【保存條件】
4℃避光儲存,有效期 12 個月
【概述】
結晶紫染色液是革蘭氏染色法中的一種成分。革蘭陽性菌染色中,細胞經結晶紫染色后 再經 Gram 碘液處理,形成不溶性復合物,該復合物不能通過細胞壁,不易被脫色,所以保持紫色。染色后細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征,而用以分類鑒定。
【使用建議】
按實驗具體要求操作或參考下列革蘭氏染色的方法。
涂片:取待檢細菌,于載玻片中央涂成薄層或者在載玻片上滴加少許無菌水,取菌與水混合 均勻,涂成薄層。
干燥:涂片后在室溫下自然干燥,也可在酒精燈上略加溫,使之迅速干燥。
固定:手持載玻片一端,標本面朝上,在酒精燈的火焰外側快速來回移動 3~5 次,每次 1s, 溫度不宜過高,防止菌體蛋白變性,放置待涼后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
初染:滴加結晶紫染色液染色 1-2min,清水沖洗去染色液。
媒染:滴加 Gram 碘液,并覆蓋載玻片室溫放置 1-2min,水洗。
脫色:滴加脫色液搖動,搖動 10~30s,直至流下的脫色液不出現紫色為止,立即用水沖去 脫色液,終止反應。
復染:滴加沙黃染色液染色,30~60s,水洗,干燥。
鏡檢:置油鏡觀察。
染色結果:革蘭氏陽性菌為藍色至紫色;革蘭氏陰性菌為紅色。
【注意事項】
1. 涂片之前,應事先在背面做好圓圈標記,以便判斷后續試驗的位置。
2. 待檢細菌培養時間會影響染色,陽性菌培養時間過長或已死亡或細菌溶解,常呈陰性。
3. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 4. 結晶紫對人體有害,請注意適當防護。
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