Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit

【保存條件】

 -20℃保存一年 【使用建議（僅供參考）】 

1. 準(zhǔn)備溶液：室溫融解試劑盒中的三種試劑，溶解后立即放置在冰上，混勻。取適當(dāng)量的細(xì) 胞漿蛋白抽提試劑 CE I/II 及細(xì)胞核蛋白抽提試劑 NE 備用，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶 抑制劑混合物及 PMSF，使 PMSF 的最終濃度為 1mM（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

 A: 對(duì)于貼壁細(xì)胞：用 PBS 洗一遍，用細(xì)胞刮子刮下細(xì)胞，或用 EDTA 溶液處理細(xì)胞使細(xì)胞 不再貼壁很緊，并用移液器吹打下細(xì)胞。離心收集細(xì)胞，盡最大努力吸盡上清，留下細(xì)胞沉 淀備用。（注：盡量避免用胰酶消化細(xì)胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。）

 B: 對(duì)于懸浮細(xì)胞：用預(yù)冷的 PBS 清洗一遍，離心收集細(xì)胞，盡最大努力吸盡上清，留下細(xì) 胞沉淀備用。 2. 每 20 微升細(xì)胞沉淀加入 100 微升添加了 PMSF 和蛋白酶抑制劑的細(xì)胞漿蛋白抽提試劑 CE I。（對(duì)于 200 萬(wàn) HeLa 細(xì)胞，其細(xì)胞沉淀的體積大約為 20 微升或 40 毫克。)