16% Tissue Fixer 16%PFA

【保存條件】 

-20℃避光保存，有效期 1 年；4℃避光儲存，有效期 3 個月。 

【概述】 

固定液可使細胞或組織的蛋白質凝固，終止內源性或外源性酶反應，防止組織自溶或 異溶，以保持原有結構和形態。對免疫組化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活 或彌散。固定液種類很多，常見的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。 

多聚甲醛固定液是一種廣泛用于免疫組化(IHC)、免疫熒光( IF)、免疫細胞化學(IC)、 流式分析(FACS)等檢測時組織、組織切片、細胞等生物樣品固定的溶液。 

本產品為 16% 多聚甲醛 PBS 溶液(16% PFA)，主要由多聚甲醛、磷酸鹽、去離子水組 成，該固定液適合于絕大多數組織和細胞的固定，是免疫組織化學和培養細胞的固定液之 一，它能較好的保護組織和細胞的形態結構以及核酸。其固定效果好、應用廣，適用于各 種常見細胞或組織的固定，對皮膚、肌肉、內臟等均有良好的固定效果，但主要作用于蛋 白質，無法固定尿酸和糖類等。 若需使用低濃度多聚甲醛，可使用 PBS 按比例稀釋。 

【使用建議】 

4%多聚甲醛固定液為常用組織細胞固定液，該操作步驟以 4%多聚甲醛固定液為例。如需使用濃度為 16%的多聚甲醛固定液，該操作步驟僅供參考。 

對于細胞樣品，去除培養液后，按照每六孔板一個孔加入 1 毫升固定液的比例，加入 4% 多聚甲醛固定液。

對于細胞涂片等其它細胞樣品，加入固定液的量以充分蓋住樣品為準。 通常室溫固定 10-20 分鐘即可，但固定較長時間，例如 1-2 小時也是可以的。后續需使用 適當的洗滌液充分洗滌以去除殘留的多聚甲醛。 

對于組織切片，加入 4% 多聚甲醛固定液量以充分覆蓋切片為準，或使用染色架進行固 定。通常室溫固定 10-20 分鐘即可完成固定，但切片較厚時可以固定較長時間，例如 1-2小時。后續需使用適當的洗滌液充分洗滌以去除殘留的多聚甲醛。 

對于組織塊樣品，浸泡入 4% 多聚甲醛固定液中，室溫或 4℃浸泡固定 2 到 24 小時。建議 不超過 8 小時，除非組織塊特別大，難以滲透。固定完成后，放入裝有蒸餾水的離心管中 清洗，每 15-30 分鐘換一次水，共 6-8 次，建議在搖床進行，或用流水沖洗 1-2 小時。隨后梯度脫水，進行包埋。如果暫時不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。 

如將組織樣品置于 16% 多聚甲醛固定液中浸泡儲存，請避光放置。 

【注意事項】 

1. 僅限于科研使用，不可用于各種食品藥品或臨床治療中。 

2. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

3. 本產品放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸，使溶液 pH 降低，從而影響染色。 

4. 不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織 塊的大小來調整固定時間。 

5. 多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易 碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。 

6. 多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中，固定完成后用適當的洗滌液或水 沖洗數小時仍會有殘留，因此后續實驗結果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚 甲醛。 

7. 多聚甲醛固定液固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進 行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。 

8. 醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分 子間交聯形成的網格結構可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露， 可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在 進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。