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Trypsin-EDTA (0.25%)
這種液體胰蛋白酶配方內含 EDTA 和酚紅。ECOTOP 胰蛋白酶-EDTA 由胰蛋白酶粉(來自豬胰腺的蛋白酶輻照混合物)制成。鑒于其消化強度,胰蛋白酶被廣泛用于細胞解離、常規細胞培養傳代以及初生組織解離。解離所需的胰蛋白酶濃度因細胞類型和實驗要求而異。
【保存條件】 4℃保存,一年有效。短期內不使用,可-20℃保存延長有效期。
【概述】 0.25%胰酶細胞消化液(含 EDTA)含 0.25%胰酶、EDTA 和酚紅,pH 值為 7.2-7.8。該消 化液經過過濾除菌,可以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化。
【使用建議(僅供參考)】 1. 貼壁細胞的消化: a.吸去培養液,用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。 b.加入少量 0.25%胰酶細胞消化液(含 EDTA),略蓋過細胞即可,室溫放置 30 秒至 2 分鐘。 不同的細胞消化時間有所不同。 c.顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變 化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血 清的完全細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。 d.如果發現消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。 如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落,直 接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰 酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2. 組織的消化: a.不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
【注意事項】
1. 胰酶消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
2. 注意無菌操作,盡量避免污染。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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