Trypan Blue Stain solution,1%

【保存條件】 

4℃避光儲(chǔ)存，有效期 1 年 

【概述】 

臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲(chóng)藍(lán)，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的 細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。 

臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染 現(xiàn)象。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時(shí)間只需 3-5 分鐘，操作簡(jiǎn)單。 

【使用建議】 

臺(tái)盼藍(lán)染色常用濃度為 0.04%，該產(chǎn)品使用建議以臺(tái)盼藍(lán)染色液終濃度為 0.04%為例，如需使用其他終濃度，該使用建議僅供參考。 

1. 收集細(xì)胞：用胰酶或 EDTA 消化貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞可直接收集。收集細(xì)胞時(shí)用 1000-2000rpm 離心 1 分鐘，棄上清，制備單細(xì)胞懸液，并做適當(dāng)稀釋。 

2. 臺(tái)盼藍(lán)染色：細(xì)胞懸液與 1%臺(tái)盼藍(lán)溶液以 24:1 比例混勻（終濃度 0.04%），染色 3 分 鐘 (染色 3 分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠，但染色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些，但不宜超過(guò) 10 分鐘)。 

3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)：吸取少量經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大，無(wú)光澤；活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài)，有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù) 500 個(gè)細(xì)胞。 

細(xì)胞存活率（%）=活細(xì)胞總數(shù) /（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×100% 

【注意事項(xiàng)】 

1. 染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色，使檢測(cè)結(jié)果偏低。 

2. 本產(chǎn)品長(zhǎng)時(shí)間存放可能會(huì)出現(xiàn)少量顆粒狀沉淀，可在 37℃水浴約 10 分鐘以充分溶解沉 淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 

3. 臺(tái)盼藍(lán)有潛在致癌風(fēng)險(xiǎn)，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。 

4. 僅限于科研使用，不可用于各種食品藥品或臨床治療中。 

5. 為了您的安全與健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。