樣品，裝入無菌的玻璃瓶，可在 4℃短期保存（1-2 天），長期保存可凍存于-80℃。
3. 細胞上清分離后盡快進行外泌體分離，保存在 4℃和-80℃，都會對產量有一定的影響。
4. 做少量 WB 實驗一般 1ml 細胞培養上清液或尿液樣本基本足夠，但為了足量分離 外泌體做 RNA 或蛋白質分析，我們推薦使用大于 10ml 樣本量來分離 外泌體。
5. 分離外泌體可用于細胞功能研究或根據后續研究加入相應 Trizol 或蛋白裂解液抽提RNA 或蛋白質或 1:100 PBS 稀釋行粒徑檢測；
6. 本品僅限用于科研實驗。
暫時沒有說明書
1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影響因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影響因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
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